血清Leptin、PKCε與乳腺癌患者臨床病理特征及預后的相關性研究*

高 飛,任冠穎,高曉培,郄 帥,洪 丹,楊 琳

1.保定市第一中心醫院放療科，河北保定 071000；河北大學附屬醫院：2.腫瘤內科；3.放療科，河北保定 071000

近年來，我國已成為乳腺癌發病率增長速度最快的國家之一，乳腺癌也成為發病率最高的女性惡性腫瘤[1]。目前，乳腺癌以手術治療為主，放療、化療、內分泌治療等多種治療方案為輔，通過治療可提高患者遠期治愈率，但部分患者仍存在病情復發、病灶轉移等情況[2]。因此，探索乳腺癌的臨床發病機制，并探討相應的診斷與治療手段具有十分重要的臨床意義[3]。蛋白激酶Cε(PKCε)是一種新型家族激酶成員，有研究表明，在乳腺癌細胞中PKCε多處于異常高表達狀態，Leptin是參與細胞生長發育和能量代謝的一種分泌蛋白，在多種腫瘤細胞中均處于異?；钴S狀態[4]，但PKCε和Leptin在乳腺癌患者血清中的水平及與患者病理特征的相關性鮮見報道。因此，本研究擬探討乳腺癌臨床病理特征和臨床預后與血清Leptin、PKCε水平的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取河北大學附屬醫院2017年11月至2018年2月收治的40例乳腺癌患者作為觀察組，均為女性；年齡(43.29±5.50)歲；TNM分期Ⅰ期13例，Ⅱ期14例，Ⅲ期10例，Ⅳ期3例；病灶區最大徑(3.85±1.29)mm；腋窩淋巴結轉移12例，未轉移28例；浸潤性乳腺癌29例，導管原位癌11例。另選取同期50例體檢健康女性作為對照組，年齡(45.14±5.74)歲。

1.2觀察組納入標準 (1)確診后無任何抗腫瘤治療；(2)經病理組織學檢測確診為乳腺癌；(3)近3個月內無急性感染；(4)無腎臟或類風濕疾?。?5)近半年未應用激素類藥物；(6)活動狀態評分≥60分；(7)經倫理委員會批準，所有受試者均簽署知情同意書。

1.3觀察組排除標準 (1)骨髓功能異常的乳腺癌患者；(2)嚴重臟器疾病患者；(3)合并免疫性疾病患者；(4)內分泌代謝性疾病患者。

1.4方法 本研究對患者隨訪2年，詳細記錄患者預后質量。入組后采集患者空腹靜脈血3 mL,3 000 r/min離心5 min，離心并收集血清，采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清Leptin和PKCε水平，Leptin和PKCε試劑盒均購自杭州聯科生物科技有限公司，并嚴格遵照試劑盒說明書進行操作。

2 結 果

2.1兩組血清Leptin、PKCε水平比較 觀察組血清Leptin、PKCε水平均明顯高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清Leptin、PKCε水平比較

2.2不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平比 較同TNM分期、病灶區最大徑和腋窩淋巴結轉移患者血清Leptin、PKCε水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)；隨著TNM分期升高、病灶區最大徑增大及腋窩淋巴結轉移出現，患者血清Leptin、PKCε水平呈明顯升高狀態(P<0.05)，見表2。

表2 不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平比較

2.3不同病理特征與血清Leptin、PKCε水平的相關性分析 患者血清Leptin、PKCε水平與TNM分期、病灶區最大徑、腋窩淋巴結轉移均呈正相關(r=0.675～0.743，P<0.05)，見表3。

表3 不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平的關系

2.4不同預后質量患者血清Leptin、PKCε水平比較 死亡組患者血清Leptin、PKCε水平均明顯高于存活組(P<0.05)，見表4。

表4 不同預后質量患者血清Leptin、PKCε水平比較

2.5不同Leptin、PKCε水平情況患者預后質量 本研究以Leptin、PKCε水平均值作為高水平和低水平的臨界值，高水平Leptin共15例，高水平PKCε共13例，高水平Leptin和高水平PKCε患者生存率明顯低于低水平Leptin和低水平PKCε(P<0.05)，見圖1、2。

圖1 高水平和低水平Leptin患者預后質量調查結果

圖2 高水平和低水平PKCε患者預后質量調查結果

2.6Leptin、PKCε水平對乳腺癌患者預后質量的影響 血清高水平Leptin和高水平PKCε是影響乳腺癌患者預后質量的獨立危險因素(P<0.05)，見表6。

