2021年江蘇省某婦幼保健醫院細菌分布及耐藥性分析

趙偉 蔣翠蓮 馮曉丹

摘要：目的：了解2021年江蘇省某婦幼保健院臨床分離菌株對抗菌藥物的耐藥性及敏感性，以指導臨床合理用藥。方法：收集2021年1月1日-12月31日該院臨床分離的3352株非重復細菌，采用紙片擴散法，自動化儀器法進行藥敏試驗，藥敏結果按照美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）標準判讀，采用WHONET5.6軟件對該院分離菌株進行統計分析。結果：3352株非重復菌株中，革蘭陽性菌占46.8%，革蘭陰性菌占53.2%，革蘭陽性菌中排名前3位為糞腸球菌20.6%、無乳鏈球菌10.6%、金黃色葡萄球菌4.9%。革蘭陰性菌中大腸埃希菌占比最高為27.7%，其次為肺炎克雷伯桿菌5.8%、陰溝桿菌5.4%。分離菌株主要來自分泌物（主要為女性生殖器分泌物）75.8%，下呼吸道標本（痰）7.4%和血液5.2%。對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）及耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率各占40.2%和46.8%;目前還沒有分離出耐利奈唑胺和萬古霉素的葡萄球菌;腸球菌中檢測出3株利奈唑胺耐藥、1株萬古霉素耐藥糞腸球菌和1株利奈唑胺中介、1株萬古霉素耐藥屎腸球菌。肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌對碳青霉烯類抗生素仍然保持高敏感性;非發酵革蘭陰性桿菌主要以銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌為主，兩者對大多臨床常用抗生素均保持高敏感性，無碳青霉烯類抗生素耐藥菌株。結論：該院主要臨床分離菌對常用抗菌藥物呈現不同程度耐藥，細菌室專業人員應加強定期監測，加強與臨床醫師的溝通，臨床應根據耐藥情況，合理選擇抗生素，預防和減少耐藥菌的產生。

關鍵詞：藥敏試驗;耐藥性監測;抗菌藥物;合理用藥

【中圖分類號】 R197.64? ? 【文獻標識碼】 A? ? ? 【文章編號】2107-2306（2022）03--04

近年來，由于臨床上廣譜抗生素的不合理使用乃至濫用，導致細菌耐藥性問題日益嚴重，臨床治療面臨越來越嚴峻的挑戰，細菌耐藥儼然已成為我國一個嚴重的公共衛生問題[1-2]。細菌耐藥性監測報告對確定地區和部門的細菌耐藥現狀，預測細菌耐藥性變化趨勢以及指導臨床抗感染治療的經驗治療有著重要的作用。本文就2021年江蘇省某三甲婦幼保健院的細菌檢測結果進行分析，將細菌的分布特點以及對常見受試藥物的敏感性情況報告如下，為抗生素在臨床診療中的合理使用提供科學的參考依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株

收集2021年1月1日-12月31號醫院門急診和住院患者臨床分離菌株，剔除相同患者連續檢測出的同一部位的重復菌株以及真菌、厭氧菌、分枝桿菌后，該院2021年臨床分離得到共計3352株細菌。

1.1.2 培養基、藥敏卡、藥敏紙片及儀器

細菌培養和分離的平板購自鄭州安圖公司。藥敏試驗板卡為AST-GP67、AST-GN09和DL-96SA、DL-96NE、DL-96STR、DL-96E，分別購自法國生物梅里埃公司和廣州珠海迪爾生物工程有限公司;藥敏紙片產自英國Oxoid公司;游標卡尺、VITEK 2 Compact全自動細菌藥敏分析儀，購自法國生物梅里埃公司;迪爾半自動細菌藥敏分析儀購自廣州珠海迪爾生物工程有限公司。

1.1.3 質控菌株

質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC229212、糞腸球菌ATCC29213、銅綠假單胞菌ATCC27853以及流感嗜血桿菌ATCC49247。

1.2 方法

1.2.1 菌株培養和鑒定

按照《全國臨床檢驗操作規程》對臨床標本進行分離培養，采用全自動VITEK 2 Compact分析儀，迪爾半自動分析儀鑒定菌株的種類。

1.2.2 藥敏實驗

自動化儀器法聯合紙片擴散法（Kirby-Bauer method， K-B法）進行藥敏實驗，儀器法孵育結束后儀器自動判讀每種臨床藥物的最低抑菌濃度（minimum inhibitory concentration， MIC），K-B法用游標卡尺測量每種藥物抑菌圈的直徑（mm）。細菌藥敏結果折點的判讀參照CLSI指南M100 2020版。

