血清AMH水平在腹腔鏡卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫剝除術(shù)后卵巢功能評(píng)估中的應(yīng)用研究

古文鑫，吳澤華△，陳結(jié)貞，湯炎芬，陳永雪

廣東省廣州市番禺區(qū)市橋醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.婦產(chǎn)科，廣東廣州 511400

子宮內(nèi)膜異位囊腫是育齡期女性常見疾病，病情呈浸潤(rùn)生長(zhǎng)特點(diǎn)，增加女性不孕率，影響女性身心健康[1]。臨床主要采用腹腔鏡下卵巢囊腫剝除術(shù)治療子宮內(nèi)膜異位囊腫，但因手術(shù)創(chuàng)傷、盆腔粘連等因素，可能會(huì)傷及卵巢，從而導(dǎo)致卵巢功能下降，甚至?xí)霈F(xiàn)卵巢早衰情況[2]。為進(jìn)一步明確手術(shù)應(yīng)用的意義，臨床提出可通過評(píng)估手術(shù)對(duì)卵巢儲(chǔ)備功能的影響，指導(dǎo)臨床治療，其中血清抗苗勒管激素(AMH)為最準(zhǔn)確、可信的評(píng)價(jià)指標(biāo)。AMH具有調(diào)節(jié)卵巢生長(zhǎng)發(fā)育的特點(diǎn)，可預(yù)測(cè)卵巢超促排卵反應(yīng)，評(píng)估卵巢儲(chǔ)備功能，對(duì)于保護(hù)女性健康具有重要意義[3]。本研究檢測(cè)腹腔鏡卵巢囊腫剝除術(shù)實(shí)施前后血清AMH水平，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年4月至2020年5月在本院行腹腔鏡卵巢囊腫剝除術(shù)的77例患者作為研究對(duì)象，其中單側(cè)囊腫(單側(cè)組)40例，雙側(cè)囊腫(雙側(cè)組)37例，年齡20～48歲，平均(42.52±5.12)歲，體質(zhì)量指數(shù)(BMI)18.6～25.9 kg/m2，平均囊腫最大徑(5.05±2.25)cm。納入標(biāo)準(zhǔn)：18～45歲女性；月經(jīng)周期規(guī)律，術(shù)前檢查無其他并發(fā)癥；無婦產(chǎn)科手術(shù)史，無流產(chǎn)史。排除標(biāo)準(zhǔn)：多囊卵巢綜合征；卵巢惡性腫瘤；存在卵巢早衰征象；BMI>30 kg/m2；無其他內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，如先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥、甲狀腺功能障礙、泌乳素血癥或腎上腺腫瘤。另選取同期到本院健康體檢的70例女性作為對(duì)照組，年齡21～48歲，平均(42.32±5.08)歲，BMI為18.8～25.8 kg/m2。健康體檢者基礎(chǔ)資料完整，近期未接受激素類治療，檢測(cè)血尿常規(guī)，肝、腎功能正常，排除全身疾病或內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病、多囊卵巢綜合征、卵巢顆粒細(xì)胞瘤及其他惡性腫瘤。

1.2方法

1.2.1術(shù)前檢查及術(shù)后處理 術(shù)前組織所有研究對(duì)象接受檢查，檢查項(xiàng)目：婦科常規(guī)檢查、B超、糖類抗原(CA)125，同時(shí)檢查評(píng)估卵巢囊腫大小、盆腔粘連狀況，實(shí)施全身麻醉，給予患者腹腔鏡卵巢囊腫剝除術(shù)，于術(shù)野下清除病灶，術(shù)后生理鹽水沖洗盆腔。

