變應性鼻炎患者Th17/Treg細胞比例與病情嚴重程度的相關性分析

張辰，李斌，鄭沙盟

變應性鼻炎是目前我國人群中較為高發的呼吸系統疾病[1-3]。變應性鼻炎是人體接觸特定的變應原之后，由體內IgE所介導的鼻黏膜非感染性疾病，若干種類的免疫活性細胞和細胞因子均參與發病過程[4-6]。在變應性鼻炎患者的發病早期，及時識別患者的病變嚴重程度，并采取積極的治療措施，控制癥狀，被認為是變應性鼻炎的疾病控制準則[7-8]。近年研究結果顯示，Th17 和Treg細胞免疫失衡是導致病變出現的主要原因之一，變應性鼻炎患者體內出現了Th17 細胞的過度激活和Treg 細胞表達水平的降低或者缺失[9]。本研究探討變應性鼻炎患者Th17/Treg 細胞比例與病情嚴重程度的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 病例納入標準 納入標準：（1）確診為變應性鼻炎，診斷標準參照文獻[10]；（2）年齡＞18 歲，采集標本前未接受對結果可能產生影響的治療；（3）自愿接受本研究方案，簽署知情同意書。排除標準：（1）有鼻腔外科手術史；（2）就診7d內有呼吸道感染或處于其他急性感染期；（3）合并惡性腫瘤等嚴重疾病；（4）合并自身免疫性疾病。

1.2 一般資料 收集2017 年1 月至2020 年3 月浙江省中醫院收治的符合上述標準的變應性鼻炎患者177 例為觀察組，另外收集同期進行健康體檢者180例為對照組。兩組一般資料差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。本研究已通過醫院醫學倫理委員會審批。

表1 兩組一般資料比較

1.3 方法

1.3.1 Th17/Treg 細胞比例檢測 在患者就診后，未接受任何有效干預前抽取患者晨起空腹肘部外周靜脈血5 ml，采用流式熒光法檢測Th17 及Treg，計算Th17/Treg 細胞比例。使用Attune NxT流式細胞儀（上海沫錦醫療器械有限公司），試劑盒均購自上海邦景實業醫療科技有限公司。

1.3.2 鼻通氣功能檢查 在患者就診后，未接受任何有效干預前采用NV1 鼻聲反射儀[英國吉姆（GM）公司]進行檢測，要求患者在安靜環境中穩定10 min后開始檢測，將探頭放置在患者的鼻孔前，雙側鼻孔分別測試3 次，取平均值。記錄鼻腔容積、鼻腔最小橫截面積、最小橫截面積與前鼻孔距離及鼻阻力。

1.3.3 血清炎性因子檢測 在患者就診后，未接受任何有效干預前抽取患者晨起空腹肘部外周靜脈血5 ml，采用酶聯免疫吸附法檢測白細胞介素-4（IL-4）、白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-12（IL-12）及白細胞介素-31（IL-31）。試劑盒均購自上海邦奕生物科技有限公司。

1.4 統計方法 采用SPSS 24.0 統計軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差表示，采用t 檢驗；計數資料采用檢驗；相關性分析采用Pearson 相關分析。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組Th17/Treg 細胞比例水平比較觀察組Th17、Th17/Treg均高于對照組，Treg 低于對照組（均P＜0.05），見表2。

表2 兩組Th17/Treg 細胞比例水平比較

2.2 兩組鼻通氣功能指標比較 觀察組鼻腔容積、鼻腔最小橫截面積、最小橫截面積與前鼻孔距離均低于對照組，鼻阻力高于對照組（均P＜0.05），見表3。

表3 兩組鼻通氣功能指標比較

2.3 兩組血清炎性因子水平比較 觀察組IL-4、IL-6、IL-12、IL-31 均高于對照組（均P＜0.05），見表4。

表4 兩組血清炎性因子水平比較

2.4 相關性分析 Th17、Th17/Treg 與鼻腔容積、鼻腔最小橫截面積及最小橫截面積與前鼻孔距離均呈負相關，Treg與鼻阻力、IL-4、IL-6、IL-12 及IL-31 均呈負相關（P＜0.05）；Th17、Th17/Treg與鼻阻力、IL-4、IL-6、IL-12、IL-31 均呈正相關，Treg與鼻腔容積、鼻腔最小橫截面積及最小橫截面積與前鼻孔距離均呈正相關（均P＜0.05）。見表5。

