任志明,劉 磊,2,吳清揚,2,史 策,2,王春琳,2,母昌考,2,葉央芳,2
(1.寧波大學,浙江 寧波 315211;2.水產生物技術教育部重點實驗室,浙江 寧波 315211)
擬穴青蟹又稱青蟹,是我國重要的海水養殖蟹,屬海產珍品之一。隨著電子商務和物流行業的迅猛發展,青蟹借助其耐干露、易運輸的特點,需求量迅速增加。目前,青蟹養殖所需的苗種多依賴自然海區的野生苗種,人工繁育的苗種數量較少,限制了青蟹養殖業的發展。國內成功的擬穴青蟹育苗案例以室內水泥池工廠化育苗為主,有少量為室外土池生態育苗。我國雖未完全實現擬穴青蟹育苗的穩產高產,但育苗技術在全球范圍內仍屬領先水平。
青蟹優質苗種的規模化繁育是一個時間線較長的系統性工程,包括親蟹的越冬保種、人工促熟及抱卵蟹培育、幼體培育、幼蟹培育等環節,并輔以水質調控、餌料培養等工作。筆者及所在課題組于青蟹繁育、遺傳育種方面做了大量的研究和實踐工作,并取得一定成效。現將擬穴青蟹工廠化人工育苗技術要點總結如下。
青蟹規模化繁育的基本條件是有足夠數量的繁育用親蟹。近年來,全國多家擬穴青蟹繁育相關科研和生產單位,均受親蟹數量的制約,難以實現規模化繁育,甚至遇到了“無蟹可育”的境況,主要原因是膏蟹集中促抱卵難、親蟹(尤其是抱卵蟹)在人工條件下成活率極低。繁殖用親蟹一般是來自自然海區野生蟹和人工養殖蟹的膏蟹或抱卵蟹。由于以上來源的親蟹生長環境、體質和病原攜帶等情況各異,由原生環境轉移到人工環境時,水質環境的突變、轉運過程的損傷和驚擾,導致親蟹發生應激反應,大量消耗體能而降低了免疫力,致使攜帶的病原趁虛而入,突破青蟹的免疫系統,導致蟹死亡。根據多年的經驗總結,在青蟹冬眠前將其轉移至人工環境進行越冬,并完成性腺促熟和促抱卵,這是解決規模化親蟹培育的必然途徑。
青蟹在冬季低溫季節會進行穴居冬眠,活動減少或基本不活動,難以捕捉,所以在水溫低于15℃前,捕捉性腺發育相對成熟的膏蟹,經消毒后轉入人工條件進行越冬保種。
越冬保種設施以室內水泥池為佳,靠進水口一側約1/2面積鋪細沙10~15厘米,鋪沙部分設置成雙層底為佳。沙子上用磚瓦塊壘砌或PVC管模擬洞穴供親蟹躲藏,密度為2~3只/米2。水溫控制在10~15℃為宜,水深60厘米以上。水泥池上加蓋厚塑料膜和黑色遮陽網,保證池內光線強度在500勒克斯以下。視夜間親蟹活動情況確定是否投喂餌料,餌料以鮮活貝類(如蟶子)為主,但低溫期間親蟹外出攝食很少。視水質情況適時換水,一般每5~7天換水1次。最好加裝水泵、連接管路和過濾桶,使池水循環流動,可減少換水量,保證水質的穩定。
此外,親蟹也可選擇室外土池越冬。面積1畝以內的小土池較為方便操作,最大水深1.5米,可在土池上方覆蓋塑料棚,便于保溫。水溫控制在(10±2)℃,適當遮光。視水質情況,每1~2周換水1次。
根據生產進度安排,適時將越冬親蟹轉移至室內培育池進行人工促熟和促抱卵。設施與室內越冬池基本相同。水溫以每天0.5~1℃的速度升溫至22~25℃,鹽度為25~30,鹽度過低不利于抱卵。高溫燙單側眼柄,直到眼柄完全變紅,破壞眼柄內部Y器官,降低促性腺發育激素抑制激素的分泌水平。每天換水量1/2,每2~3天排干水干露刺激1小時。可設置循環水,減少換水量,保證水質的穩定。青蟹排卵一般在夜間,盡量避免人為驚擾,且抱卵后的前兩天不宜進行抓捕、轉池等操作,以免造成“流產”。適量投喂餌料,每天挑揀殘餌。
抱卵蟹應與未抱卵蟹分開培育,避免被未抱卵蟹干擾造成流產或死亡。抱卵蟹培育需相對恒定水溫,溫度變化小于1℃,利于胚胎發育,水溫25~28℃為宜。胚胎發育至孵化需要10~15天。水溫越高,胚胎發育越快。鹽度為25~30,鹽度過低不利于胚胎發育。日換水量1/3,不可干露,最好設置循環水,可減少換水量,保證水質的穩定,流水刺激會提高抱卵蟹成活率。抱卵蟹培育過程中應每隔幾天檢查胚胎發育情況,并檢查卵粒表面有無纖毛蟲等附著,遇到問題要及時處理,避免影響胚胎正常發育甚至造成死亡。
通常蟹卵的顏色變化過程為淺黃色→橙黃色→橘紅色→棕褐色→灰黑色,可根據卵的顏色變化同時結合顯微鏡觀察卵內幼體心跳次數判斷孵化時間。待卵顏色為灰黑色、鏡檢心跳為150次/分左右時,次日早晨5:00-9:00便會孵化。可將幼體孵化在專門的孵化桶或池,再轉移幼體到育苗池進行培育,也可直接將抱卵蟹掛在育苗池中直接孵化。以孵化池孵化再轉移幼體的方式為佳,可將卵殼及親蟹體表脫落的污物排除在育苗池之外,減少病原的帶入。培育池中幼體密度以5萬只/米3為佳。