1.2.2標(biāo)本采集 分別于術(shù)前，術(shù)后1、3、6個(gè)月在月經(jīng)周期第2～3 天取患者空腹?fàn)顟B(tài)下肘靜脈血用于AMH水平檢測(cè)(采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))。于患者早卵泡期取靜脈血5 mL，于室溫22～28 ℃保存，保持血液自然凝固0.5 h，經(jīng)離心機(jī)離心處理，轉(zhuǎn)速設(shè)置為1 000～1 200 r/min，持續(xù)5～10 min；然后取出血清標(biāo)本，儲(chǔ)存在2～8 ℃低溫環(huán)境中，8 h內(nèi)送檢，若檢測(cè)時(shí)間>24 h，需將其保存在-20 ℃冰箱，且注意不能反復(fù)多次凍溶。

1.2.3檢測(cè)方法 采用AMH試劑盒進(jìn)行AMH水平檢測(cè)，準(zhǔn)備洗液、微孔、AMH校準(zhǔn)品、試劑、標(biāo)本常溫條件下取樣，輕輕搖晃混勻，標(biāo)記板條，并將質(zhì)控品、校準(zhǔn)品、標(biāo)本25 μL加入對(duì)應(yīng)孔中，之后加入AMH反應(yīng)緩沖液100 μL，輕輕搖晃后室溫環(huán)境下孵育1.5 h，孵育1.0 h后，稀釋洗液，孵育結(jié)束后沖洗板面，加入100 μL酶聯(lián)合物溶液孵育，完成后沖洗，之后加入顯色液進(jìn)行孵育，終止液結(jié)束反應(yīng)，并檢測(cè)吸光度。同時(shí)采用放射性免疫法檢測(cè)血清卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)及血清雌二醇(E2)水平。

2 結(jié) 果

2.1單側(cè)組和雙側(cè)組患者術(shù)前與對(duì)照組AMH、FSH、LH、E2水平比較 單側(cè)組和雙側(cè)組患者術(shù)前與對(duì)照組AMH、FSH、LH、E2水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 單側(cè)組和雙側(cè)組患者術(shù)前與對(duì)照組AMH、FSH、LH、E2水平比較

2.2單側(cè)組和雙側(cè)組患者術(shù)前和術(shù)后AMH、FSH、LH、E2水平比較 單側(cè)組患者術(shù)后AMH、E2、LH水平均低于術(shù)前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但術(shù)前和術(shù)后FSH水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；雙側(cè)組患者術(shù)前和術(shù)后AMH、FSH、LH、E2水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 單側(cè)組和雙側(cè)組患者術(shù)前和術(shù)后AMH、FSH、LH、E2水平比較

2.3不同臨床特征患者術(shù)后AMH水平比較 年齡≤35歲、術(shù)后妊娠成功患者AMH水平均高于年齡>35歲、術(shù)后妊娠失敗患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；但不同囊腫最大徑、不同囊腫類型患者AMH水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 不同臨床特征患者術(shù)后AMH水平比較

3 討 論

子宮內(nèi)膜異位囊腫是因子宮內(nèi)膜異位而導(dǎo)致卵巢深處經(jīng)血潴留而導(dǎo)致的囊腫，因囊腫壁破裂或卵巢子宮內(nèi)膜異位病灶出血而導(dǎo)致局部炎性反應(yīng)惡化加劇，病灶與卵巢周邊組織粘連，導(dǎo)致月經(jīng)紊亂、痛經(jīng)，甚至不孕[4-5]。臨床治療卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫時(shí)，主要采用藥物治療、手術(shù)治療，手術(shù)應(yīng)用率最高。腹腔鏡下卵巢囊腫剝除術(shù)是一種更為高效的手術(shù)方法，但醫(yī)療器械會(huì)傷及卵巢，隨著時(shí)間的推移，雖然卵巢功能可以逐漸恢復(fù)，但不能恢復(fù)到術(shù)前水平，敏感的指標(biāo)對(duì)于指導(dǎo)臨床評(píng)價(jià)卵巢功能具有積極意義[6-8]。

