血清MMP-9聯(lián)合IRS-2蛋白檢測(cè)對(duì)PCOS診斷價(jià)值研究

杜曉琴，王 亮，張利容，陳麗娟，馬 瑛，田茂瑩

綿陽市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，四川綿陽 621000

流行病學(xué)調(diào)查顯示，多囊卵巢綜合征(PCOS)的發(fā)病率可達(dá)234/100 000～566/100 000，隨著患者體質(zhì)量指數(shù)升高，PCOS的發(fā)病率呈現(xiàn)明顯升高的趨勢(shì)[1]。PCOS屬于復(fù)雜的內(nèi)分泌及代謝異常性疾病，在疾病的進(jìn)展過程中，炎癥因子水平及卵巢外的基質(zhì)代謝發(fā)揮重要作用[2]。有研究顯示，胰島素受體底物-2(IRS-2)是機(jī)體三磷酸肌醇腺苷轉(zhuǎn)錄活性的重要指標(biāo)，與卵泡膜細(xì)胞合成過量的雄激素水平具有相關(guān)性[3]。有研究顯示，隨著炎癥因子水平的升高，胰島素抵抗水平升高，造成下丘腦-卵巢軸紊亂，也在一定程度上促進(jìn)了PCOS疾病的發(fā)展[4]。基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)屬于激素依賴性因子，有研究顯示，MMP-9在子宮內(nèi)膜的重塑及月經(jīng)的發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用[5]。本研究旨在分析血清MMP-9和IRS-2蛋白聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷PCOS的價(jià)值，為臨床診斷提供科學(xué)依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究采取回顧性研究，以本院2017年1月到2019年1月診斷的120例PCOS患者作為觀察組，年齡21～35歲，平均(27.96±2.69)歲；平均體質(zhì)量指數(shù)(24.78±2.97)kg/m2。另選取同期體檢健康的志愿者100例作為對(duì)照組，年齡20～35歲，平均(27.76±1.91)歲；平均體質(zhì)量指數(shù)(24.44±2.03)kg/m2。兩組的年齡、體質(zhì)量指數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書，并經(jīng)倫理委員會(huì)論證通過。患者納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合PCOS診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；(2)表現(xiàn)為顯著的稀發(fā)型排卵或者不排卵；(3)有高雄性激素臨床表現(xiàn)及血清高雄性激素水平；(4)超聲檢查示單側(cè)或者雙側(cè)的卵巢中直徑在2～9 mm的卵泡在12個(gè)以上。患者排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)3個(gè)月內(nèi)服用避孕藥物；(2)自身免疫性疾病、腫瘤及庫(kù)欣綜合征。

1.2方法 所有研究對(duì)象入組后，在正常月經(jīng)的2～4 d對(duì)受試者進(jìn)行空腹采血4 mL，針對(duì)出現(xiàn)閉經(jīng)的受試者，對(duì)受試者開展超聲檢測(cè)，在確認(rèn)無優(yōu)勢(shì)卵泡后對(duì)受試者開展空腹采血4 mL，3 500 r/min離心15 min后，取上清液，采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清睪酮(T)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)、促黃體生成素(LH)水平。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清MMP-9、IRS-2蛋白水平。所有檢測(cè)試劑均來自瑞士羅氏公司，操作流程嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，所有的批間及批內(nèi)差異均在10%以內(nèi)。

1.3觀察指標(biāo) 分別對(duì)兩組的T、E2、P、PRL、FSH、LH、MMP-9、IRS-2蛋白水平進(jìn)行比較。

2 結(jié) 果

2.1兩組性激素水平比較 兩組E2、P、PRL、FSH水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；觀察組T、LH水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組性激素水平比較

2.2兩組MMP-9、IRS-2蛋白水平比較 觀察組MMP-9明顯高于對(duì)照組，IRS-2蛋白水平明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組MMP-9、IRS-2蛋白水平比較

2.3MMP-9、IRS-2蛋白水平與T、LH的相關(guān)性分析 MMP-9與T、LH均呈正相關(guān)(r=0.441、0.526，P<0.05)，IRS-2蛋白水平與T、LH均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.452、-0.521，P<0.05)。

2.4聯(lián)合檢測(cè)效能分析 MMP-9、IRS-2蛋白水平聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PCOS的診斷特異度明顯高于單項(xiàng)檢測(cè)，見表3。

表3 聯(lián)合檢測(cè)效能分析

2.5ROC曲線分析 通過ROC曲線分析可知，聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線下面積(AUC)明顯大于單項(xiàng)檢測(cè)，血清MMP-9、IRS-2蛋白水平最佳截?cái)嘀捣謩e為3.69、0.62 μg/mL，見表4、圖1。

