底質和餌料對不同生長階段橄欖蟶蚌稚蚌成活和生長的影響

任曉亮，呂國華，姜海洲,2，王 林，梁建超，馬學艷,，金 武,，徐東坡,，占明飛，聞海波,，顧若波,

(1.南京農業大學無錫漁業學院，江蘇無錫 214081；2.中國水產科學研究院淡水漁業研究中心，農業農村部淡水魚類遺傳育種與養殖生物學重點開放實驗室，江蘇無錫 214081；3.中國水產科學研究院淡水漁業研究中心，中美淡水貝類種質資源保護及利用國際聯合實驗室，江蘇無錫 214128；4.阜陽市水產管理局，安徽阜陽 236001；5.安徽水韻環保股份有限公司，安徽蕪湖 241000)

橄欖蟶蚌()屬雙殼綱蚌目蚌科蟶蚌屬()，俗稱蜆子、義河蚶或香蕉蚌，是我國特有的一種珍稀淡水食用蚌類，曾廣泛分布于我國淡水湖泊和河流中，由于其自身繁殖特點以及生境污染、設施工程建設等原因，橄欖蟶蚌自然資源出現嚴重衰退，近十幾年在太湖、鄱陽湖、洞庭湖的貝類種質資源調查中已經很難采集到的活體的橄欖蟶蚌，目前僅在湖北天門河、淮河部分流域能采集到橄欖蟶蚌活體，因此開展橄欖蟶蚌的人工繁育以及稚蚌培育技術研究對保護橄欖蟶蚌生物資源具有重要意義。

當餌料、底質以及水質指標滿足橄欖蟶蚌生存條件，并輔以精細管理，就可以實現橄欖蟶蚌的人工養殖。孫光興首次通過鉤介幼蟲體外培養技術獲得了變態成功的橄欖蟶蚌稚蚌，為我國橄欖蟶蚌人工繁殖提供了技術支撐。橄欖蟶蚌目前主要靠人工培育種苗供應生產所需，其生命力極其脆弱，稚蚌期是直接影響到人工繁育成敗的關鍵階段。稚蚌的高死亡率很大一部分原因是缺乏充足的適口餌料生物和適宜的生存環境。因此，餌料和底質是蚌類人工繁育成功的兩個關鍵因素。

本試驗通過對不同生長階段稚蚌添加不同的餌料和底質，探究餌料和底質對稚蚌成活率和生長的影響，為橄欖蟶蚌的人工繁殖提供科學指導。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗所用橄欖蟶蚌稚蚌取自中國水產科學研究院淡水漁業研究中心南泉養殖基地培育的0～90日齡稚蚌。根據橄欖蟶蚌稚蚌生長發育的特征，將稚蚌期分為前期稚蚌(0～30日齡)、中期稚蚌(31～60日齡)及后期稚蚌(61～90日齡)。選取三種藻類，藻1為機械破壁微擬球藻()，藻2為未破壁微擬球藻，藻3為卵囊藻(sp.)。實驗選取四種底質，硬黃泥采自橄欖蟶蚌的采集地霍邱縣；花園泥采自中國水產科學研究院淡水漁業研究中心南泉基地；鐵銹泥采自中國水產科學研究院淡水漁業研究中心江陰基地；黃泥采自阜陽市王家壩鎮淮河橄欖蟶蚌種質資源保護區，使用前將0.5 kg泥土溶于5 L水中，混合均勻并用200目篩網過濾。

1.2 實驗方法

1.2.1 餌料種類和密度對前期稚蚌成活和生長的影響

橄欖蟶蚌稚蚌剛完成變態發育時的殼長約為100 μm，遠小于三角帆蚌()和紫黑翼蚌()稚蚌，因個體較小，此時開口餌料的選擇至關重要，而此時橄欖蟶蚌稚蚌對底質需求量較少，底質的影響因素較小。因此僅探究餌料種類及密度對0～30日齡稚蚌生長和成活的影響，不同底質對其存活和生長的影響有待進一步探究完善。將體外培養獲得的前期稚蚌設置A1、A2、A3 3個處理組，每組3個重復，每個重復放3 000只稚蚌。將稚蚌放入(45 cm×32 cm×15 cm)的養殖箱中培育，養殖水體約為20 dm，將養殖箱放入循環保溫系統中，控制水溫在(24±1)℃。每天上午翻池一次，換水1次，每次換水30 min，養殖箱出水口處套1個200目的篩網，防止稚蚌流失。換水后加入藻類和黃泥底質(親本采自王家壩保護區，因此選用王家壩保護區內采集的底泥)，其中A1組投喂藻1，A2組投喂藻2，濃度為3.4×10個/mL，A3組投喂藻1，濃度為6.8×10個/mL。養殖30 d后，在200目篩網上將稚蚌洗出，統計存活稚蚌數量，并隨機選取30只稚蚌，在光學顯微鏡(Olympus CX41)下拍照并測量其殼長(精確至0.01 mm)。