1.3 統計分析

參照CLSI指南2020版細菌藥敏折點對藥敏結果進行判讀;采用WHONET 5.6軟件進行臨床菌株的構成和相關耐藥性分析，計數資料以例數或百分比表示。

2 結果

2.1 細菌分布與構成

2021年該院分離出細菌非重復臨床分離株3352株，其中革蘭陰性菌1782株（占53.2%），革蘭陽性菌1570株（占46.8%），革蘭陰性菌中排名前3位為大腸埃希菌929株（27.7%）、肺炎克雷伯桿菌196株（5.8%）、陰溝桿菌180株（5.4%）。革蘭陽性菌中排名前3位為糞腸球菌691株（20.6%）、無乳鏈球菌357株（10.6%）、金黃色葡萄球菌164株（4.9%）。菌種構成見表1。分離菌株的標本類型以分泌物（ 包括女性生殖器分泌物）占比最多為75.8%，其他依次為下呼吸道標本（痰）7.4% 、血液5.2% 、羊水4.5% 、其他標本7.2%。

2.2 革蘭陽性球菌對抗生素的敏感性和耐藥性

2.2.1 葡萄球菌屬細菌

金黃色葡萄球菌分離出164株，凝固酶陰性葡萄球菌分離出188株。金葡菌中甲氧西林耐藥株（MRSA）的檢出率為40.2%，凝固酶陰性葡萄球菌甲氧西林耐藥株（MRCNS）檢出率分別為46.8%。MRSA對青霉素G、克林霉素、紅霉素、四環素的耐藥率顯著高于MSSA（甲氧西林敏感株），而對甲氧芐啶-磺胺甲噁的耐藥率低于低于MSSA。MRCNS對甲氧芐啶-磺胺甲噁的耐藥率明顯高于MRSA;除四環素外，MRCNS對各抗菌藥物的耐藥率均高于甲氧西林敏感的菌株。葡萄球菌屬中未發現萬古霉素、替考拉寧和利奈唑胺不敏感的菌株。見表2。

2.2.2 腸球菌屬

腸球菌屬細菌共檢出741株，其中糞腸球菌691株（93.3%），屎腸球菌50株（6.7%），除四環素以及紅霉素外，糞腸球菌對其余受試抗菌藥物耐藥率均低于50%，糞腸球菌對高濃度鏈霉素、四環素的耐藥率分別為22.9%、79.5%，高于屎腸球菌的18%、62.5%，屎腸球菌對青霉素G、氨芐西林、高濃度慶大霉素、左氧氟沙星、環丙沙星、紅霉素的耐藥率高于糞腸球菌。檢測到3株利奈唑胺耐藥、1株萬古霉素耐藥的糞腸球菌和1株利奈唑胺中介、1株萬古霉素耐藥的屎腸球菌，結果均用利奈唑胺、萬古霉素紙片法復核確認。見表3。

2.3 主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的敏感性和耐藥性

2.3.1 腸桿菌科細菌

檢出大腸埃希菌929株，對美羅培南、亞胺培南的耐藥率分別為0.2%、0.2%，對氨芐西林、頭孢曲松、復發新諾明、環丙沙星的耐藥率比較高，對其他抗生素均保持較高的敏感性;檢出肺炎克雷伯菌196株，除了氨芐西林、頭孢曲松、復發新諾明、氨芐西林/舒巴坦，肺炎克雷伯對其他臨床受試藥物保持高度敏感性。耐碳青霉烯腸桿菌科細菌（CRE）檢出率為0.5%（8/1626），分別為大腸埃希菌3株（37.5%）、陰溝腸桿菌3株（37.5%）、產氣腸桿菌1株（12.5%）、肺炎克雷伯菌1株12.5%）;CRE檢出率最高的科室為婦科（75%），其次為產科（12.5%）、新生兒科（12.5%）;標本主要來自分泌物（75%）、羊水（12.5%）、尿液（12.5%）。見表4。

2.3.2 不發酵革蘭陰性桿菌

檢出非發酵革蘭陰性桿菌主要為銅綠假單胞菌46株和鮑曼不動桿菌18株;46株銅綠假單胞菌中有兩株亞胺培南中介，對哌拉西林/他唑巴坦、慶大霉素、妥布霉素、頭孢他啶、阿米拉卡星、頭孢吡肟均高度敏感。鮑曼不動桿菌對氨曲南耐藥率比較高為66.7%，對其他藥物均高度敏感。見表5。

3 討論

2021年該院細菌耐藥監測結果顯示，共分離非重復臨床病原菌3325株，其中革蘭陰性菌1782株占53.2%，革蘭陽性菌1570株占46.8%。革蘭陽性菌檢出率高于2020年CHINET監測數據（28.9%），革蘭陰性菌檢出率低于2020年CHINET監測數據（71.1%），與其他婦幼保健院數據接近[3-5]。革蘭陰性桿菌中排名前3位的是大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌。革蘭陽性球菌球菌中排名前3位的是糞場球菌、無乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌，與全國耐藥監測數據較為一致[3]。分離菌株主要來自分泌物標本（ 包括女性生殖器分泌物）75.8%、下呼吸道標本（痰）7.4%、血液5.2%、羊水4.5%，與CHINET監測數據差距較大[3]，提示婦幼專科醫院患者與綜合性醫院患者的病原菌分布存在明顯的差異，與該院女性生殖器分泌物標本、羊水標本高送檢率有關。

