血管介入治療聯合脈血康膠囊對缺血性腦卒中病人MAPK/ERK信號通路及促動脈硬化指數的影響

彭張輝，胡發云，劉 君，劉萬平，官 念，王 益

缺血性腦卒中是常見的腦血管疾病，發病率逐年增加，癥狀主要表現為眩暈、肢體麻木、感覺障礙，若不及時治療會導致病人出現偏癱、失語等并發癥，嚴重影響病人的生活質量[1-2]。缺血性腦卒中是導致病人出現認知功能障礙的主要原因之一，其發病的分子機制復雜，目前尚不明確[3]。既往研究表明，絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)/細胞外調節蛋白激酶(ERK)信號通路與認知功能密切相關[4]。臨床上針對缺血性腦卒中的治療以改善微循環、抗血小板聚集、清除氧自由基等藥物治療為主。血管內支架介入治療可有效改善缺血性腦卒中病人的血管狹窄，然而術后病人有出現血管再次狹窄的可能[5]。脈血康膠囊的主要成分為水蛭素，可抑制血小板聚集[6]。目前，關于血管介入治療聯合脈血康膠囊應用于缺血性腦卒中病人的研究報道較少。本研究觀察血管介入治療聯合脈血康膠囊對缺血性腦卒中病人MAPK/ERK信號通路及血漿促動脈硬化指數(AIP)的影響，以期為臨床治療提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月—2019年10月廣安市人民醫院神經內科收治的72例缺血性腦卒中病人，按照隨機數字表法分為對照組和觀察組，每組36例。觀察組，男20例，女16例；年齡60～70(55.3±6.2)歲；梗死部位：基底節14例，腦干5例，小腦17例。對照組，男22例，女14例；年齡60～71(55.7±6.3)歲；梗死部位：基底節14例，腦干4例，小腦18例。兩組病人年齡、性別等一般資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究已獲得醫院倫理委員會的批準。

納入標準：①符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》[7]的臨床診斷標準；②發病在6 h內住院的病人；③經數字減影血管造影和腦動脈血管彩超確診為缺血性腦卒中；④簽署知情同意書者。排除標準：①對脈血康膠囊和造影劑過敏的病人；②梗死面積>80%的病人；③伴有嚴重心、肝、腎功能不全的病人；④惡性腫瘤及凝血功能異常的病人；⑤昏迷病人。

1.2 方法 兩組病人均接受血管介入治療，術前病人每天口服阿司匹林100 mg、氯吡格雷75 mg，術前6 h禁食，病人取仰臥位，鋪巾后予以局部麻醉。采用改良Seldilger技術進行股動脈穿刺、置鞘、全身肝素化。根據病人的全腦數字減影血管造影選擇合適的支架，血管狹窄遠端放置導管和腦保護裝置(EPD)，支架植入后回收EPD。手術結束后，密切監測病人的生命體征和神經系統功能。所有病人血管均順利實現再通。術后24 h內持續靜脈輸注普通肝素500 U/h，24 h后皮下注射低分子肝素鈣5 000 U，12 h1次，連續3 d。密切監測病人的凝血功能，術后病人繼續每天口服阿司匹林100 mg，氯吡格雷75 mg。觀察組在此基礎上加用脈血康膠囊(重慶多普泰制藥有限責任公司生產，國藥準字：Z10970056，規格：每粒0.25 g)治療，每次0.75 g，每日3次，口服，連續治療8周。

1.3 觀察指標

1.3.1 血清MAPK/ERK通路蛋白水平檢測 分別于治療前和治療8周后檢測兩組血清ERK和MAPK/ERK 激酶(MEK)蛋白水平。采集病人空腹肘靜脈血5 mL，保存在抗凝管中，3 000 r/min離心15 min后取其上清液，置于-80 ℃冰箱冷藏。使用蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測血清中ERK1-β、ERK2-β、MEK蛋白水平。

1.3.2 AIP和脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平檢測 在術前和術后8周采集病人空腹肘靜脈血5 mL，保存在抗凝管中，3 000 r/min離心15 min后取其上清液，置于-80 ℃冰箱冷藏。采用直接測定法檢測病人血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，采用酶學方法檢測病人血清三酰甘油(TG)，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)定量檢測病人血清Lp-PLA2水平。檢測儀器為AU5400全自動生化分析儀，所有試劑盒購自上海恒遠生物技術發展有限公司，操作步驟嚴格按照說明書進行。計算AIP，AIP=log(TG/HDL-C)。

