血清DKK1、TK1水平預測老年胸段食管癌患者根治術后復發、轉移的研究*

陳 婷，秦永輝，劉 凱

新疆醫科大學附屬腫瘤醫院，新疆烏魯木齊 830011

胸段食管癌作為常見胃腸道惡性腫瘤之一，因早期無明顯表現，且病情進展緩慢，患者易錯失最佳治療時機，部分患者，特別是老年患者在確診時已進展至中晚期，不僅增加手術難度，且在術后仍伴較高的復發、轉移風險，預后較差。因此，早期準確預測胸段食管癌患者根治術后復發、轉移風險非常重要，這可以指導早期治療。既往研究證實，血管內皮生長因子、皮層肌動蛋白均可用于預測食管鱗癌患者病理分期及淋巴結轉移風險[1]。但需要注意的是，該研究在分析時并未納入其他關鍵性指標進行綜合性分析，二者對患者預后的影響是否受其他因素干擾尚不可知，應用價值不明確。除上述研究提及的指標外，癌胚抗原(CEA)、鱗狀細胞癌抗原(SCC)等腫瘤標志物也被臨床用于預測和評估食管癌的復發風險，但上述指標在檢測時易受腫瘤生物學行為影響，應用仍有局限[2]。因此，尋找更可靠且更敏感的指標較為迫切。分泌型蛋白Dikkopf1(DKK1)已被研究證實在乳腺癌、非小細胞肺癌等多種惡性腫瘤細胞中呈過表達，與腫瘤細胞的轉化、生長及侵襲密切相關[3]。細胞質胸苷激酶1(TK1)作為DNA合成及修復過程中的關鍵酶之一，被證實與細胞增殖密切相關[4]。結合上述DKK1、TK1在腫瘤中的表達特點，筆者推測血清DKK1、TK1異常表達可能與老年胸段食管癌根治術患者預后有關，但相關研究較少。基于此，本研究將重點分析血清DKK1、TK1水平與老年胸段食管癌患者根治術后復發、轉移的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年6月至2018年6月于本院接受根治術治療的63例老年胸段食管癌患者為研究對象。(1)納入標準：①經病理確診為胸段食管癌；②預計生存時間>12個月；③年齡≥60歲；④接受根治術治療。(2)排除標準：①合并心功能、腎功能、肝功能不全或衰竭的患者；②合并其他惡性腫瘤的患者；③合并免疫性疾病的患者；④合并嚴重感染性疾病或傳染性疾病的患者；⑤隨訪期間病死的患者；⑥全身狀況惡化無法耐受手術的患者；⑦局部浸潤過于廣泛無法切除腫瘤的患者；⑧伴嚴重低蛋白血癥和貧血、營養不良無法耐受手術的患者。63例老年胸段食管癌患者中男37例，女26例；年齡61～77歲，中位年齡69.00歲；有吸煙史29例。

1.2方法

1.2.1復發、轉移評估及分組方法 對全部老年胸段食管癌患者根治術后進行為期3年的隨訪，以復發(癌細胞在原來臟器再次產生)、轉移(癌細胞轉移到其他位置)作為終點事件，患者分別于術后3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36個月到院復查，觀察并記錄患者隨訪期間復發及轉移發生情況，包括局部復發及局部復發并遠處轉移。先經影像學及生化檢查，對有異常情況的患者經穿刺活檢確診，以復發、轉移為終點事件。將發生復發、轉移的患者納入發生組，剩余患者納入未發生組。

1.2.2一般資料收集 使用醫院自制的一般資料調查表調查兩組患者一般資料，問卷的Cronbach′s α系數為0.86，重測效度為0.88，內容包括年齡、性別(男、女)、吸煙史(吸煙指數≥400，吸煙指數=每天吸煙支數×吸煙年數)、分化程度(未-低分化、中-高分化)、腫瘤分期(Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ+Ⅳ期)、浸潤深度(黏膜或黏膜下層、肌層或食管外膜)、腫瘤部位(胸上段、胸中段、胸下段)、術后放化療(是、否)。

