氧化應激指標與缺血性腦卒中繼發出血轉化的關系及對癲癇發病的預測研究

王萌萌

【摘要】 目的：探討氧化應激指標與缺血性腦卒中繼發出血轉化的關系及對癲癇發病的預測研究。方法：選擇黑龍江省佳木斯市中心醫院2016年1月-2020年10月接診的365例缺血性腦卒中患者作為觀察組，另選同期的100例健康體檢者作為對照組;根據缺血性腦卒中患者是否繼發出血轉化，分為出血組和正常組;比較觀察組與對照組血清氧化應激指標[丙二醛（MDA）、8-羥基脫氧鳥苷酸（8-OHdG）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）]水平，使用單因素及多因素logistic回歸分析血清氧化應激指標與缺血性腦卒中繼發出血轉化的關系，分析癲癇發病情況，通過受試者工作特征（ROC）曲線下面積（AUC）評價氧化應激指標對癲癇發病的預測效能。結果：觀察組血清MDA、8-OHdG水平均明顯高于對照組，GSH-Px水平明顯低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）;出血轉化組血清MDA、8-OHdG水平均明顯高于正常組，GSH-Px水平明顯低于正常組，差異均有統計學意義（P<0.05）;經多因素logistic回歸分析顯示，血清MDA>7.34 ng/mL、8-OHdG>18.12 ng/mL均為缺血性腦卒中繼發出血轉化的獨立危險因素（P<0.05），GSH-Px>244.37 ng/mL是保護性因素（P<0.05）;經ROC曲線分析，血清MDA、8-OHdG聯合GSH-Px預測癲癇發病的AUC為0.916。結論：血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平均與缺血性腦卒中繼發出血轉化密切相關，三者聯合預測癲癇發病的效能較高，值得臨床檢測中應用。

【關鍵詞】 缺血性腦卒中 繼發出血轉化 氧化應激 癲癇

[Abstract] Objective： To explore the relationship between oxidative stress index and the transformation of ischemic stroke secondary bleeding and to predict the incidence of epilepsy. Method： 365 patients with ischemic stroke admitted to Jiamusi Central Hospital， Heilongjiang Province from January 2016 to October 2020 were selected as the observation group， and 100 healthy physical examination patients in the same period were selected as the control group. Patients with ischemic stroke were divided into bleeding group and normal group according to whether they had secondary bleeding transformation. The levels of serum oxidative stress indexes [malondialdehyde （MDA）， 8-hydroxydeoxyguanosine acid （8-OHdG） and glutathione peroxidase （GSH-Px）] were compared between the observation group and the control group. Univariate and multivariate logistic regression were used to analyze the relationship between serum oxidative stress indexes and the transformation of secondary bleeding after ischemic stroke. The incidence of epilepsy was analyzed. The area under ROC curve （AUC） was used to evaluate the predictive efficacy of oxidative stress on the incidence of epilepsy. Result： The levels of serum MDA， 8-OHdG in the observation group were significantly higher than those in the control group， and level of GSH-Px was significantly lower than that in the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. The levels of serum MDA， 8-OHdG were significantly higher in the hemorrhagic transformation group than those in the normal group， and level of GSH-Px was significantly lower than that in the normal group， with statistically significant differences （P<0.05）. Multivariate logistic regression analysis showed that serum MDA>7.34 ng/mL， 8-OHdG>18.12 ng/mL were independent risk factors for secondary hemorrhagic transformation of ischemic stroke （P<0.05）， and GSH-Px >244.37 ng/mL?was a protective factor （P<0.05）. By ROC curve analysis， the AUC of serum MDA and 8-OHdG combined with GSH-Px in predicting the onset of epilepsy was 0.916. Conclusion： The levels of serum MDA， 8-OHdG and GSH-Px?are closely related to the secondary bleeding transformation of ischemic strok. The combination of the three has high efficacy in predicting the onset of epilepsy， and it is worthy of application in clinical testing.

[Key words] Ischemic stroke Secondary bleeding transformation Oxidative stress Epilepsy

First-author’s address： Jiamusi Central Hospital， Heilongjiang Province， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.03.038