1.3.3 后遺癥發生率 觀察兩組病人治療8周后后遺癥發生情況，后遺癥包括因缺血性腦卒中導致的偏癱、運動障礙、語言障礙、記憶力下降、認知減退等。

1.4 療效評定標準 采用美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)評估病人治療前后神經功能受損情況，分數越高，神經功能缺損越嚴重。根據《腦卒中病人臨床神經功能受損程度評分標準》評估病人的臨床療效。痊愈：NIHSS評分減少91%～100%；顯效：NIHSS評分減少46%～90%；有效：NIHSS評分減少18%～45%；無效：NIHSS評分減少<18%。

2 結 果

2.1 兩組臨床療效比較(見表1)

2.2 兩組血清MAPK/ERK通路蛋白水平比較 治療前，兩組MEK、ERK1-β、ERK2-β蛋白表達水平比較差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，兩組MEK、ERK1-β、ERK2-β蛋白表達水平均較治療前降低，且觀察組低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組血清 MAPK/ERK通路蛋白表達水平比較(±s)

2.3 兩組AIP和LP-PLA2水平比較 治療前，兩組AIP 和LP-PLA2表達水平比較差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，兩組AIP 和LP-PLA2水平均較治療前降低，且觀察組低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 兩組AIP和Lp-PLA2水平比較(±s)

2.4 兩組后遺癥發生情況比較 治療8周后，觀察組后遺癥發生率為19.44%(7/36)，對照組后遺癥發生率為13.89%(5/36)，兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)。詳見表4。

表4 兩組后遺癥發生情況比較

3 討 論

缺血性腦卒中是一種常見的腦血管疾病，致殘率和死亡率較高，近年來呈現出年輕化趨勢[8]。缺血性腦卒中可導致病人偏癱、認知功能障礙、感覺障礙，不及時治療可導致病人遺留嚴重的后遺癥，嚴重影響病人的生活質量[9-10]。臨床上多采用營養神經、抗血小板聚集等藥物治療，但部分病人治療效果一般。研究表明，血管介入治療可有效改善腦血管血流灌注，改善損傷局部微循環，創傷較小，療效確切，然而介入治療仍需預防血管再次狹窄[11]。脈血康膠囊為一種中成藥，具有活血化瘀、疏通經脈的功效，主要成分為水蛭凍干粉末、當歸、丹參等，主治中風、半身不遂。既往研究表明，脈血康膠囊的主要有效成分為水蛭素，是從水蛭中提取的抗凝蛋白質，可抑制血小板黏附和聚集[12]。脈血康膠囊中當歸有助于活血，而丹參可改善局部微循環。

本研究結果顯示，觀察組治療總有效率高于對照組(P<0.05)，兩組后遺癥發生率比較差異無統計學意義(P>0.05)。提示聯合治療可有效提高缺血性腦卒中臨床療效，同時不增加后遺癥發生率。分析其原因：常規的藥物保守治療缺血性腦卒中效果有限，介入治療可直接作用于狹窄的腦血管，用支架或者球囊將狹窄或者閉塞的血管撐開，恢復正常的血流灌注。部分病人在置入支架后可因血管的彈性回縮、血管內膜增生等原因而出現再次狹窄。脈血康膠囊可改善損傷的局部微循環，擴張血管，抑制血小板聚集，且血管介入治療聯合脈血康膠囊能夠產生協同作用。邊瑩等[13]研究證明，脈血康膠囊治療亞急性期腦梗死病人療效明顯，與本研究結果一致。

MAPK/ERK信號通路可協助細胞外信號向細胞內信號轉導。研究表明，MAPK/ERK信號通路與認知功能具有緊密的聯系，ERK相關蛋白激活物與大鼠的學習記憶和海馬神經細胞增殖相關[14]。本研究結果顯示，觀察組治療后MEK、ERK1-β、ERK2-β表達水平低于對照組(P<0.05)，Lp-PLA2、AIP也低于對照組(P<0.05)。可能原因是血管介入治療聯合脈血康膠囊治療后病人認知功能得到一定程度的恢復，使MAPK/ERK信號通路蛋白表達水平降低。LP-PLA2是一種炎性標志物，可促進血小板聚集及淋巴細胞黏附。脈血康膠囊可抑制血小板聚集及炎性因子的釋放，因此，病人的Lp-PLA2水平有所降低。血脂是反映缺血性腦疾病病情程度的重要指標。血脂紊亂可導致血液流速減慢、血小板聚集、血管狹窄、組織缺氧。AIP有助于分析病人的血脂水平。研究結果顯示，脈血康膠囊可減少纖維蛋白原活化，抑制血栓形成，從而降低病人的AIP。

綜上所述，血管介入治療聯合脈血康膠囊治療缺血性腦卒中病人，可降低MAPK/ERK信號通路蛋白表達水平，降低AIP和Lp-PLA2水平，提高臨床療效，且不增加后遺癥發生率。