表6 Leptin、PKCε表達對乳腺癌患者預后質量的影響

3 討 論

作為目前全球女性群體中發病率最高的惡性腫瘤，乳腺癌已逐漸成為臨床中嚴重威脅女性群體健康的疾病之一[5]。目前，對于乳腺癌的治療以手術治療為主，但患者治療后仍可能出現病情復發、轉移的情況，如何對患者進行有效治療并改善患者治療預后質量具有十分重要的意義[6]。有研究者發現，炎性反應、免疫功能異常改變均與惡性腫瘤的發生、發展、復發或轉移關系密切[7]。惡性腫瘤具有抗凋亡、抗生長抑制、易侵襲性、轉移性、永生性，持續血管生長等特征，而炎癥微環境是腫瘤進展的主要病理特征[8]。且炎癥可促進腫瘤轉移，并可誘發腫瘤細胞逃避免疫殺傷，與多種惡性腫瘤特征密切相關。惡性腫瘤患者體內微環境多處于失衡狀態，伴隨免疫功能下降的情況。目前的研究發現，在結直腸癌、肝癌、呼吸系統腫瘤、消化系統腫瘤、血液病等患者血液中，Leptin和PKCε處于明顯異常表達狀態，Leptin和PKCε與腫瘤發生、發展、增加腫瘤耐藥性及患者預后可能存在一定相關性，但仍需要進一步深入探究[9-11]。有學者指出，對乳腺癌的臨床發病機制進行深入研究，并輔助患者的臨床治療，對于改善患者治療療效與臨床預后具有十分重要的意義[12]。

乳腺癌細胞內及細胞間信號轉導紊亂在腫瘤的發生和發展過程中起著重要作用[13]。Leptin可誘導乳腺癌MAPK/ERK和PI3K/Akt等信號通路相關蛋白激活，Leptin還可調節細胞內和細胞外基質相互作用，刺激血管生成，從而促進腫瘤進展。Leptin通過調控多種細胞因子下游表皮生長因子、血小板衍生生長因子、神經生長因子等下游蛋白，介導乳腺癌等腫瘤細胞轉移及侵襲信號整合和傳遞。有研究顯示，Leptin會誘導腫瘤細胞中MAPK/ERK信號轉導，調控乳腺癌細胞的生長生存、骨架穩定、細胞形態、凋亡和侵襲等細胞行為[14]。在多種信號通路中，蛋白激酶(PKCs)是關鍵效應分子，與腫瘤的發生、發展、轉移及預后關系密切，這也是近年臨床研究的熱點。PKCs常依照絲-蘇氨酸激酶亞基結構不同分為3類，其中PKCε是新型的PKC種類，其分子活化不依賴于鈣離子。研究顯示，在乳腺癌細胞系中PKCε水平高于正常乳腺細胞系，提示PKCε在乳腺癌發生和調控過程中起到重要作用[15]。

本研究結果顯示，觀察組血清Leptin、PKCε水平均明顯高于對照組，隨著TNM分期升高、病灶區直徑增大及腋窩淋巴結轉移出現，患者血清Leptin、PKCε水平呈明顯升高狀態，且相關性分析結果顯示，患者血清Leptin、PKCε水平與TNM分期、病灶區直徑、腋窩淋巴結轉移呈正相關。患者預后質量分析結果顯示，死亡組血清Leptin、PKCε水平均高于存活組。進一步以Leptin、PKCε水平均值作為高水平和低水平的臨界值，高水平Leptin共15例，高水平PKCε共13例，高水平Leptin和高水平PKCε患者生存率明顯低于低水平Leptin和低水平PKCε。Logistics回歸模型分析結果顯示，乳腺癌患者血清高水平Leptin和高水平PKCε是影響患者預后質量的獨立危險因素。本研究結果表明，隨著患者血清Leptin、PKCε水平升高，乳腺癌患者病情惡化程度加重，進而導致患者預后質量降低。Leptin會促進腫瘤細胞異常生長，還可通過全身內分泌和自分泌作用于乳腺上皮細胞，促進脂肪組織中雌二醇的轉化，導致乳腺上皮細胞出現異常增殖，在乳腺癌的發生和發展中起到十分重要的作用。與此同時，PKCε會促進形成mTORC2復合物，活化細胞內AKT，激活PI3K-AKT信號通路，促進腫瘤轉移和增殖，導致患者預后質量不佳。

綜上所述，乳腺癌患者血清Leptin、PKCε水平與TNM分期、病灶區直徑、腋窩淋巴結轉移呈正相關，且高水平Leptin和高水平PKCε是影響患者預后質量的獨立危險因素。但本研究臨床樣本數較少，有待后續持續追蹤和分析。