缺血性腦卒中是一種病情兇險且致死率和致殘率均較高的急性腦血管疾病，局部腦組織缺血被公認為此病的典型病理表現[1]。靜脈溶栓治療是恢復缺血性腦卒中急性期血流最有效的方法之一，然而大多數患者在從溶栓治療中獲益的同時，面臨著繼發出血轉化的風險，并可能增大癲癇發病的可能性。癲癇是缺血性腦卒中的常見并發癥，尤其是繼發出血轉化患者，癲癇發病率高達18%[2]。對于缺血性腦卒中繼發出血轉化的檢出，現階段主要借助頭顱CT、MRI等影像學檢查，臨床急需尋找此病的血液學標志物，期望能篩選出繼發出血轉化的高風險人群，以指導溶栓治療，減少癲癇發病。近年來，研究顯示，氧化應激指標可能是缺血性腦卒中繼發出血轉化的病理產物，可作為溶栓治療中并發出血危險性的血液學標志物[3-4]。目前也有研究顯示氧化應激指標可能預測癲癇發病[5]。對此，本研究目的在于探討氧化應激指標與缺血性腦卒中繼發出血轉化的關系及對癲癇發病的預測價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇佳木斯市中心醫院2016年1月-2020年10月接診的365例缺血性腦卒中患者作為觀察組。納入標準：（1）符合缺血性腦卒中的診斷標準;（2）發病48 h內入院并接受靜脈溶栓治療;（3）首次發病;（4）患者自愿參與研究，配合治療。排除標準：（1）合并其他神經系統疾病;（2）長期服用可能影響氧化應激指標的藥物;（3）患有嚴重的心、肝、腎疾病;（4）不耐受溶栓治療。另選同期的100例健康體檢者作為對照組。納入標準：無重要器官嚴重疾病;血常規檢查正常者;溝通能力正常，能獨立完成研究。排除標準：有精神病史者;臥床或行動不便者。該研究經醫院醫學倫理學委員會批準，研究對象知情同意。

1.2 方法 （1）氧化應激指標檢測。收集觀察組患者靜脈溶栓治療前及對照組清晨空腹靜脈血5 mL，均放置在抗凝試管中，離心分離并提取血清，置于-70 ℃冰箱中待測。使用酶聯免疫吸附試驗檢測血清氧化應激指標[丙二醛（MDA）、8-羥基脫氧鳥苷酸（8-OHdG）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）]，檢測試劑盒分別來源于上海臻科生物科技有限公司、上海信裕生物科技有限公司、上?？道噬锟萍加邢薰?，均嚴格按照說明書進行檢測操作。（2）根據溶栓后頭顱CT結果顯示缺血性腦卒中患者有無顱內出血轉化，分為出血組和正常組;比較觀察組與對照組血清氧化應激指標水平，使用單因素及多因素logistic回歸分析血清氧化應激指標與缺血性腦卒中繼發出血轉化的關系，分析癲癇發病情況，通過受試者工作特征（ROC）曲線下面積（AUC）評價氧化應激指標對癲癇發病的預測效能。

1.3 統計學處理 采用SPSS 18.0軟件處理所得數據，符合正態分布且方差齊性的計量資料以（x±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間數據比較采用方差分析;計數資料使用字2檢驗;采用ROC曲線計算兩組AUC。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 觀察組男253例，女112例;年齡41～75歲，平均（66.12±4.35）歲。對照組男59例，女41例;年齡36～71歲，平均（66.83±8.46）歲。兩組一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 觀察組與對照組血清氧化應激指標水平比較 觀察組血清MDA、8-OHdG水平均明顯高于對照組，GSH-Px水平明顯低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.3 腦卒中出血轉化單因素分析 隨訪觀察365例缺血性腦卒中患者，繼發出血轉化58例;出血轉化組血清MDA、8-OHdG水平均明顯高于正常組，GSH-Px水平明顯低于正常組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.4 腦卒中出血轉化多因素logistic回歸分析 以血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平為自變量，賦值為：根據中位數MDA>7.34 ng/mL=1，MDA≤7.34 ng/mL=0;8-OHdG>18.12 ng/mL=1，8-OHdG≤18.12 ng/mL=0;GSH-Px>244.37 ng/mL=1，GSH-Px≤244.37 ng/mL=0;以腦卒中出血轉化為應變量，經多因素logistic回歸分析顯示，血清MDA>7.34 ng/mL、8-OHdG>18.12 ng/mL均為缺血性腦卒中繼發出血轉化的獨立危險因素（P<0.05），GSH-Px>244.37 ng/mL為保護性因素（P<0.05）。見表3。

2.5 癲癇發病組與非癲癇發病組血清氧化應激指標水平比較 在58例缺血性腦卒中繼發出血轉化患者中，癲癇發病7例，占12.07%;癲癇發病組血清MDA、8-OHdG水平均明顯高于非癲癇發病組，GSH-Px水平明顯低于非癲癇發病組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表4。

2.6 氧化應激指標預測癲癇發病的ROC曲線分析 經ROC曲線分析，血清MDA、8-OHdG聯合GSH-Px預測癲癇發病的AUC為0.916，明顯大于單一指標MDA的0.687、8-OHdG的0.594和GSH-Px的0.715。見圖1、表5。