青蟹幼體發育經過溞狀幼體期(Z)、大眼幼體期(M),再蛻1次殼后變為幼蟹。培育水溫宜25~30℃,幼體發育一般為17~25天,水溫越高發育越快。隨著幼體的體形、大小和食性變化,其適口餌料也隨之變化。在Z1~Z2階段投喂輪蟲和微藻,Z3~M階段投喂鹵蟲無節幼體或橈足類。其中,M幼體階段在投喂鹵蟲無節幼體的同時,還需要增加投喂鹵蟲成體。在Z1~Z2階段,充足的輪蟲可以顯著提高幼體成活率,一般投喂密度宜大于20個/毫升。在Z2階段可適當補充投喂鹵蟲無節幼體。Z3~Z5階段宜投喂充足的鹵蟲無節幼體,投喂量為8~20個/(天·只),可分早晚兩次投喂。M階段前2天宜投喂鹵蟲無節幼體,投喂量為20~30個/(天·只),之后以投喂鹵蟲成體為佳,投喂量為大眼幼體重量的80%~100%。從Z3期開始可輔以蝦片等飼料,日投喂量為4~6毫克/升,分4~6次投喂。出苗前幼蟹可投喂鹵蟲成體或碎蛤肉,日投喂量為幼蟹重量的100%~200%。
輪蟲宜用微藻(如小球藻、小硅藻)培養,可直接投喂幼體;若由酵母培養,則在投喂前1~2小時用微藻強化培養。
育苗期間良好的水質是取得育苗成功的關鍵。青蟹育苗常規水質指標要求包括溫度25~30℃、鹽度25~32、pH 7.8~8.6、溶氧5毫克/升以上、總氨氮0.5毫克/升以下、亞硝酸鹽0.1毫克/升以下等。育苗池內是一個時刻動態變化著的小型生態系統,由于不斷有外源物質和能量如餌料等的投入,水質指標的穩定絕非易事。育苗水質調控要遵循生態理念,通過多種技術手段維持水體菌相與藻相平衡穩定,加之合理布幼、投餌等操作,實現良好水質的穩定。
(1)育苗用水的處理。水源為海區新鮮海水,用有效氯30%~32%的漂白粉50毫克/升消毒,無余氯后經過沙濾,去除大的懸浮物和蟲卵等物。有條件的育苗場可加裝蛋白質分離器、紫外滅菌器等配套設備。蓄水池需黑暗(遮光)環境,以半埋或全埋地下的水泥池為宜,利于恒溫和遮光。
(2)微藻的使用。微藻除上述作為Z1幼體的開口餌料外,最主要的作用就是穩定水質。微藻作為水體中的初級生產者,可通過自身生長繁殖吸收利用水體中過量的NH4+、NO3-、PO43-等,同時還可以通過光合作用吸收水體CO2、釋放氧氣,起到穩定水質的作用。微藻的存在可以降低水體透明度,防止光線過強對幼體造成應激。另外,有研究表明微藻的代謝產物可以抑制弧菌等致病菌的繁殖,減少病害的發生。青蟹育苗生產中用到的微藻主要有綠藻(小球藻、扁藻等)和硅藻(角毛藻、骨條藻、新月菱形藻等)。水溫在25~28℃時,可選擇角毛藻、骨條藻等硅藻或小球藻。水溫高于28℃時,青蟹育苗宜選用小球藻、微綠球藻等耐高溫的綠藻。

整個育苗期要維持一定的藻相,隨著換水頻率和換水量的增加,穩定的藻色很難維持,需要在育苗中后期每次換水后適當補接藻種。如果苗場不具備擴培足夠藻種的條件或藻種因某種原因突然不可用,必要時可選擇藻色、水質及苗體綜合狀態良好的池口,過濾其池水作為藻種使用。
(3)微生物制劑的使用。微生物制劑是指將自然界中的有益細菌通過人工篩選培育,再經過生物工程發酵培養、工廠化生產出來,以單一菌或復合菌的形式用于水體生態調控及動物營養保健的活菌制劑。現在市場上銷售的這類產品種類繁多,如EM菌、光合細菌、芽孢桿菌、乳酸菌、硝化細菌、酵母菌等,都屬微生物制劑類的產品。微生物制劑的使用可以替代抗菌藥物,并起到更好的育苗效果。
微生物制劑中的有益菌通過自身生理代謝所具有的氣化、氨化、解磷、反硝化、硝化及固氮等作用,將水體中的大分子有機質、氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等轉化為二氧化碳、硝酸鹽、硫酸鹽等物質,進而被水體中的微藻和微生物吸收利用,起到凈化水質的作用。微生物制劑還作為良好的免疫激活劑,可通過激活生物體非特異性免疫而提高其免疫力,并可降解養殖動物腸道等部位的有害物質,或有益菌直接被消化釋放有益營養物質而被苗體吸收利用,利于機體健康。同時有益菌的繁殖可以在水體和養殖動物體內競爭性地抑制致病菌,防止致病菌大量繁殖而導致病害的發生。在青蟹育苗過程中通常使用光合細菌、芽孢桿菌、乳酸菌、硝化細菌、噬菌體等有益菌調節育苗水質。微生物制劑的使用以拌料和水體潑灑為主,一般用EM菌、乳酸菌、芽孢桿菌等拌料投喂,用光合細菌、芽孢桿菌、EM菌、噬菌體等潑灑水體。