血清HO-1、NBNA評分在早產兒腦損傷中變化分析及對腦發育預后評估的價值*

鄧琳凡，王 敏，康曉萍，伍術晶

電子科技大學醫學院附屬綿陽醫院/綿陽市中心醫院兒科，四川綿陽 621000

目前，早產兒在產科分娩中越來越常見，據報道顯示，全球早產兒占比高達10%，隨著早產兒出生率增高，與之相關的腦神經功能后遺癥發生率也有所增長，包括認知障礙、發育遲緩、視聽障礙等[1]。早產兒腦神經功能損害與多種因素有關，如產程延長、應激反應、缺氧缺血等，危害性非常大，可能引起不同程度的智力障礙、腦性癱瘓[2]。為了改善早產兒的預后，產科需積極發現患兒的腦損害情況，給予輔助治療，促進腦功能發育，基于此，神經功能評估對這類患兒至關重要。目前，臨床針對新生兒神經功能進行評估的量表較多，包括Dubowitz神經學檢查、新生兒行為評估量表、新生兒神經行為測定(NBNA)等，其中NBNA評估方法較簡單，能對早產兒行為功能進行全面評價，穩定性好，可行性高[3-4]。臨床可考慮采用NBNA評分法分析早產兒腦損傷程度，并預測預后，為及時干預提供依據。此外，研究發現血紅素加氧酶-1(HO-1)在腦出血后應激反應作用下能誘導表達[5]。因此，本研究考慮采用血清HO-1、NBNA評分評估早產兒腦損害情況，分析二者對預后的評估價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年9月至2020年4月于本院產科分娩的130例早產兒，根據其有無腦損傷分為腦損傷組(n=52)、對照組(n=78)，兩組基線資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。本研究獲本院倫理委員會批準。

表1 兩組基線資料比較

1.2納入與排除標準

1.2.1納入標準 (1)腦損傷組：胎齡<37周；體質量1 500～2 500 g；出生后完善頭顱影像學檢查，提示為腦損傷；能配合在出生后第3、7、14天檢測血清HO-1水平以及進行NBNA評分；待矯正胎齡40周后可隨訪6個月；家屬知情同意。(2)對照組：出生后完善頭顱影像學檢查提示未見腦損傷；胎齡、性別、體質量、分娩方式與腦損傷組匹配；能配合腦損傷組各時段完善血清HO-1檢測及NBNA評分；家屬知情同意。

1.2.2排除標準 (1)患先天性遺傳代謝疾病者；(2)同時伴有肝、腎、心等重要臟器損害者；(3)患染色體疾病者；(4)先天性神經系統畸形者。

1.3研究方法 所有受試者均在出生后第3、7、14天檢測血清HO-1水平，并進行NBNA評分。(1)血清HO-1檢測：采集2 mL靜脈血，以轉速3 000 r/min，離心10 min，離心半徑8 cm，分離血清，存放至-70 ℃環境中待測。經酶聯免疫吸附法測定血清HO-1水平，試劑盒由上海鈺博生物科技有限公司提供，根據說明書操作。(2)NBNA評分[6]：內容包括原始反射(3項，6分)、被動肌張力(4項，8分)、主動肌張力(4項，8分)、行為能力(6項，12分)、一般評估(3項，6分)，總共20個項目，分值范圍為0～40分，得分為整數，總分38～40分、36～37分、≤35分分別提示正常、可疑、異常。(3)亞分組方法：①根據腦損傷組的胎齡分成A組(胎齡<32周，n=16)、B組(胎齡32～<34周，n=19)、C組(胎齡34～36周，n=17)。②在腦損傷患兒矯正胎齡至40周后隨訪6個月，經振幅整合腦電圖(aEEG)評估腦發育情況。aEEG主要通過背景活動評估[7]：波譜帶上邊界>10 μV，且下邊界>5 μV即振幅正常；波譜帶上、下邊界<5 μV，且邊界>10 μV即輕度異常；波譜帶上邊界<10 μV，且下邊界<5 μV即重度異常。據此評估預后，以重度異常者為不良組(n=13)，振幅正常、輕度異常者為良好組(n=39)。

2 結 果

2.1兩組血清HO-1水平及NBNA評分比較 兩組第7、14天的血清HO-1水平低于第3天，NBNA評分高于第3天，差異有統計學意義(P<0.05)。其中腦損傷組第3、7、14天的血清HO-1水平高于對照組，而NBNA評分低于對照組，且腦損傷組的血清HO-1水平均值高于對照組，NBNA評分均值低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組血清HO-1水平及NBNA評分比較

組別nNBNA評分(分)第3天第7天第14天均值腦損傷組5228.71±1.8229.85±1.46ab32.24±1.82ab30.27±1.24對照組7833.65±1.7835.24±1.72ab37.43±1.85ab35.44±1.63t15.36318.56815.77219.421P<0.001<0.001<0.001<0.001

2.2不同胎齡腦損傷患兒的血清HO-1水平及NBNA評分比較 3組第7、14天的血清HO-1水平低于第3天，NBNA評分高于第3天，差異有統計學意義(P<0.05)。A組第3、7、14天的血清HO-1水平及均值高于B組、C組，且B組高于C組，而A組第3、7、14天的NBNA評分及均值低于B組、C組，且B組低于C組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 不同胎齡腦損傷患兒的血清HO-1水平及NBNA評分比較

組別nNBNA評分(分)第3天第7天第14天均值A組1627.11±0.8928.53±0.76a30.95±0.52ab28.86±0.95B組1928.45±0.56c29.43±0.47ac32.25±0.45abc30.04±0.72cC組1730.51±0.52cd31.57±0.42acd33.45±0.50abcd31.84±0.68cdF109.114129.170107.86860.480P<0.001<0.001<0.001<0.001