3 討論

繼發出血轉化是限制缺血性腦卒中患者溶栓治療，增大治療難度和影響預后的重要危險因素。關于缺血性腦卒中繼發出血轉化的機制仍未明確，國外研究認為，此病并不必然與溶栓治療有關，與缺血性腦卒中的病情損傷有關，還可能增大癲癇發病的風險[6]。由此，如能尋找檢測較為簡便的血液學標志物，評估缺血性腦卒中繼發出血轉化的風險，準確預測癲癇發病，對于制訂治療策略極其重要。張小鵬[7]研究顯示，氧化應激產生的自由基不僅是缺血性腦卒中的病理產物，還可能介導繼發出血轉化的病理過程。對于缺血性腦卒中患者，血清MDA、8-OHdG、GSH-Px均能在一定程度上反映機體氧化應激水平。張穎[8]研究表明，缺血性腦卒中患者血清MDA水平較健康體檢者明顯升高。本研究結果亦支持了上述結果，提示缺血性腦卒中患者存在氧化應激反應，體內自由基增多，可能損傷血管壁、增大血管通透性，導致再通血管或側支循環發生滲血或破裂出血[9]。由此可見，氧化應激與缺血性腦卒中密切相關，與患者繼發出血轉化的關系，研究尚少。

MDA是氧自由基的代謝產物之一，能反映氧化損傷程度。張鑫宇等[10]研究顯示，血清MDA水平與缺血性腦卒中發病初期的病情嚴重程度密切相關。8-OHdG是細胞DNA氧化損傷的標志物。有研究指出，8-OHdG能用于評價機體氧化損傷程度[11]。GSH-Px具有減少氧自由基的生理作用，能提高機體的抗氧化能力[12]。由此可見，血清MDA、8-OHdG水平升高，GSH-Px水平降低，可能預示著缺血性腦卒中患者的病情惡化，溶栓治療效果不理想，有發生繼發出血轉化的危險。本研究經單因素及多因素logistic回歸分析顯示，血清氧化應激指標與缺血性腦卒中繼發出血轉化的關系密切，其中血清MDA>7.34 ng/mL、8-OHdG>18.12 ng/mL均為缺血性腦卒中繼發出血轉化的獨立危險因素（P<0.05），GSH-Px>244.37 ng/mL為保護性因素（P<0.05）;與Syafrita等[13]的研究結果相符，提示缺血性腦卒中繼發出血轉化患者體內存在嚴重的氧化應激反應亢進及抗氧化能力減小的現象。許靖等[14]研究認為，氧化應激反應增強是缺血性腦卒中繼發出血轉化的特異性表現，亦佐證了本研究上述觀點。說明患者血清MDA、8-OHdG水平持續升高，GSH-Px水平持續降低，提示缺血性腦卒中患者病灶可能出現大面積腦梗死和嚴重腦水腫，而嚴重腦水腫是繼發出血轉化的獨立危險因素。

癲癇發病是缺血性腦卒中繼發出血轉化患者的常見并發癥之一[15]。Li等[16]研究發現，癲癇發病與缺血性腦卒中繼發出血轉化患者大腦皮層缺血缺氧引起的氧化應激反應有關。尹小花等[17]研究認為，氧化應激損傷導致局部大腦神經元異常放電，神經細胞損傷，引起癲癇發病。本研究發現，血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平均與缺血性腦卒中繼發出血轉化有關，若血清MDA、8-OHdG持久升高，可能增大癲癇發病風險。筆者通過ROC曲線分析，發現缺血性腦卒中繼發出血轉化患者血清MDA、8-OHdG聯合GSH-Px預測癲癇發病的AUC為0.916，明顯大于單一指標MDA的0.687、8-OHdG的0.594和GSH-Px的0.715，提示三者聯合預測癲癇發病的效能較高，與谷鴻秋等[18]研究一致，該學者研究表明氧化應激反應是缺血性腦卒中患者并發癲癇的獨立危險因素。此外，Ba等[19]研究顯示，缺血性腦卒中繼發出血轉化并發癲癇的患者血清MDA、8-OHdG水平明顯升高，GSH-Px水平明顯降低，也支持了本研究上述觀點?；谏鲜鲅芯拷Y果，可認為臨床上監測缺血性腦卒中繼發出血轉化患者血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平的變化，對于評估患者病情演變具有積極作用，并能促使臨床工作者不斷尋找氧化應激拮抗劑，用于缺血性腦卒中繼發出血轉化及癲癇發病的防治。

綜上所述，血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平均與缺血性腦卒中繼發出血轉化密切相關，三者聯合預測癲癇發病的效能較高，值得臨床檢測中應用。然而，本研究存在以下局限性：研究規模較小，隨訪時間不長，病例發病距入組時間不同，治療方案存在一定差異，均可能對檢測結果產生影響，本研究結論還需進一步深入研究加以驗證。

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（收稿日期：2021-04-25） （本文編輯：占匯娟）