生豬人工授精相關(guān)環(huán)節(jié)的技術(shù)要點(diǎn)探討

李 盈郭 旭陳成思

（保亭黎族苗族自治縣畜牧漁業(yè)服務(wù)中心，海南保亭 572300）

生豬人工授精可以提高良種公畜的種用價(jià)值和配種利用率，擴(kuò)大受配母畜的頭數(shù)，防止因種公豬帶病而傳播各類(lèi)生殖系統(tǒng)疾病，但人工授精的應(yīng)用效果也受到精液品質(zhì)、母豬體況、發(fā)情周期等因素的影響，需要把握好精液采集、精液稀釋、精液品質(zhì)鑒定、背膘厚測(cè)定、同期發(fā)情、發(fā)情鑒定等各個(gè)環(huán)節(jié)的技術(shù)要點(diǎn)[1]。

1 精液采集技術(shù)要點(diǎn)

1.1 采精前準(zhǔn)備

采精前要對(duì)采精欄和假臺(tái)畜進(jìn)行清洗消毒，檢查假臺(tái)畜是否穩(wěn)固，并根據(jù)公豬的大小調(diào)整假臺(tái)畜的高度。集精杯干凈無(wú)污染，且要先預(yù)熱，內(nèi)置過(guò)濾紙；準(zhǔn)備盆、高錳酸鉀、生理鹽水、抹布、紙巾等，方便清洗消毒。檢查公豬健康狀況以確保精液品質(zhì)；核對(duì)公豬欄號(hào)、耳號(hào)。采精員要求熟練掌握采精技巧，修剪指甲，清洗消毒手臂。

1.2 精液采集注意事項(xiàng)

1.2.1 種公豬發(fā)燒時(shí)不可采精

精子最適溫度為18～25℃，公豬體溫高于38℃，容易造成精子死亡[2]，因此，在公豬發(fā)燒時(shí)最好不采精。

1.2.2 初精應(yīng)廢棄

種公豬首先射出的精清部分，精子含量少，且含菌量大，一般不收集。當(dāng)射出的精液呈乳白色時(shí)開(kāi)始用集精杯收集。

1.2.3 手握法采精

采精過(guò)程中不要松手，否則壓力減輕將會(huì)導(dǎo)致精液中斷；射精不完整會(huì)導(dǎo)致公豬生殖疾病。種公豬一般會(huì)分2～3次進(jìn)行射精，每次都會(huì)射出部分凝膠，當(dāng)有液滴樣凝膠流出時(shí)，馬上移開(kāi)集精杯，以避免污染精液。

1.2.4 注意保存

采精完成后不要讓精液接觸陽(yáng)光、高溫、低溫、自來(lái)水及其他可減弱精子活力的物質(zhì)。精子常溫保存溫度為 18～25℃[3]。

2 精液品質(zhì)鑒定技術(shù)要點(diǎn)

2.1 精子活力檢測(cè)

檢測(cè)精子活力前，需打開(kāi)恒溫水浴鍋、恒溫操作臺(tái)，并設(shè)置溫度為37℃，精子需預(yù)熱至37℃，在200倍顯微鏡下檢測(cè)活力。采用“十級(jí)一分制”，只將作直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子列為有活力的精子，原地轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)、擺動(dòng)、死亡的精子均為不合格的精子。精液中如有80%的精子作直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)，精子活力計(jì)為80%，以此類(lèi)推。常溫保存的新鮮精液，精子活力應(yīng)在0.7以上方可使用。

2.2 精子密度檢測(cè)

2.2.1 精子密度測(cè)定儀檢測(cè)

用移液槍吸取少量精液樣品滴入檢測(cè)片，確保檢測(cè)片內(nèi)縫隙全部吸入精液，無(wú)氣泡殘留；把載有精液樣品的檢測(cè)片插入精子密度測(cè)定儀中進(jìn)行測(cè)定，讀取測(cè)定結(jié)果[4]。

2.2.2 血細(xì)胞計(jì)數(shù)法

吸取3%Nacl溶液（稀釋并殺死精子）2 700 μL置于小試管中，再吸取300 μL搖勻的待測(cè)精液置于小試管中，上下混勻。從小試管中吸取20 μL稀釋后的精液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板血蓋片的邊緣，使稀釋后的精液通過(guò)虹吸作用，滲入計(jì)數(shù)室內(nèi)，無(wú)氣泡產(chǎn)生。將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板置于顯微鏡下，低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室，再用400倍高倍鏡選取四角和中央共5個(gè)中方格計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)要以精子頭部為準(zhǔn)，遵循“上計(jì)下不計(jì)，左計(jì)右不計(jì)”的原則。

精子密度（個(gè)/mL）＝5個(gè)中方格的精子數(shù)目×5×10×1 000×10。

2.3 豬精液品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

豬精液品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)和輸精標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1和表2。