表5 Th17/Treg 細胞比例與鼻通氣功能指標、血清炎性因子的相關性分析

3 討論

以往有研究證明Th1/Th2 細胞的失衡是導致人體發生變應性鼻炎的主要原因之一[11]。而隨著近年研究的持續深入，部分學者發現較為經典的Th1/Th2 細胞失衡學說沒有辦法將變應性鼻炎的發病機制完全解釋清楚，而本研究重點分析的Th17/Treg 細胞可能在變應性鼻炎的發病過程中扮演的角色。Treg 細胞隸屬于CD4+T 淋巴細胞群，能夠通過T 細胞受體所介導的細胞間作用，對抑制效應性T 細胞的增殖和功能實現。人體若發生Treg 細胞的功能缺陷，可以導致多種疾病的發生，較為高發的如惡性腫瘤、變態反應性疾病及自身免疫性疾病等[12]。Th17 細胞也屬于CD4+T 淋巴細胞的亞群，其區別于常見的Th1、Th2 及Treg等，Th17 細胞所分泌出的細胞因子IL-17具有強大的中性粒細胞趨化能力[13]。以往的變應性鼻炎動物模型研究結果顯示，小鼠血清中的IL-17 含量明顯增高[14]。

本研究結果顯示觀察組Th17 及Th17/Treg比例均高于對照組，而觀察組Treg 低于對照組；這提示變應性鼻炎患者Th17 細胞異常激活，同時Treg 細胞降低，這說明Th17/Treg細胞的失衡與變應性鼻炎的發病具有一定的關聯。隨著患者病情的進展，變應性鼻炎患者會逐漸出現鼻部的通氣功能障礙。鼻聲反射技術是對鼻腔功能進行檢測的常用手段之一，借助聲波反射的原理對人體的鼻腔以及鼻咽腔所反射的聲波信號進行捕捉，經過數據回傳及計算處理后，得到鼻腔的橫截面面積及鼻腔體積等參數[15]。變應性鼻炎患者鼻腔黏膜的敏感性明顯增加，經過激發試驗之后，能夠使鼻腔容積和橫截面積迅速降低。本研究結果顯示變應性鼻炎患者的各類鼻通氣功能指標與健康對照組差異均有統計學意義，這進一步說明變應性鼻炎患者的鼻黏膜敏感性顯著提升。相關分析結果顯示各類鼻通氣指標與Th17、Treg 及Th17/Treg 比例均有相關性。

變應性鼻炎的發病過程涉及多種炎性細胞及相應的細胞因子，IL-4 及IL-6是較為典型的人體促炎性反應因子，由單核巨噬細胞分泌，可以誘導中性粒細胞趨化到鼻黏膜的局部，加重鼻腔內的炎性反應及臨床癥狀。變應性鼻炎患者IL-12表達水平顯著上升，其能夠誘導CD4+Th細胞向Th1 細胞的分化過程。IL-31 是由人體已經活化的Th2 細胞分泌，也是介導患者皮膚瘙癢癥狀及變應性鼻炎T細胞之間的細胞因子。本研究結果顯示變應性鼻炎患者各類炎性反應因子的水平均高于健康體檢者，這說明變應性鼻炎患者存在較為明顯的炎性反應。而且相關性分析結果顯示各類炎性細胞反應因子同Th17、Treg 及Th17/Treg 比例均有相關性，這提示Th17/Treg 細胞比例失衡也可能是患者全身或局部炎性反應的重要影響因素，也是變應性鼻炎患者病情惡化的病理機制之一。

綜上所述，變應性鼻炎患者外周血中Th17/Treg 細胞免疫紊亂，同時也是變應性鼻炎患者出現鼻通氣功能障礙和全身炎癥反應的主要原因之一，對于Th17/Treg 細胞免疫紊亂的研究可能成為治療變應性鼻炎新的用藥靶點。