甲狀腺癌的甲基化水平與TAM水平和彈性超聲參數的關系

劉文艷

天津市第一醫院超聲科 300120

甲狀腺癌是一種起源于甲狀腺組織的惡性腫瘤，也是頭頸部常見的腫瘤類型之一，數據顯示全世界甲狀腺癌的發病率女性為3.0/10萬，男性為1.2/10萬，近年來隨著全球工業化進程的推進以及環境污染的加劇，甲狀腺癌的發病率呈現逐年遞增趨勢[1]。早期的鑒別診斷對改善甲狀腺癌患者預后具有重要意義，甲狀腺癌的鑒別診斷金標準為病理學檢測，但受個體體質及醫療機構水平限制無法臨床推廣應用。甲基化是指活性甲基化合物將甲基催化轉移到其他化合物的過程，在生物系統內甲基化會對基因表達、蛋白質功能調節以及核糖核酸加工起到重要的調節作用，目前的研究證實多種惡性腫瘤中都會出現甲基化現象，因而也有學者考慮將甲基化作為鑒別惡性腫瘤的手段[2]。TAM是一類在人體血清中表達的糖胺類物質，目前的研究證實腫瘤患者血清TAM水平會出現異常升高，因而也常將該指標用于腫瘤檢測中[3]。彈性超聲檢測是利用病變組織與正常組織間彈性差異來評估病變性質的輔助檢查手段，近年來已被越來越多地應用于惡性腫瘤的初步篩查中[4]。本文擬將62例甲狀腺癌患者設為觀察對象，就其甲基化蛋白水平、TAM水平以及彈性超聲參數的相關性進行分析，以期為甲狀腺癌的鑒別診斷提供新的臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年5月—2021年5月于我院確診的62例甲狀腺癌患者為研究組，另選取同期于我院接受治療的50例良性甲狀腺病變患者為對照組。兩組的一般臨床資料比較無差異(P>0.05)，有可比性。見表1。

表1 兩組一般臨床資料比較

1.2 選擇標準 納入標準：(1)研究組均經病理學檢測確診為甲狀腺癌[5]；(2)意識清晰能夠配合調研；(3)病例資料齊全；(4)調研經醫院倫理學會批準實施。 排除標準：(1)合并精神疾患者；(2)并發其他惡性腫瘤者；(3)既往甲狀腺手術史者；(4)合并化療治療者；(5)合并慢性疾病如心肌梗死、腦卒中、心力衰竭患者；(6)合并嚴重肝、腎功能障礙者；(7)合并帕金森、肌肉硬化等影響調研進行者；(8)合并癌癥遠處轉移者；(9)既往有焦慮抑郁病史者。剔除標準：(1)調研期間主動要求退出者；(2)干預期間病情惡化無法繼續參與研究者；(3)其他原因退出調研者。

1.3 干預方法 采集兩組病理標本后，使用福爾馬林固定，石蠟包埋，使用試劑盒對其組織中甲基化蛋白CDH1和MLH1水平進行檢測，檢測應用試劑盒均購自上海酶聯生物科技有限公司，操作嚴格按照試劑盒說明書進行，每個指標均連續檢測3次取平均值。采集兩組清晨空腹血樣，離心后將血清置于-80℃條件下保存，待樣本采集完畢后統一嚴格按照TAM檢測試劑盒的要求進行檢測，每個指標連續檢測3次，取平均值。對兩組均開展甲狀腺超聲檢測，首先使用常規掃查確定甲狀腺病灶位置、大小及范圍，確定感興趣部位后開啟彈性成像檢測，對病變區域進行檢測，確定彈性值A，而后測定同層正常甲狀腺組織區域的彈性值B，計算A/B作為應變率比值，對兩組應變率比值進行比較。

1.4 觀察指標 對比兩組的甲基化蛋白CDH1、MLH1水平以及血清TAM水平、甲狀腺彈性超聲應變率比值；分析甲狀腺癌患者甲基化蛋白表達水平與TAM、應變率比值之間的相關性。

2 結果

2.1 兩組甲基化蛋白CDH1和MLH1表達水平比較 研究組的甲基化蛋白CDH1和MLH1表達水平均明顯高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組甲基化蛋白CDH1和MLH1表達水平差異

2.2 兩組TAM水平及超聲參數應變率比值比較 研究組的TAM水平以及超聲參數應變率比值均明顯高于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 兩組TAM水平及超聲參數應變率比值比較

2.3 甲狀腺癌患者甲基化蛋白表達水平與TAM、應變率比值之間的相關性分析 62例甲狀腺癌患者甲基化蛋白CDH1和MLH1表達水平與TAM、應變率比值之間的相關性開展Spearman分析，結果顯示，除MLH1蛋白水平同TAM相關性不明顯之外(r=0.236 5，P=0.056 1)，其余甲基化蛋白水平同TAM水平、超聲應變率比值均具有明顯的正相關性(P<0.05)。見表4。

表4 甲狀腺癌患者甲基化蛋白表達水平與TAM、應變率比值之間的相關性分析(r/P)

3 討論

甲狀腺具有調控機體能量使用、制造蛋白質、調控機體其他激素分泌的生理作用，是成年人最大的內分泌腺，對機體的正常運行以及生長發育發揮重要作用。

早期的評估和診斷對改善甲狀腺癌患者預后具有重要意義，本文結果顯示，研究組甲基化蛋白CDH1和MLH1水平均高于對照組，分析認為，DNA甲基化是一種重要的表面遺傳學改變，CDH1是一種位于16號染色體上的抑癌基因，能夠編碼E-鈣黏蛋白，而E-鈣黏蛋白的低表達會使細胞—細胞黏附功能被削弱甚至喪失，這使得腫瘤細胞容易脫離原發灶而出現遠處轉移。MLH1是錯配修復系統的重要成員，已被證實該基因在DNA修復方面發揮重要作用，而該基因的低表達是結腸癌、肺癌等惡性腫瘤發病的重要影響因素[6]。

TAM是甲狀腺實驗室檢測中常用指標。本文結果顯示，研究組血清TAM水平明顯高于對照組，分析認為，腫瘤相關物質是惡性腫瘤細胞以及正常細胞對腫瘤發生反應所產生的物質，腫瘤患者血清TAM水平會出現異常升高，這也可以作為鑒別、診斷、評估甲狀腺疾病的重要參考。彈性超聲在甲狀腺的鑒別診斷中應用歷史較長，已有的報道指出彈性超聲可以較好地鑒別甲狀腺良惡性病變，診斷準確率達到85%以上[7]。研究組超聲應變率比值明顯高于對照組，這提示甲狀腺病變組織相較于常規甲狀腺硬度更高。甲基化蛋白水平、TAM水平以及超聲應變率比值進行相關性分析顯示，除MLH1蛋白水平同TAM相關性不明顯之外，其余甲基化蛋白水平同TAM水平、超聲應變率比值均具有明顯的正相關性。分析認為，MLH1蛋白水平與TAM水平相關性不明顯的原因可能與納入患者樣本量不夠以及患者來源相對單一有關，如果能夠擴大樣本量，開展多中心研究，甲狀腺癌患者MLH1蛋白水平應與應變率比值同樣呈現正相關性。

綜上所述，甲狀腺癌患者存在明顯的DNA甲基化狀態，且其TAM水平呈現異常高表達態，可以考慮將DNA甲基化、TAM水平檢測同彈性超聲相結合，應用于甲狀腺癌的鑒別診斷中。