表1 豬的精液品質(zhì)鑒定標(biāo)準(zhǔn)

表2 傳統(tǒng)輸精與深部輸精法有效精子數(shù)對(duì)比

3 精液稀釋

3.1 稀釋倍數(shù)

在原精液精子活力合格（≥70%）的前提下，有3個(gè)因素決定精液的最終稀釋倍數(shù)，分別為原精液的精子密度、用于輸精的每份精液的總精子數(shù)和每份精液的體積。

3.2 精液稀釋

將原精液從采精杯移入到已預(yù)熱好的燒杯中，并從水浴鍋中取出已預(yù)熱好的稀釋液，確保原精液與稀釋液的溫度相同或相差在1℃以?xún)?nèi)，將稀釋液按照1∶1的比例沿?zé)诰徛尤氲皆褐校幌♂屚瓿珊笤俅螜z測(cè)精液活力，保證精子活力合格（≥70%）。

3.3 精液稀釋原則

等溫稀釋原則；稀釋液與原精液的溫度要保持相同或相近（溫差≤1℃）。稀釋方向正確原則；確保把稀釋液加入到原精液中，而不能反向稀釋。高倍稀釋要分步進(jìn)行，先低倍稀釋再高倍稀釋。第一次稀釋完成后，稍等2～3 min再進(jìn)行下次稀釋?zhuān)看蜗♂尡稊?shù)為1～2倍。

4 母豬批次化生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)

母豬批次化生產(chǎn)可實(shí)現(xiàn)全進(jìn)全出，阻斷豬群疾病的傳播，有利于生產(chǎn)統(tǒng)籌管理，形成發(fā)情、配種、分娩聯(lián)動(dòng)，提高生產(chǎn)效率。批次化生產(chǎn)技術(shù)主要包括定時(shí)輸精技術(shù)和分娩同期化技術(shù)，其中定時(shí)輸精技術(shù)又包括發(fā)情周期、卵泡發(fā)育、發(fā)情鑒定、排卵和人工授精技術(shù)等5個(gè)方面的同期化。

4.1 批次化生產(chǎn)模式

生產(chǎn)批次數(shù)主要由母豬繁殖周期的長(zhǎng)度和2個(gè)生產(chǎn)批次之間的間隔時(shí)間決定。母豬繁殖周期一般為140～147 d，包括妊娠期114 d，哺乳期21～28 d，斷奶—配種間隔4～7 d。目前常用的批次化生產(chǎn)模式主要有周批次生產(chǎn)模式和非周批次生產(chǎn)模式。整周批次生產(chǎn)模式包括1周批次、2周批次、3周批次、4周批次等。非整周批次生產(chǎn)模式包括8 d批次、10 d批次、12 d批次等。

4.2 定時(shí)輸精技術(shù)

4.2.1 發(fā)情周期同期化

母豬斷奶后體內(nèi)的催乳素分泌下降，發(fā)情周期逐漸恢復(fù)。為實(shí)現(xiàn)批次化管理，可以通過(guò)同一批哺乳母豬同時(shí)斷奶，從而實(shí)現(xiàn)發(fā)情周期同期化。與經(jīng)產(chǎn)母豬不同，后備母豬發(fā)情周期不統(tǒng)一，可通過(guò)注射或飼喂孕酮（烯丙孕素）進(jìn)行同時(shí)化處理，劑量為20 mg/頭/d，連續(xù)飼喂或注射18 d。烯丙孕素作為孕酮的一種，可以延長(zhǎng)黃體期，推遲發(fā)情，從而實(shí)現(xiàn)同期發(fā)情。

4.2.2 卵泡發(fā)育同期化

卵泡發(fā)育同期化是定時(shí)輸精的基礎(chǔ)和前提。經(jīng)產(chǎn)母豬在斷奶后24 h，后備母豬在停喂烯丙孕素42 h后，注射孕馬血清促性腺激素（PMSG）促進(jìn)卵泡發(fā)育。后備母豬頸部肌肉注射PMSG 800 IU，初產(chǎn)母豬注射PMSG 1 000 IU，2胎以上經(jīng)產(chǎn)母豬注射PMSG 800 IU可以實(shí)現(xiàn)卵泡發(fā)育同期化。

4.2.3 發(fā)情鑒定

在用PMSG促進(jìn)卵泡發(fā)育同期化以后，一般3～7 d后會(huì)出現(xiàn)發(fā)情癥狀，在母豬口鼻處噴灑公豬氣味劑，觀(guān)察母豬發(fā)情表現(xiàn)，一般外部表現(xiàn)為外陰部充血紅腫，有黏液流出，按壓母豬背部胸腰結(jié)合處，若出現(xiàn)靜立反應(yīng)即可進(jìn)行配種。靜立反應(yīng)表現(xiàn)為兩耳后豎，尾巴翹起并輕輕顫動(dòng)，母豬身體靜立不動(dòng)。

