可溶性4-1BB在慢性乙型肝炎病毒感染患者中的水平及意義

劉倩，李靜

（南陽醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校第一附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 南陽 473000）

全世界約1／3的人口曾被乙型肝炎病毒（HBV）侵襲，其中1／4的患者可進(jìn)展為慢性乙型肝炎（CHB），若未能及時(shí)干預(yù)可進(jìn)展為肝硬化、肝衰竭、肝癌等［1］。干擾素、核苷酸類及其類似物為常用于治療CHB的藥物，但療效不理想。上述藥物對HBV清除能力與機(jī)體免疫應(yīng)答過程關(guān)系密切，取決于細(xì)胞免疫應(yīng)答活性及強(qiáng)度。T細(xì)胞免疫是機(jī)體發(fā)揮免疫殺傷作用的主要途徑，T細(xì)胞的激活需接受抗原受體的信號呈遞，同時(shí)需共刺激信號傳遞抗原刺激的信息。可溶性4－1BB（s4－1BB）是一種在活化的T細(xì)胞及NK細(xì)胞上表達(dá)的誘導(dǎo)型共刺激受體，可通過與其配體相互結(jié)合，為T細(xì)胞增殖及溶細(xì)胞活性提供共刺激信號［2］。研究［3］表明，s4－1BB在腦膜炎病毒、水皰性口炎病毒急性感染期間明顯升高。本研究探討s4－1BB在慢性乙型肝炎病毒感染患者中的水平及意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年10月至2020年10月我院收治的120例慢性乙型肝炎病毒感染患者作為觀察組，另選取同期120例健康者作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015版）》中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；入組前6個(gè)月未接受抗病毒治療；接受穿刺活檢；對本研究知情。排除標(biāo)準(zhǔn)：丙型、甲型或酒精性肝炎；自身免疫性肝炎；合并全身感染性疾病；合并惡性腫瘤。觀察組男68例，女52例；年齡20～58歲，平均（38.54±4.29）歲。對照組男71例，女49例；年齡20～60歲，平均（39.19±4.51）歲。兩組的一般資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法采集受試者空腹靜脈血，離心分離，酶聯(lián)免疫法檢測s4－1BB（試劑盒購自美國Merck－Millipore）、干擾素－α（INF－α）、干擾素－β（INF－β），試劑盒由上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限責(zé)任公司提供，嚴(yán)格參照儀器說明書操作。PCR法檢測HBVDNA載量。穿刺活檢：超聲引導(dǎo)下行經(jīng)皮肝穿刺活檢，用10%甲醛固定，HE染色。肝組織炎癥程度：根據(jù)《慢性乙型肝炎防治指南（2015更新版）》中關(guān)于肝臟炎癥活動(dòng)度的標(biāo)準(zhǔn)將其分為G0～G4，G0（無肝炎）9例，G1（輕度肝炎）60例，G2（中度肝炎）37例，G3（重度肝炎）11例，G4（肝壞死）3例。肝組織纖維化程度：S0～S4期，S0期（無纖維化）20例，S1期（輕微纖維化，無纖維隔）41例，S2期（輕度纖維化，存在纖維隔）51例，S3期（纖維化明顯，4條及以上纖維隔）6例，S4期 （肝硬化）2例。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料行t檢驗(yàn)或F檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 s4－1BB、INF－α、INF－β水平觀察組s4－1BB水平高于對照組，INF－α、INF－β水平低于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組的s4－1BB、INF－α、INF－β水平比較（±s）

表1 兩組的s4－1BB、INF－α、INF－β水平比較（±s）

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2.2 s4－1BB與HBV-DNA載量的關(guān)系根據(jù)HBV-DNA載量將慢性乙型肝炎病毒感染患者分為<104組（n＝24）、104～105組 （n＝28）、105～106組 （n＝34）、＞106組 （n＝34），其s4－1BB水平分別為 （61.23±6.14）ng／mL、 （81.24±5.10）ng／mL、 （92.06±5.80）ng／mL、 （104.61±6.19）ng／mL，比較差異顯著（F＝277.271，P＜0.05），兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）。