該院耐藥監測數據中金黃色葡萄球菌MRSA的分離率為40.2%，高于2018-2020年CHINET監測報告全國平均水平29.4%、30.2%、30.9%，接近江蘇省平均水平42.2%、45.5%、45.8%[3，6-7]。但由于MRSA的耐藥機制特殊，MRSA高耐藥性給臨床用藥選擇帶來了嚴峻的挑戰[8]。提示該院臨床在抗生素的合理使用，院感預防和控制等措施方面仍需加強。凝固酶陰性葡萄球菌中MRCNS的分離率為46.8%，低于全國平均水平74.7%、75.4%，75.7%，同時也低于江蘇省平均水平76.7%、77.5%，78.2%，MRSA和MRCNS對紅霉素、克林霉素有較高的耐藥率，均>50%。對氟喹諾酮類藥物、慶大霉素、利福平有較高的敏感性。目前尚未檢測出對利奈唑胺、萬古霉素耐藥的葡萄球菌屬，提示上述兩種藥物仍是治療MRSA的首選藥物。

腸球菌原一般寄生于人體的腸道內，近年來由于大量廣譜抗生素的使用以及不斷增加的醫源性侵入性治療，腸球菌的異位寄生現象已成為院內重要的感染源[9-10]。中國耐藥性監測網腸球菌的檢出率也呈現逐年上升的趨勢[3，6-7]。該院分離出的糞腸球菌對臨床常用抗菌藥物的耐藥率整體上低于屎腸球菌。屎腸球菌對環丙沙星、紅霉素、四環素都有較高的耐藥性（>60%）。除了對紅霉素耐藥率為56.1%、以及對四環素耐藥率高達79.5%，糞腸球菌對臨床上大多數的抗生素耐藥率較低。耐萬古霉素腸球菌（vancomycin resistantEnterococcus VRE）自20世紀80年代中期被發現后，隨即在全球蔓延。該院糞場球菌、屎腸球菌對利奈唑胺、萬古霉素耐藥菌株均已出現，應引起重視，提示臨床應合理選擇抗菌藥物。

該院檢出的腸桿菌科細菌主要為大腸埃希菌和肺炎克雷伯桿菌。大腸埃希菌對氨芐西林、頭孢曲松的耐藥率>50%。肺炎克雷伯菌對氨芐西林的耐藥率>50%。兩者對其他受試藥物均較敏感。該院CRE的檢出率為0.5%，肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌CRE分別占各自菌種的0.3%、0.5%，且對碳青霉烯類抗生素的耐藥率低于1%，遠低于CHINET監測數據及其他相關文獻報道[11]，CRE的標本主要來自婦科，從分泌物標本中檢出，主要由于婦科病人免疫力低下，侵襲性操作多，容易發生醫院感染[12]。醫院需要加強對這些科室的病原菌管理及耐藥性監測。

研究中，該院檢出的非發酵革蘭陰性桿菌中銅綠假單胞菌46株、鮑曼不動桿菌18株。銅綠假單胞菌對所有的抗菌藥物的耐藥率均在5%以下，未檢測出耐碳青霉烯類菌株。18株鮑曼不動桿菌除了對氨曲南的耐藥率為66.7%，對其他所檢測的藥物的感染均保持高度敏感性，有別于2020年CHINET監測數據全國平均水平以及其他三級醫院的監測數據[13-14]。這主要是因為該院分離株主要來自兒童，病情較輕，與多重耐藥銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌高檢出率的三甲綜合性醫院有明顯的區別。綜合性醫院兩種菌的高檢出率與患者基礎疾病較嚴重復雜，長期的低免疫力狀態、經常進行侵入性診療手段以及臨床抗生素的不合理使用密切相關，因此，醫務人員應注重隔離相關措施，加強手衛生以及抗生素的合理使用，以防止院內感染的發生。

綜上所述，通過對2021年該院臨床細菌耐藥性監測數據的分析，發現該院細菌耐藥形勢依然不樂觀，不同菌株對臨床常用的抗菌藥物耐藥性不同。對該院的細菌耐藥情況進行長期動態監測，實時了解耐藥菌流行病學以及藥敏變遷趨勢是非常重要的，據此可為臨床醫師經驗用藥以及合理使用抗生素提供科學的實驗室依據。在日常的工作中，微生物實驗室也應加強與臨床科室的溝通，協同多部門合作，加強病房的管理，以此來控制和減少醫院常見耐藥菌的播散和流行。此外，因本次耐藥監測的樣本量少，數據分析結果仍有待進一步深入。

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作者簡介：趙偉（1990-），女，江蘇沭陽人，江蘇省南京市婦幼保健院檢驗科住院醫師（檢驗醫師），臨床檢驗診斷學碩士，研究方向：微生物、免疫等臨床檢驗。

基金項目：南京醫科大學科技發展基金（No：NMUB20210095）

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