2.3不同腦發育預后患兒的血清HO-1水平及NBNA評分比較 兩組第7、14天的血清HO-1水平低于第3天，NBNA評分高于第3天，差異有統計學意義(P<0.05)。不良組第3、7、14天的血清HO-1水平及均值高于良好組，NBNA評分及均值低于良好組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 不同腦發育預后患兒的血清HO-1水平及NBNA評分比較

組別nNBNA評分(分)第3天第7天第14天均值良好組3929.43±0.3630.54±0.52a33.51±0.84ab31.64±1.13不良組1327.43±0.6428.52±0.71a31.69±0.76ab29.83±1.25t14.07711.0396.9184.872P<0.001<0.001<0.001<0.001

2.4血清HO-1水平及NBNA評分對腦損傷患兒腦發育預后的評估價值 血清HO-1水平及NBNA評分評估腦損傷患兒腦發育預后的AUC分別為0.724、0.748，二者聯合評估的AUC為0.846，見表5及圖1。

表5 血清HO-1水平及NBNA評分對腦損傷患兒腦發育預后的評估價值

圖1 血清HO-1水平及NBNA評分評估腦損傷患兒腦發育預后的ROC曲線

3 討 論

腦損傷在早產兒中較常見，既往研究指出，與足月兒相比，早產兒更易受負面環境作用的影響，導致大腦結構異常，此外，早產兒胚胎生發基質含有較多線粒體，對缺氧、缺血較敏感，更容易出現腦損傷[8]。這類患兒通常伴有腦損傷危險因素，如感染、缺氧、缺血等，經頭顱超聲或MRI檢查，可見腦白質受損、腦水腫等表現[9]。早產兒的腦血管發育欠佳，破裂出血風險較高，易誘發腦損傷，或危及生命，即便存活也可能留下不同程度的神經系統損害[10]。盡早診療是改善早產兒腦損傷預后的關鍵，研究表明NBNA評分的內容比較全面，靈敏度、特異度高，能反映腦損傷嚴重程度，輔助評估患兒病情[11]。然而，臨床對于NBNA評分與腦發育預后的關系尚不明確。另有研究認為，HO-1作為應激蛋白，在應激狀態下呈高表達，與腦損傷發生有關，但具體機制不明確[12]。因此，臨床仍需對此進行探討。

本研究結果顯示，與無腦損傷者相比，腦損傷者的血清HO-1水平增高，NBNA評分下降。HO-1在細胞分解血紅素中發揮了重要作用，其在組織細胞微粒體內廣泛存在，正常情況下表達量極低，但一旦人體出現缺血、缺氧、腦出血、發熱等應激反應，則會對其表達進行誘導，導致血清HO-1水平上調[13]。腦損傷后可導致觸珠蛋白、血紅蛋白相結合，從而形成二者結合物，并分解成血紅素，而血紅素神經毒性作用強，若轉移到溶酶體內，則HO-1可將其分解后生成鐵、膽綠素、一氧化碳，保護神經功能[14]。本研究提示早產兒發生腦損傷后，血清HO-1水平應激性增高，可能是通過抑制炎癥、抗氧化等反應，緩解細胞損害，應激性保護神經細胞。NBNA評分能反映新生兒神經功能與行為，分值越高表明神經功能越好。本研究顯示，腦損傷患兒的NBNA評分較無腦損傷者明顯下降，原因可能為腦損傷會影響患兒的神經功能發育，導致智力、行為等發育落后。杜桂蓮等[15]發現，NBNA評分能對早產兒腦損傷進行預測，與本研究結論相近。本研究顯示，兩組早產兒隨著出生時間延長，血清HO-1水平下降，而NBNA評分升高，這主要是因其腦發育較出生時明顯改善所致。

本研究結果提示，A組第3、7、14天的血清HO-1水平及均值高于B、C組，而NBNA評分及均值低于B、C組，表明隨著胎齡越大，患兒的腦損傷越輕，胎齡越小的患兒腦損傷越重。分析原因，可能在于胎齡相對較大的患兒腦發育較完善，導致神經行為受到的影響相對較小，故血清HO-1水平應激性增高程度較小，NBNA評分更高。通過分析腦損傷患兒的預后，發現預后不良者的血清HO-1水平較良好者更高，NBNA評分較良好者降低，最終繪制ROC曲線，證實二者對患兒腦發育預后有一定評估價值，AUC均高于0.700。本研究顯示當出現腦損傷應激反應后，患兒的血清HO-1水平隨著出生時間延長呈下降趨勢。這提示出生時間越長，血清HO-1應激性增高越輕，意味著腦損傷程度減輕，其中預后良好者的血清HO-1水平下降更明顯，原因在于預后良好者的腦損傷改善更明顯，能抑制血清HO-1水平應激性增高。李土明等[16]以缺血性腦血管病患者進行研究，發現HO-1在這類患者的血清中呈高水平表達，進一步證實HO-1參與了腦損害進展。本研究顯示，預后越好的患兒NBNA評分越高，表明腦損傷改善越好，患兒的肌張力、神經行為功能改善越明顯。臨床可通過檢測血清HO-1水平以及對患兒進行NBNA評分，評估腦發育預后。

綜上所述，與正常早產兒相比，腦損傷患兒的血清HO-1水平明顯上調，且NBNA評分下降，二者能作為評估腦損傷早產兒腦發育預后的指標。本研究的不足在于僅納入52例腦損傷病例，樣本量較少，未來需增加樣本量對此進行更深入探討。