1.2.2 餌料種類和底質種類對中期稚蚌成活和生長的影響

31～60日齡階段是稚蚌快速生長的關鍵時期，此時餌料和底質對其生長均有重要作用，因此探究餌料種類和底質種類對中期稚蚌生長和成活的影響。實驗選取殼長為(1.66±0.03)mm，殼高為(1.01±0.02)mm的中期橄欖蟶蚌稚蚌，設計B1、B2、B3、B4、B5 5組，每組3個重復，每個重復放50只蚌。培育方法同1.2.1。換水后B1～B4添加黃泥底質，B5添加硬黃泥底質。B1組投喂藻3，B2組投喂50%藻3+50%藻2，B3組投喂藻2，B4和B5組投喂藻1，每日按照1.0×10個/mL藻類濃度投喂1次。成活率統計和殼長殼高測量同1.2.1。

1.2.3 底質對后期稚蚌成活和生長的影響

90日齡后稚蚌可長到1 cm以上，此時已可以放到大水體中養殖，且4種餌料對中期稚蚌的成活已無顯著影響，因此僅探究底質對后期稚蚌成活率和生長的影響，尋找適宜橄欖蟶蚌稚蚌生存的底質條件。實驗設計C1、C2、C3、C4四組，每組設置3個重復，每個重復放3 000只稚蚌。培育方法同1.2.1。其中C1組底質為硬黃泥，C2組底質為鐵銹泥，C3組底質為黃泥，C4組底質為花園泥，均投喂藻1，藻類密度為3.4×10個/mL。成活率統計和殼長殼高測量同1.2.1。

1.3 生長性能指標測定

根據以下公式計算稚蚌生長性能相關指標：

成活率=×100%；

殼長日生長率=(-)/×100%；

殼高日生長率=(-)/×100%，

式中：為實驗結束稚蚌存活數量，為實驗開始稚蚌數量；、為實驗結束時的殼長和殼高，、為實驗開始時的殼長和殼高，為實驗天數。

1.4 數據處理

試驗結果采用SPSS 20軟件進行統計分析，采用One-Way ANOVA 進行單因素方差分析，用最小顯著性差異法進行組間多重比較，所有結果均以平均值±標準差表示，<0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 餌料種類和密度對前期稚蚌成活和生長的影響

如表1所示：成活率A1組最高為(74.76±3.41)%，A2組最低為(58.00±0.90)%；殼長、殼高A1組最高，分別為(1.28±0.04)mm、(0.84±0.12)mm，A2組最低，分別為(0.82±0.07)mm、(0.66±0.04)mm。單因素方差分析表明：A1、A3組成活率、殼長和殼高均無顯著差異，但均顯著高于A2組。

表1 餌料種類和密度對橄欖蟶蚌前期稚蚌成活和生長的影響

2.2 餌料種類和底質種類對中期稚蚌成活和生長的影響

如表2所示：成活率B2組最高為(89.30±2.40)%，B3組最低為(84.70±4.67)%；殼長、殼高B4組最高，分別為(7.82±0.07)mm、(3.10±0.03)mm，殼長B3組最低，為(7.12±0.06)mm，殼高B1和B3最低，均為(2.90±0.03)mm。B5組成活率略高于B4組，但殼長、殼高均低于B4組。單因素方差分析表明：4組餌料對橄欖蟶蚌中期稚蚌的成活無顯著差異。B2組和B4組殼長和殼高無顯著性差異，但顯著高于B1組和B3組。2種底質對中期稚蚌成活率無顯著差異，但B4組殼長、殼高顯著高于B5組。

表2 餌料種類對橄欖蟶蚌中期稚蚌成活和生長的影響

2.3 底質種類對后期稚蚌成活和生長的影響

如表4所示：成活率C3組最高為(98.88±1.92)%，C4組的成活率最低，僅為(86.67±12.02)%；C1組殼長最高為(1.24±0.03)cm，C2組的殼長最低為(1.20±0.02)cm。單因素方差分析結果顯示：4組成活率和殼長均無顯著差異。

