中草藥在小龍蝦細菌性腸炎防治中的選用

曾家家

(玉林市水產技術推廣站，廣西玉林 537000)

小龍蝦學名克氏原螯蝦，2021年我國小龍蝦養殖產量位列淡水養殖品種第6位。當前國內稻蝦生態養殖模式下小龍蝦病害防治實踐方面仍處在起步階段，現行的水產動物常規治療方法，比如用含氯制劑消毒和抗生素等都不能達到預期的效果。而且隨著高毒、高殘留、選擇性小的藥劑大量使用，不僅增加了稻蝦的養殖成本，還會導致食品安全及環境污染問題。

中草藥作為天然藥物，具有抗病、抗菌等作用，且毒副作用較小、無耐藥性。中草藥廣泛用于魚類病害防治、免疫增強等方面，受到廣大養殖戶的青睞。

本文以1例小龍蝦細菌性腸炎防治為案例，通過流行病調查和病樣解剖檢查準確診斷疾病，對癥用藥，選用的3種常用防治小龍蝦細菌性腸炎中草藥來自6個不同廠家，然后經過藥效試驗，篩選適合的中草藥進行精準防治。

一、流行病基本情況調查

廣西北流市1個稻田養殖小龍蝦基地發現小龍蝦吃食減少，出現少量死亡的情況。該養殖基地為稻蝦綜合生態種養，符合無公害農產品養殖標準。養殖基地面積10 畝，2021年9月25日投放蝦苗，規格5～8克/尾。平時養殖管理規范，日投餌量控制在飽食量的70%～80%。10月12日，發現小龍蝦吃食減少，繼而不食，活性差，抗應激弱，喜歡往淺水或岸邊靠，足無力。兩天后發現數尾病蝦死亡，后續幾天死亡數量由少到多，日死亡量20～40 尾。現場檢測養殖水體氨氮、亞硝酸鹽、pH、溶氧等指標，未發現異常。

二、準確診斷疾病

對患病的小龍蝦進行解剖檢查，發現肝臟顏色變淺、消化道腫脹充血、腸道有積水并流出黃色液體。根據流行病調查和病蝦解剖檢查情況，初步診斷為細菌性腸炎。

三、篩選中草藥

1.對癥用漁藥

常見主治水產動物細菌性腸炎的中藥漁藥有三黃散(主要成分為黃芩、黃柏、大黃、大青葉)、五黃散(主要成分為黃芪)和大黃五倍子散(主要成分為大黃、五倍子)。

在當地漁藥店購買6 個不同廠家的3 種中藥漁藥，分別為三黃散A1、三黃散A2、五黃散B1、五黃散B2、大黃五倍子散C1、大黃五倍子散C2。三黃散、五黃散和大黃五倍子散都是純中藥漁藥，且都是正規廠家生產的國標水產藥物，主治常見的水產動物細菌性腸炎等。

2.致病菌的分離與培養

將病蝦用無菌生理鹽水沖洗干凈，用醫用酒精消毒病蝦體表；在無菌操作條件下，用剪刀剪開蝦頭，取其肝臟、鰓、心肌、腸道等組織，分別接種至已編號的普通營養瓊脂平板上，在28℃下培養24 小時。觀察發現，除心肌培養基未發現菌落外，其余均有菌落；根據其形態，挑選形態一致的優勢菌純化，連續接種3次，斜面保存以進行藥效試驗。

3.藥敏紙片制備

用打孔機制作直徑為6 毫米左右的圓形濾紙，將制作好的濾紙放入瓶里，用牛皮紙封口進行高壓烘干。在無菌操作下，將藥敏試紙分別放至按照漁藥說明書稀釋的三黃散A1、三黃散A2、五黃散B1、五黃散B2、大黃五倍子散C1、大黃五倍子散C2 藥液中浸泡；4℃下孵育30 分鐘，將紙片平鋪于無濾紙墊底的滅菌平皿中，置平皿于烘箱中烘干，無菌密封備用。

4.藥效試驗

取適量的單一優勢菌落到10 毫升“腦-心”浸出液肉湯培養基，制得菌懸液；取0.1毫升菌懸液分別均勻涂布于已編號的平板培養基上，重復涂布3次；待水分晾干后，用無菌鑷子夾取漁藥紙片三黃散A1、三黃散A2、五黃散B1、五黃散B2、大黃五倍子散C1、大黃五倍子散C2 平貼于平板表面，每換一種紙片都要對鑷子滅菌并輕輕按壓，以防紙片掉落和移動，且漁藥紙片需完全與培養基接觸。一般直徑9 厘米的平皿可貼7 張藥敏試片，中間1片，其余6片均勻分布其周圍。

5.抑菌效果

將貼好漁藥紙片的平板培養基翻轉置于37℃恒溫箱中培養12～16 小時，取出測量抑菌圈大小(表1)。

表1 藥效試驗情況

從藥效試驗結果可以看出，三黃散的抑菌效果較好，特別是三黃散A2 抑菌圈直徑最大，抑菌敏感程度最高。

四、中草藥治療

1.漁藥確定

根據藥效試驗結果，選用三黃散A2，按照該廠家漁藥說明書的用法與用量，每6千克飼料加入100 克三黃散A2 拌料投喂，每天2 次，連續投喂7天。

2.治療效果

使用三黃散A2 后，第1 天病死蝦數量增加，但發病較輕的癥狀有所緩解；第2天病死蝦數量繼續上升，但進食量相比前幾天有所增加；第3天病死蝦數量有所減少，小龍蝦進食量相當于正常的80%；第5 天沒發現小龍蝦死亡，進食恢復正常。再經過兩天的鞏固治療，稻田中的小龍蝦全部恢復正常，進食量甚至比發病前增加10%左右。

五、分析與總結

本案例通過藥效試驗，用三黃散A2 拌料投喂、精準用藥，細菌性腸炎病明顯好轉，直至小龍蝦恢復正常，說明三黃散能防治小龍蝦細菌性腸炎病。

市場上的“國標藥”和“非藥品”中藥質量參差不齊，經過藥效試驗后，可快速選擇藥物用于生產一線進行疾病治療，避免了盲目用藥而造成養殖損失。

當然，本文通過藥效試驗快速選擇中草藥，還存在一些影響試驗科學性的因素，比如養殖水體的環境因素、藥效試驗基于中草藥對病蝦體外抑菌的效果試驗，由于是快速篩藥治療，缺乏臨床試藥環節。