2.3 s4－1BB與患者肝組織病理的關(guān)系s4－1BB水平在不同肝組織炎癥程度及肝組織纖維化程度方面比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；s4－1BB水平在G0～G4之間依次升高，兩兩比較差異顯著（P＜0.05）。s4－1BB水平在S0～S4之間依次升高，兩兩比較差異顯著（P＜0.05）。見表2。

表2 s4－1BB與患者肝組織病理的關(guān)系（±s）

表2 s4－1BB與患者肝組織病理的關(guān)系（±s）

肝組織病理 n s4－1BB（ng／mL） F P肝組織炎癥程度 G0 9 65.12±4.12 G1 60 85.59±4.59 G2 37 98.12±5.91 G3 11 106.61±6.20 G4 3 118.24±5.89肝組織纖維化程度 S0 20 68.24±4.77 135.400 <0.05 S1 41 86.13±5.10 S2 51 93.22±5.49 S3 6 105.61±5.34 S4 2 116.79±6.31 116.789 <0.05

2.4 s4－1BB與INF－α、INF－β相關(guān)性分析Pearson相關(guān)性分析顯示，s4－1BB與INF－α、INF－β均呈負(fù)相關(guān) （r＝－0.460，P＜0.05；r＝－0.665，P＜0.05）。見圖1。

圖1 s4－1BB與INF－α、INF－β相關(guān)性散點(diǎn)圖

3 討論

機(jī)體固有免疫反應(yīng)是抵御病原菌侵襲的首道防線，通過抗原抗體相互識別，激活相應(yīng)的細(xì)胞、體液免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)干擾素及其他炎性因子的合成、分泌，建立有效防御體系。機(jī)體固有免疫是適應(yīng)性免疫的基礎(chǔ)，在一定程度上決定感染結(jié)局。HBV是嗜肝DNA病毒，主要由正嗜肝DNA病毒及禽嗜肝DNA病毒組成，前者為感染人體的主要病毒，可引起急慢性肝炎，在外周血液循環(huán)中可檢測到HBV－DNA存在。研究［4］表明，激活或阻斷免疫檢查點(diǎn)OX40或程序性死亡因子－1可部分或完全清除HBV感染。s4－1BB主要存在活化的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞及T細(xì)胞，抗體通過提供共刺激信號增強(qiáng)T細(xì)胞的免疫監(jiān)視及殺傷作用［5］。研究［6］表明，激活s4－1BB信號傳導(dǎo)及阻斷程序性死亡因子－1可增強(qiáng)肝內(nèi)HBV特異性T細(xì)胞反應(yīng)，s4－1BB信號增強(qiáng)以非細(xì)胞溶解方式抑制HBV復(fù)制。

本研究結(jié)果顯示，慢性乙型肝炎病毒感染患者s4－1BB水平高于健康者，INF－α、INF－β水平低于健康者，提示慢性乙型肝炎病毒感染患者固有免疫能力降低。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，s4－1BB與INF－α、INF－β呈負(fù)相關(guān) （P＜0.05），提示s4－1BB水平越高，慢性乙型肝炎病毒感染患者免疫力越低。本研究結(jié)果亦顯示，不同HBV-DNA載量患者的s4－1BB水平存在差異，且隨著HBV－DNA載量增加，血清s4－1BB水平呈升高趨勢；慢性乙型肝炎病毒感染患者肝組織炎癥活躍度及纖維化程度不同，s4－1BB水平表達(dá)不同，表現(xiàn)為隨著肝組織炎癥活躍程度增強(qiáng)、纖維化程度加重，其水平升高，提示機(jī)體抵抗HBV的能力越低，s4－1BB水平越高。

綜上所述，s4－1BB在慢性乙型肝炎病毒感染患者中表達(dá)水平較高，且與患者HBV－DNA載量、肝組織炎癥程度、肝組織纖維化程度存在關(guān)聯(lián)。