表3 不同底質對后期稚蚌成活和生長的影響

3 討論

3.1 藻類對稚蚌成活和生長的影響

藻類、細菌、浮游植物和底泥都是淡水蚌類的食物來源，其中藻類是稚蚌最重要的食物來源，王揚才等研究發現藻類約占貝類食物組成的90%，藻類的質量和數量直接影響到稚蚌的生長和成活。微擬球藻因其細胞內含有豐富的不飽和脂肪酸(主要是EPA)，有助于水生生物幼體的生長發育，所以廣泛應用于水產養殖生產中。張佳康等用小球藻()、卵囊藻、微擬球藻和四尾柵藻()分別投喂三角帆蚌稚蚌，微擬球藻效果要優于其他藻類。而劉建國在用微擬球藻投喂櫛孔扇貝()幼苗時發現，微擬球藻雖然能夠被攝食，但卻不易消化，容易導致食物在胃內滯留盈漲，造成代謝性饑餓或者營養不良。前期稚蚌餌料實驗結果顯示：投喂破壁微擬球藻的前期稚蚌成活率和殼長都顯著高于投喂未破壁微擬球藻，可能是因為橄欖蟶蚌的消化系統缺乏唾液腺和食道腺，消化道管壁的肌層很薄甚至沒有，所以消化吸收能力和消化管的蠕動能力較弱，微擬球藻細胞壁較厚抑制了前期稚蚌的消化和吸收，導致稚蚌成活率低、生長慢。因此在養殖前期稚蚌時應投喂破壁微擬球藻，有助于提高稚蚌成活和生長。中期稚蚌的餌料試驗結果可能是因為隨著稚蚌的生長，單一藻類的投喂可能無法滿足稚蚌下一階段生長對于營養的需求。卵囊藻和未破壁微擬球藻的最佳混合比例還有待進一步研究。中期稚蚌投喂未破壁微擬球藻組成活率為84.7%，相比于前期稚蚌成活率已大大提高，說明隨著稚蚌的生長，消化管的蠕動能力和消化能力增強，可以食用未破壁微擬球藻，所以在橄欖蟶蚌稚蚌人工培育后期，可使用國內生產的未破壁微擬球藻進行投喂，降低餌料成本。

何進金等在對菲律賓蛤仔()仔稚貝食性研究中發現，高密度餌料條件下稚貝的生長速度明顯高于低密度餌料條件。陳愛華等對大竹蟶()稚貝生長和存活的研究中發現，隨餌料密度的增加，稚貝存活率先升后降，在藻類密度達到2×10個/mL時最高，在4×10個/mL時開始下降。孫明龍等在對三角帆蚌的研究中提出：貝類攝食存在一定的閾值，即其單位時間內能夠消化的餌料量存在上限。HUA等在藻類密度對稚蚌生長及存活的研究中發現：3.5×10個/mL、8.5×10個/mL和1.75×10個/mL三個濃度沒有明顯差異。本實驗結果顯示3.4×10個/mL成活率和殼長略高于6.8×10個/mL，但差異不顯著。可能是因為稚蚌的攝食器官在高密度餌料中受到阻礙，也可能是因為餌料密度過高導致其他環境因子改變，從而導致成活率和殼長下降。3.4×10個/mL的餌料濃度即可滿足前期稚蚌生長所需。

3.2 底質對稚蚌成活和生長的影響

ISOM等研究發現，在養殖稚貝時，添加底泥可以提高其成活率；王如才等發現不同貝類對其生活底質具有選擇性，主要可以分為三類：砂質、泥砂質和泥質；HUA等設置了底泥組、細沙組、石灰石組以及無底質組四種底質對稚蚌生長和存活的影響，發現稚蚌在底泥中的成活率顯著高于其他組，無底質組的稚蚌全部死亡，說明稚蚌生長是需要底質的，底泥是其適宜底質。馬學艷等在研究底質對紫黑翼蚌稚蚌的影響中發現：普通黃泥和塘泥對紫黑翼蚌稚蚌的成活及生長均無顯著影響，據此推測不同蚌類對底質有不同的選擇性，底質的主要作用是為稚蚌提供優良的生存環境，利于稚蚌的存活和生長。中期稚蚌底質實驗結果顯示：黃泥組稚蚌殼長殼高顯著高于硬黃泥組，成活率差異不顯著，說明中期稚蚌在黃泥底質中更利于其殼的生長。后期稚蚌底質實驗結果顯示：稚蚌成活率、殼長和殼高四種底質間差異不顯著，推測隨著稚蚌的不斷生長，適應環境的能力增強，對底質要求降低。后期稚蚌在硬黃泥底質中殼長殼高生長最快，是否隨著橄欖蟶蚌的生長，更偏向生活在硬黃泥底質中，有待進一步實驗驗證；同時鐵銹泥與其他底質相比成活率和殼長沒有顯著差異，說明稚蚌是對鐵的需求不高，普通黃泥即可滿足稚蚌對鐵的需求。

4 結論

適合橄欖蟶蚌前期稚蚌生長的餌料種類是破壁微擬球藻，中期稚蚌以卵囊藻和未破壁微擬球藻的混合餌料組和破壁微擬球藻組的生長效果較好；且稚蚌前期按照3.4×10個/mL的餌料密度可以節省成本；中期稚蚌適宜的底質為黃泥，硬黃泥、花園泥、鐵銹泥和黃泥四種底質均適合后期稚蚌生長和存活。此次實驗以期為后來學者研究橄欖蟶蚌提供一定的理論支持，彌補橄欖蟶蚌稚蚌養殖技術的空白，為橄欖蟶蚌的人工培育提供理論依據，并為橄欖蟶蚌的種質資源恢復做出貢獻。