循環腫瘤細胞檢測對于結腸癌患者的臨床意義分析

陳 維 李蘇卿 朱 瑋 呂成余

南京醫科大學附屬南京醫院(南京市第一醫院)普外科，江蘇省南京市 210006

隨著我國飲食結構的變化，結腸癌發病率逐年增高，對結腸癌相關檢測的深入研究非常必要。循環腫瘤細胞(Circulating tumor cells，CTCs)檢測是近年來開展的一種新型檢測技術，是目前三種熱門非侵入性液體活檢方法中的一種，對腫瘤的診斷和預后有重要的參考價值。隨著檢測技術的發展，目前CTCs的檢測已經可以達到十分精確的水準[1]，其臨床價值也日益受到重視。對于結腸癌與CTCs關系的文獻目前尚不多，本文擬對結腸癌患者CTCs與病理及預后之間的關聯進行探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017年2月—2018年2月在我院普外科住院并接受手術的62例結腸癌患者，其中男39例，女23例，年齡39～81歲。納入標準：(1)經腸鏡及活檢病理學確診；(2)排除其他腫瘤史；(3)入院前未接受過任何腫瘤相關治療；(4)預計生存期至少半年以上。以上患者均接受結腸癌根治術，切除標本均行常規病理學檢查。

1.2 CTCs檢測 以上患者均于術前應用專用的Cellsave管采集肘正中靜脈血7.5ml。試劑及檢測：人外周血白細胞去除試劑盒(江蘇萊爾生物醫藥科技有限公司)，熒光原位雜交樣品處理試劑盒(江蘇萊爾生物醫藥科技有限公司)。CTC檢測采用萊爾染色體擴增型CTC檢測SOP技術。陽性標準：CTC細胞≥2即為陽性，<2為陰性，見圖1。

圖1 循環腫瘤細胞(CTCs)鏡下表現

1.3 術后隨訪 對所有患者進行術后隨訪跟蹤，除死亡隨訪終止外，隨訪期36個月。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0數據統計分析軟件完成，計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CTCs檢測結果與臨床病理的相關性 患者CTCs陽性與性別、年齡、腫瘤大小及腫瘤分化程度無關(P>0.05)，與病理T分期、淋巴轉移及脈管侵犯有關(P<0.05)，見表1。

表1 CTCs結果與臨床病理的相關性

2.2 CTCs檢測結果與術后轉移復發的相關性 CTCs陰性患者術后36個月隨訪時間內1例出現術后復發，無死亡。CTCs陽性患者出現復發或轉移9例，死亡7例。兩者比較有統計學差異(χ2=4.142，P=0.042<0.05)，見圖2。

圖2 兩組生存曲線

3 討論

目前CTCs的檢測方法較多，但每種方法均有局限性。筆者選取的萊爾染色體擴增型CTC檢測是基于染色體擴增平臺的Cyttel-CTC檢測技術，通過對不同實體瘤選擇不同標志物進行相對特異性的檢測，實現了高靈敏性的檢出，在早期患者中，同樣有較高檢出率。

進入血液循環中的腫瘤細胞大部分被免疫系統吞噬或被血液中調節細胞消滅[2]，有極少數能逃避免疫侵蝕，并且在特定條件下離開血液循環，侵入原發或遠處器官，即臨床出現復發或遠處轉移[3]。目前已在乳癌、胃癌、胰腺癌及肝癌等多種惡性腫瘤中發現了CTCs 存在的證據[4-7]。研究顯示，CTCs 能有效預測多種腫瘤的復發轉移及預后，同時可以作為預測相關輔助治療療效的評價標準[8-11]。

本文結果發現，結腸癌患者CTCs的出現與性別、年齡、腫瘤大小及腫瘤分化程度無關，而與病理T分期、淋巴轉移及脈管侵犯有關。據此可以推測出在結腸癌的發生發展過程中，腫瘤侵犯基底膜后，進而腫瘤細胞進入血液循環及淋巴循環，導致循環腫瘤細胞的出現。CTCs的發生和腫瘤浸潤局部毛細血管及毛細淋巴管密切相關。CTCs陽性的患者，即使手術能達到R0切除，體內依然有存在腫瘤細胞的可能，因此腫瘤復發的風險大大增加。對兩組患者進行36個月的隨訪，證實了 CTCs陽性患者的腫瘤復發率明顯高于CTCs陰性的患者。由此可見CTCs檢測對結腸癌的預后有相當重要的意義。

因此臨床上對于術前 CTCs陽性的結腸癌患者，即使行R0切除，或者術后病理分期較早，仍然要考慮到預后不佳的可能，可適當加強術后全身性輔助治療的時間及強度，縮短術后復查周期。有研究發現CTC 檢測可以一定程度反映轉移灶腫瘤細胞對化療藥物的敏感性[12]，因此在輔助治療期間也可行多次CTC檢測，從細胞水平對化療方案或藥物療效進行評價。由于 CTCs的出現和局部毛細血管及毛細淋巴管的浸潤密切相關，而腫瘤患者外周血中的CTCs半衰期為1～2.4h[13]，存活時間短，假陰性的可能性增大。因此對于術前CTCs陰性的患者，如果術后病理有脈管侵犯，也應該作為預后不佳的考慮因素。

綜上所述，循環腫瘤細胞檢測作為一種新型檢測技術，其結果與結腸癌術后病理分期及預后有相關性，CTCs陽性患者預后較陰性患者差。