1.2.3實驗室指標檢測 分別于老年胸段食管癌患者接受根治術治療當天早晨，抽取患者空腹外周靜脈血5 mL，使用智能型高效離心機(貝克曼庫爾特商貿，Avanti JXN-30/26型)離心。CEA、SCC的檢測：以1 500 r/min的速度離心10 min后取血清，經電化學發光法檢測，試劑盒由賽默飛世爾科技有限公司提供。DKK1、TK1的檢測：經酶聯免疫吸附試驗檢測，試劑盒由合肥萊爾生物科技有限公司提供。

2 結 果

2.1術后復發、轉移發生情況 全部63例接受根治術治療的老年胸段食管癌患者，術后經為期3年的隨訪，以術后復發、轉移作為終點事件，全部患者隨訪時間為3～36個月，平均隨訪(18.51±8.90)個月，發生復發、轉移的患者有26例，發生率為41.27%(26/63)。

2.2發生組與未發生組的一般資料、實驗室指標比較 兩組年齡、性別、吸煙史、分化程度、腫瘤分期、浸潤深度、腫瘤部位、術后放化療情況比較，差異無統計學意義(P>0.05)；發生組血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平高于未發生組(P<0.05)。見表1。

表1 發生組與未發生組一般資料、實驗室指標比較

2.3老年胸段食管癌患者血清CEA、SCC、DKK1及TK1之間的相關性分析 采用雙變量Spearman相關進行分析，結果顯示，老年胸段食管癌患者血清CEA、SCC、DKK1及TK1之間呈正相關(r=0.287～0.508,P<0.05)。見表2。

表2 老年胸段食管癌患者血清CEA、SCC、DKK1及TK1之間的相關系數

2.4血清CEA、SCC、DKK1、TK1與老年胸段食管癌患者根治術后復發、轉移關系的Logistic回歸分析 將老年胸段食管癌患者根治術前血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平分別作為自變量，根治術后復發、轉移發生情況作為因變量(1=發生，0=未發生)，Logistic回歸分析結果顯示，老年胸段食管癌患者根治術前血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平與術后復發、轉移有關(P<0.05)，血清CEA、SCC、DKK1、TK1過表達可能是患者術后復發、轉移的危險因素(OR>1，P<0.05)。見表3。

表3 各指標與老年胸段食管癌患者根治術后復發、轉移關系的Logistic回歸分析結果

2.5各指標預測老年胸段食管癌患者根治術后復發、轉移風險的效能分析 將老年胸段食管癌患者根治術前血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平分別作為自變量，根治術后復發、轉移發生情況作為狀態變量(1=發生，0=未發生)，繪制ROC曲線，結果顯示，根治術前血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平分別預測老年胸段食管癌患者術后復發、轉移風險的AUC均>0.800，預測價值均較理想。見圖1、表4。

表4 各指標預測老年胸段食管癌患者根治術后復發、轉移風險的效能分析

圖1 各指標預測老年胸段食管癌患者根治術后復發、轉移風險的ROC曲線圖

3 討 論

有研究指出，早期胸段食管癌因缺少特異性表現及體征，易出現誤診、漏診的情況，即便是符合根治術治療適應證，術后患者復發、轉移風險仍然較高，特別是老年患者，嚴重影響其晚年生存質量[5]。本研究中，63例接受根治術治療的老年胸段食管癌患者中，術后經為期3年隨訪，發生復發、轉移的患者有26例，發生率為41.27%，證實上述研究結論。為改善老年胸段食管癌患者的生存質量，提高患者生存率，早期預測根治術后復發、轉移發生風險尤為關鍵。