表4 ROC曲線分析

圖1 ROC曲線分析

3 討 論

PCOS在育齡婦女中具有較高的發(fā)病率，患者主要表現(xiàn)為月經(jīng)量少、不規(guī)律，部分患者還會(huì)出現(xiàn)體毛增多等雄性激素水平過高的情況[6]。目前認(rèn)為，PCOS發(fā)病機(jī)制主要與下丘腦-垂體-卵巢軸的功能失調(diào)相關(guān)，隨著患者內(nèi)分泌激素水平的異常升高，雌激素水平明顯降低，激素分泌紊亂，從而造成患者卵泡發(fā)育異常，子宮內(nèi)膜過度增厚，影響患者的排卵情況，隨后進(jìn)一步加重患者的病情，形成惡性循環(huán)[7]。在本研究中，通過比較兩組性激素水平發(fā)現(xiàn)，PCOS患者的T及LH水平異常升高。有研究顯示，T是血液中最重要的雄激素，主要由卵巢分泌，PCOS患者雄激素分泌過多，臨床常用T水平來診斷PCOS患者體內(nèi)高雄激素血癥[8]。LH可促進(jìn)膽固醇在性腺細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化為性激素，造成性激素分泌紊亂[9]。目前，通過T、LH水平異常升高對(duì)POCS進(jìn)行診斷在臨床已獲得醫(yī)生的普遍認(rèn)可[10]，但是單獨(dú)對(duì)患者性激素水平進(jìn)行分析，容易受到月經(jīng)周期的影響，對(duì)于臨床診斷的推廣性不足[11]。

本研究所探討的MMP-9、IRS-2蛋白水平幾乎不受月經(jīng)周期的影響[12]。MMP-9是重要的水解酶，研究證實(shí)其在胚胎著床、胚胎種植、子宮內(nèi)膜重塑及月經(jīng)周期的變化中發(fā)揮重要作用[13-14]。國(guó)外有學(xué)者認(rèn)為，MMP-9可通過調(diào)節(jié)卵巢的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)成分的周期性變化，進(jìn)而調(diào)節(jié)卵泡及黃體功能[15]，同時(shí)，在本研究中，患者的MMP-9與T、LH呈正相關(guān)，提示在卵巢皮質(zhì)較厚的皮質(zhì)中，需要較多的MMP-9進(jìn)行水解，進(jìn)一步刺激機(jī)體MMP-9水平的升高，從而導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)的降解發(fā)生異常，以及局部病灶部位炎性反應(yīng)水平提高[16]。喻盈等[17]研究發(fā)現(xiàn)，PCOS患者M(jìn)MP-9水平明顯升高，與本研究相互印證。

有研究報(bào)道顯示，在PCOS的疾病進(jìn)展中，胰島素抵抗是重要的疾病因素之一，隨著胰島素抵抗水平升高，脂肪細(xì)胞膜表面的性激素受體的敏感性明顯下調(diào)，體內(nèi)的性激素分泌出現(xiàn)紊亂[18]。也有研究報(bào)道顯示，隨著胰島素抵抗水平的提升，下丘腦-垂體-卵巢軸的負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制出現(xiàn)異常，進(jìn)一步導(dǎo)致機(jī)體的激素水平紊亂[19]。而IRS-2是胰島素抵抗重要的轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)，IRS-2水平升高，其下游絡(luò)氨酸激酶的活性受到抑制，可進(jìn)一步提高胰島素抵抗作用。同時(shí)，受胰島素受體的底物酪氨酸激酶末端的磷酸化等影響，患者的胰島素與其受體的結(jié)合能力明顯下降，可降低機(jī)體對(duì)于胰島素的敏感性。在疾病的進(jìn)展過程中，PCOS患者出現(xiàn)胰島素抵抗時(shí)易發(fā)生高胰島素血癥，而患者體內(nèi)胰島素水平較高時(shí)，易促使合成雄激素的關(guān)鍵酶大量產(chǎn)生，致使卵泡膜細(xì)胞生成大量雄性激素，雄性激素易轉(zhuǎn)換成雌酮，進(jìn)而促進(jìn)LH大量分泌，而在此過程中，由于患者激素水平的異常表達(dá)，通常會(huì)造成患者生長(zhǎng)激素水平降低，進(jìn)一步抑制患者的脂肪溶解，加劇疾病的進(jìn)展[20]。賀淑巍等[19]通過對(duì)PCOS患者IRS-2水平的分析發(fā)現(xiàn)，IRS-2與患者疾病的進(jìn)展呈負(fù)相關(guān)，與本研究結(jié)果相互印證。

本研究結(jié)果顯示，MMP-9、IRS-2蛋白聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷PCOS的特異度明顯高于單項(xiàng)檢測(cè)，提示通過對(duì)PCOS患者血清MMP-9、IRS-2蛋白水平進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，可分別從炎性反應(yīng)及胰島素抵抗兩個(gè)方面對(duì)患者的疾病進(jìn)行分析，對(duì)于PCOS的診斷具有積極意義。

代謝性功能障礙是PCOS發(fā)生的危險(xiǎn)因素，而代謝性疾病障礙主要表現(xiàn)為肥胖及胰島素抵抗。本研究存在一定的局限性，未考慮肥胖對(duì)于疾病的影響，在對(duì)患者的體質(zhì)量指數(shù)進(jìn)行匹配時(shí)，排除了肥胖的影響，有待在日后的研究中進(jìn)行探討。

綜上所述，血清MMP-9聯(lián)合IRS-2蛋白檢測(cè)對(duì)PCOS診斷的特異度較高，建議臨床可推廣使用。