兒童室管膜瘤組織中PD-L1表達與臨床病理參數及預后的關系

高璐 武斌△ 李楠

(西安市兒童醫院，(1.門診綜合外科；(2.神經外科，陜西 西安 710003)

研究[1]顯示，相較于成人，兒童發生室管膜瘤的概率更高，且男性發病率明顯高于女性，兒童患者中約有70%的室管膜瘤出現在后顱窩，25%則發生在幕上腦室，其余發生在脊髓。臨床多根據腫瘤大小、組織學分級、腫瘤TNM分期等因素，以選擇室管膜瘤患兒的治療方法。近年來有研究[2-3]指出，在幕上室管膜瘤患者患者腫瘤組織及T淋巴細胞中可見程序性死亡配體-1(PD-L1)的高表達，而針對PD-L1的免疫治療在腦膠質瘤患者中效果良好，因此探討室管膜瘤兒童血清中PD-L1表達水平具有重要意義。本文主要探討兒童室管膜瘤組織中PD-L1表達與臨床病理參數及預后的關系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 收集2017年4月至2020年3月期間我院收治的且行手術切除的82例室管膜瘤患兒的臨床資料，納入標準：(1)經術前影像學和術后病理學診斷為室管膜瘤者；(2)行手術治療者；(3)病例資料完整且同意隨訪者。排除標準：(1)術前影像學診斷考慮為室管膜瘤，而術后病理顯示非室管膜瘤者；(2)病理結果存在爭議者；(3)術后30 d死亡者；(4)臨床資料不完全者；(5)不能接受隨訪者；(6)既往存在其他顱內腫瘤病史。本次研究已獲取本院醫學倫理委員會審核批準，且征得患兒家屬或法定監護人同意，并簽署知情同意書。

1.2資料收集 通過電子病歷收集患兒性別、年齡、病理分級、腫瘤大小、腫瘤位置、術前KPS評分、是否完全切除、腫瘤增殖(Ki 67)指數等資料，其中術前KPS評分分為≥80分和<80分，腫瘤位置為幕上和幕下，病理分級參照世界衛生組織制定的分級標準，分為低級別(Ⅰ級、Ⅱ級)和高級別(Ⅲ級)，全切除為顯微鏡下顯示將腫瘤切除至水腫帶或腫瘤的假包膜。

1.3方法 將準備好的病理組織切片進行脫蠟、水化，根據采購抗體的不同，采用不同的抗原修復液對組織切片按照標準步驟進行修復，修復完成后取出切片用磷酸鹽緩沖液沖洗兩次，每次5 min，將切片上磷酸鹽緩沖液甩干后置入3%雙氧水溶液中10 min，消除切片上的磷酸鹽緩沖液后，采用磷酸鹽緩沖液沖洗5 min，重復3次，甩干水分，再進行顯色、復染、封片，采用日本OLYMPUS公司的顯微鏡及成像系統進行觀察，免疫組化孵育盒和抗原修復盒均購自福州邁新生物科技開發有限公司，兔抗人PD-L1單克隆抗體購自美國GST公司，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。免疫組化結果判斷：根據九個視野中陽性細胞占全部細胞的比例和陽性細胞染色深淺進行分級評分，將染色得分和顯色的陽性細胞所占百分比得分相乘得出結果。計數結果和得分由兩名未參與本次研究的病理科醫生進行，結果不一致時重新評估切片，直到得出一致結果。

1.4隨訪 所有患者進行嚴密的隨訪，術后2年內每3個月進行1次隨訪，隨訪截止時間為2021年4月2日，隨訪方法包括門診復查、電話隨訪、微信隨訪等?？偵嫫?OS)為確診時間至末次隨訪時間或因腫瘤死亡的時間間隔。

2 結 果

2.1PD-L1在室管膜瘤患兒組織中的表達 82例研究對象中，PD-L1在癌組織表達陽性患兒有40例，陽性表達率為48.78%，陰性有42例；癌旁組織中表達陽性患兒16例，陽性表達率為19.51%，陰性有68例。PD-L1在癌組織的陽性表達率明顯高于癌旁組織(χ2=16.641，P<0.05)。

2.2PD-L1的表達與室管膜瘤患兒臨床病理參數的關系 PD-L1的陽性表達與室管膜瘤患兒的腫瘤切除程度和Ki 67指數有關(χ2=16.641，P=0.010)，與患兒的性別、年齡、病理分級、術前KPS評分、腫瘤大小和腫瘤位置無關(P>0.05)。見表1。

表1 PD-L1的表達與室管膜瘤患兒臨床病理參數的關系

2.3單因素分析 結果顯示，病理分級、術前KPS評分、腫瘤大小、腫瘤切除程度、Ki 67指數、PD-L1表達是影響室管膜瘤患兒總生存率的重要因素(P<0.05)。見表2。

表2 影響室管膜瘤患兒總生存率的臨床病理特征單因素分析

2.4多因素分析 將單因素分析結果中有統計學意義的變量進行Cox回歸多因素分析，結果顯示：病理分級是影響室管膜瘤患兒臨床預后的預測因子(P<0.05)。見表3。

表3 各臨床病理特征與臨床預后關系多因素分析

3 討 論

研究[4-5]指出，PD-L1表達陽性的腫瘤細胞與PD-1表達陽性的T細胞相互作用，兩者結合可能會導致T細胞凋亡、衰竭，而T細胞是在胸腺中分化發育成熟后通過血液循環和淋巴進而分布到全身免疫器官組織的淋巴細胞，其產生的免疫應答對機體的抵抗力具有重要價值。研究[6-7]發現，PD-L1高表達存在于食管癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌等惡性腫瘤中，且高表達水平與預后不良存在密切關聯。

本文結果顯示，PD-L1在室管膜瘤癌組織表達陽性患兒有42例，陽性表達率為48.78%，明顯高于癌旁組織的陽性表達率，且PD-L1的陽性表達與室管膜瘤患兒的腫瘤切除程度和Ki 67指數有關，與研究[8]結果相近，提示PD-L1在室管膜瘤癌組織中為高表達水平，與腫瘤切除程度和腫瘤增殖指數有關，分析原因可能是：(1)目前手術切除仍是治療室管膜瘤的首選方法，但部分患兒由于腫瘤組織靠近腦干或與腦干粘連嚴重，導致在手術切除過程中容易損傷腦干，因此術中常無法做到完全切除腫瘤組織，有研究指出[9]，室管膜瘤中PD-L1表達與手術切除程度存在密切關聯；(2)Ki 67是指大部分處于細胞靜止期以外的腫瘤細胞占所有腫瘤細胞的百分比，其值越高，則組織分化越差，是反映癌癥患者預后情況的重要指標之一。有研究[10]發現，PD-L1高表達與高Ki-67值存在相關性，與本研究結果相近。同時本研究中，PD-L1表達水平與室管膜瘤患兒的預后未存在明顯相關性，可能是本研究隨訪時時間較短、納入樣本量較小等有關。

綜上所述，PD-L1在室管膜瘤癌組織中為高表達水平，與腫瘤切除程度和腫瘤增殖指數有關，對患兒的預后沒有明顯意義，而病理分級是影響室管膜瘤患兒臨床預后的預測因子，未來需要聯合多中心進行更大樣本的探究。