CEA、SCC是常見的腫瘤標志物。CEA與腫瘤組織、細胞間的黏附反應的發生有關，可促進腫瘤細胞的增殖及轉移[6]。SCC的表達與腫瘤病情進展密切相關，現階段常用于腫瘤患者的病情及療效評估[7]。但有研究指出，腫瘤標志物預測食管癌患者根治術后復發、轉移風險的特異性不足，對預測患者病情轉歸有一定局限[8]。腫瘤細胞復發、轉移的主要特征之一即細胞的形態和結構呈異型性、細胞增殖，而血清DKK1、TK1是常見的與細胞增殖密切相關的因子，且已被研究證實參與了腫瘤的進展及預后[9-10]。本研究結果顯示，發生組血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平均高于未發生組(P<0.05)，且相關性分析結果顯示，老年胸段食管癌患者血清CEA、SCC、DKK1及TK1之間呈正相關(P<0.05)。以上結果表明血清DKK1、TK1水平與CEA、SCC有關，也可能是具有一定臨床價值的腫瘤標志物。

作為細胞生長過程中的關鍵性蛋白之一，DKK1在腫瘤細胞的增殖、分裂過程中具有重要作用，能夠刺激細胞由生長停滯期進入快速生長期[11]。TK1在靜止期細胞或非增殖期細胞內呈低表達狀態，而當細胞進入增殖期時，TK1水平可在較短時間內迅速升高[12]。本研究結果顯示，發生組患者術前血清DKK1、TK1水平過表達還可能是術后復發、轉移的危險因素。分析原因如下：DKK1能夠結合Lrp5/6，導致Wnt卷曲蛋白無法與Lrp5/6結合，進而抑制Wnt信號轉導通路，降解β-catenin蛋白質，增加腫瘤復發、轉移風險[13-14]。同時，DKK1已被研究證實與肝細胞癌、食管鱗癌等多種惡性腫瘤患者預后密切相關[15-16]。TK1可產生促炎性細胞因子，使T細胞向輔助性T細胞(Th)1分化等，加速腫瘤的生長與增殖，繼而導致腫瘤的不斷惡化與轉移[17]。此外，有研究指出，癌變組織處TK1陽性率明顯高于正常組織，TK1能夠加速腫瘤的生長[18-19]。因此，當老年胸段食管癌患者體內DKK1、TK1呈過表達時，可加速腫瘤細胞增殖，導致根治術后復發、轉移的發生。

最后，本研究對各指標預測老年胸段食管癌患者根治術后的復發、轉移風險繪制了ROC曲線，結果顯示，根治術前血清DKK1、TK1水平分別預測老年胸段食管癌患者術后發生復發、轉移風險的AUC均>0.800，且根治術前血清DKK1、TK1的最佳截斷值分別為3.535 ng/mL、3.470 pmol/L時，預測價值最佳。上述結果證實，老年胸段食管癌患者根治術前血清DKK1、TK1異常表達不僅是術后復發、轉移的危險因素，且可作為根治術前預測術后復發、轉移風險的關鍵標志物。上述結果也表明，未來臨床若早期監測老年胸段食管癌患者根治術前血清DKK1、TK1表達異常，可在治療原發病的同時實施合理干預，如術后聯合放化療或術前聯合新輔助化療等，這可能對指導疾病早期治療、降低術后復發及轉移風險、改善患者預后有積極意義。此外，本研究發現，血清DKK1、TK1間呈正相關，說明老年胸段食管癌患者根治術前血清DKK1、TK1之間可能存在一定聯系，二者可能相互影響、相互作用，共同參與了老年胸段食管癌患者術后復發、轉移的發生，但尚不能根據此次研究結果推斷上述指標之間在疾病中相互影響，還需要在未來增加樣本量、延長觀察時間并查閱大量文獻加以驗證。

綜上所述，血清DKK1、TK1水平與老年胸段食管癌患者根治術后復發、轉移有關，二者異常表達可能是患者根治術后復發、轉移的危險因素，對預測患者根治術后復發、轉移的風險有一定價值。