4.2.4 排卵同期化

為更好地實(shí)現(xiàn)定時(shí)輸精，可以使用促性腺激素釋放激素（GnRH）作為促排卵激素，促進(jìn)卵泡成熟和集中排卵。經(jīng)產(chǎn)母豬一般在頸部肌肉注射PMSG后72 h使用GnRH（劑量100 μg），后備母豬一般在注射PMSG后78 h注射GnRH（劑量100 μg）可實(shí)現(xiàn)排卵同時(shí)化，提高受精率[5]。

4.2.5 人工輸精技術(shù)

在注射促排卵激素GnRH后24 h進(jìn)行第1次人工輸精，注射促排卵激素GnRH后40 h進(jìn)行第2次人工輸精。輸精前，在每份精液中加入10 IU的縮宮素，上下?lián)u勻后進(jìn)行輸精可以促進(jìn)子宮和輸卵管收縮，促進(jìn)更多精子快速進(jìn)入輸卵管壺腹部，進(jìn)一步提升母豬妊娠率。插入輸精管時(shí)要斜向上45°插入，越過(guò)尿道口時(shí)再水平插入，如遇母豬努責(zé)，要暫停插入，待母豬努責(zé)結(jié)束再繼續(xù)插入；當(dāng)插入約28～30 cm，感覺(jué)前進(jìn)有阻力時(shí)，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)輸精管，使得子宮頸鎖住輸精管。傳統(tǒng)輸精要抬高輸精瓶，不斷按摩母豬，使精液緩慢流入子宮頸，不要擠壓輸精瓶，防止精液倒流[6]。子宮頸深部輸精時(shí)，在插入外管后，停留1 min左右再插入內(nèi)管，如遇阻力，稍作等待，切不可強(qiáng)行插入，防止對(duì)子宮壁造成損傷。深部輸精可以將輸精瓶?jī)?nèi)的精液擠壓入母豬體內(nèi)，節(jié)約輸精時(shí)間，提升工作效率。

4.3 分娩同期化

母豬妊娠期平均為114 d。如果要實(shí)現(xiàn)批次化管理，就要通過(guò)前列腺素（注射氯前列醇鈉0.2 mg）誘導(dǎo)分娩，使同一批妊娠母豬的分娩時(shí)間集中在114 d。大部分母豬在使用前列腺素氯前列醇鈉36 h內(nèi)完成分娩[7]，若未分娩，可在注射PGF2 α 24 h后注射縮宮素10 IU，可使母畜提早分娩，從而實(shí)現(xiàn)分娩同期化。

5 母豬背膘測(cè)定技術(shù)

5.1 測(cè)定位置

背膘厚度是種豬選擇的指標(biāo)之一。一般在同批種豬體重達(dá)100±5 kg時(shí)測(cè)定，測(cè)定位置在母豬倒數(shù)3～4肋骨之間，距背中線(xiàn)5 cm處測(cè)定。從解剖學(xué)角度分析，豬背腰部共24～28個(gè)椎骨，其中包括14～17個(gè)胸椎、6～7個(gè)腰椎、4個(gè)薦椎。而倒數(shù)第3～4肋骨正好對(duì)應(yīng)在第11～14胸椎處，恰好是背腰部椎骨的1/2處[8]。測(cè)定儀器一般選用獸用B超儀，探頭為長(zhǎng)方形馬鞍狀探頭，探頭長(zhǎng)度為120 mm，探測(cè)深度為170 mm。

表3 不同批次對(duì)應(yīng)的繁殖周期和哺乳期

5.2 背膘標(biāo)準(zhǔn)

母豬配種時(shí)的膘情為14～20 mm為宜，一般后備母豬初配日齡為210～230日齡，路鵬云等[9]表示杜洛克母豬的最佳初配日齡為260～300日齡。后備母豬配種理想體重為125～135 kg，后備母豬配種理想背膘為16～18 mm。母豬斷奶理想背膘厚度為13～14 mm，母豬分娩前理想背膘厚度為17～19 mm。

6 結(jié)語(yǔ)

當(dāng)前生豬疾病風(fēng)險(xiǎn)較高，利用人工輸精、批次化生產(chǎn)等技術(shù)可以節(jié)約生產(chǎn)成本，實(shí)現(xiàn)生豬生產(chǎn)的利潤(rùn)最大化。在采用定時(shí)人工輸精和母豬分娩同期化技術(shù)時(shí)要掌握激素使用劑量和使用時(shí)間，正確開(kāi)展精液品質(zhì)鑒定，發(fā)揮種公豬和種母豬的最大遺傳資源優(yōu)勢(shì)，提高受精率、妊娠率和分娩率，達(dá)到節(jié)本增效的目的。