臨床上一般采用FSH、E2、抑制素B評(píng)價(jià)卵巢功能，E2與抑制素B是在FSH刺激下由卵泡分泌的，且經(jīng)性腺軸反饋抑制FSH分泌，卵泡池耗竭會(huì)導(dǎo)致血清抑制素B與E2水平下降，F(xiàn)SH水平升高，這3項(xiàng)指標(biāo)相互依賴，但出現(xiàn)變化時(shí)間晚，靈敏度不強(qiáng)，不能用于評(píng)估卵巢儲(chǔ)備功能的變化，而且受觀察者主觀性影響，不能準(zhǔn)確反映真實(shí)情況，存在局限性[9-11]。但AMH水平在健康女性血液中水平保持相對(duì)穩(wěn)定，且不受外界因素的影響，與年齡、抑制素B、FSH比較，AMH評(píng)估卵巢儲(chǔ)備功能靈敏度更高。

AMH為苗勒管抑制劑，為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β超家族的一名成員，主要由小的竇卵泡上顆粒細(xì)胞與卵巢竇前卵泡產(chǎn)生，而在相對(duì)較大竇狀卵泡顆粒細(xì)胞中水平相對(duì)較低[12]。AMH作為特殊生長(zhǎng)因子，主要參與卵泡生產(chǎn)周期調(diào)節(jié)，對(duì)身體內(nèi)的始基卵泡數(shù)量具有良好的調(diào)控作用，可直接間接性影響卵巢發(fā)育，控制卵泡發(fā)育速度，若AMH水平較高，則表明該因子指標(biāo)具有促卵泡生長(zhǎng)的作用[13-14]。當(dāng)前，臨床主要將AMH用于評(píng)估卵巢功能與卵巢相關(guān)疾病的輔助診斷。

本研究單側(cè)組患者術(shù)后AMH、E2、LH水平均低于術(shù)前，這表明腹腔鏡下卵巢囊腫剝除術(shù)會(huì)影響AMH、E2、LH水平，降低卵巢儲(chǔ)備功能。分析其原因是囊腫因受黏附、侵襲等病理特征的影響而傷及卵巢皮質(zhì)，導(dǎo)致竇前卵泡水平下降，再加上手術(shù)操作中醫(yī)療器械損傷，導(dǎo)致卵巢組織丟失，進(jìn)而導(dǎo)致卵泡丟失，影響卵巢儲(chǔ)備功能，甚至可能會(huì)影響患者的生殖功能[15-16]。單側(cè)組和雙側(cè)組患者術(shù)前和術(shù)后血清FSH水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，這表明FSH作為間接評(píng)估卵巢儲(chǔ)備功能的指標(biāo)具有一定的局限性。本研究結(jié)果顯示，雙側(cè)組患者術(shù)后AMH、FSH、LH、E2水平與術(shù)前比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，分析原因可能是因?yàn)檠芯繕颖玖枯^小。

本研究發(fā)現(xiàn)，年齡≤35歲、術(shù)后妊娠成功患者AMH水平高于年齡>35歲、術(shù)后妊娠失敗患者，由此表明，隨著年齡的增長(zhǎng)，患者卵巢功能恢復(fù)越慢，而且AMH恢復(fù)情況與妊娠情況密切相關(guān)，恢復(fù)良好者術(shù)后妊娠成功率相對(duì)較高。基于此，臨床可根據(jù)此項(xiàng)研究結(jié)果用于診斷評(píng)估術(shù)后卵巢的儲(chǔ)備功能，為后期臨床診療提供指導(dǎo)依據(jù)。

綜上所述，腹腔鏡下卵巢囊腫剝除術(shù)會(huì)在一定程度上影響患者的卵巢儲(chǔ)備功能，臨床可通過檢測(cè)AMH水平評(píng)估卵巢的功能變化情況，早期診斷卵巢功能異常，為后期臨床采取干預(yù)措施促卵巢儲(chǔ)備功能恢復(fù)具有重要指導(dǎo)意義，而且AMH檢測(cè)簡(jiǎn)單方便、準(zhǔn)確可靠，具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。