自身抗體及肝功能檢測(cè)在自身免疫性肝病與病毒性肝炎鑒別診斷中的價(jià)值

李 劇 花艷艷 韓亞男

（大連市公共衛(wèi)生臨床中心(大連市第六人民醫(yī)院)，遼寧 大連 116031）

肝臟是人體中的重要器官，以代謝功能為主[1]。在人體中，肝臟能夠?qū)Ω翁沁M(jìn)行儲(chǔ)存，起到氧化等多種作用，并且能夠?qū)⑷梭w內(nèi)、外的非營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，包括藥物、毒物以及體內(nèi)的不同代謝物質(zhì)，并通過新陳代謝的方式徹底分解非營養(yǎng)物質(zhì)，將其排出。肝臟在人體器官中較為脆弱，致病率較高，因此需要良好的肝臟保護(hù)[2]。通常正常肝臟的脂肪含量低，患者自身免疫力處于正常狀態(tài)下，其肝功能呈良好狀態(tài)[3]。而免疫性肝病主要是由于免疫力出現(xiàn)異常情況后，肝臟成為免疫攻擊的靶器官，對(duì)肝細(xì)胞造成損傷[4]。自身免疫性肝病是一種慢性進(jìn)展性的炎癥類疾病，以自身免疫反應(yīng)為介導(dǎo)。臨床上主要的疾病類型有自身免疫性肝炎，原發(fā)性膽汁性肝硬化，原發(fā)性硬化性膽管炎以及這三類疾病其中二者同時(shí)發(fā)病狀態(tài)下出現(xiàn)的重疊綜合征。按照其臨床發(fā)病率進(jìn)行排序，自身免疫性肝炎的發(fā)病率最高。目前臨床上已經(jīng)有大量的數(shù)據(jù)和臨床研究可以證實(shí)，自身免疫性肝病的疾病發(fā)展經(jīng)常是與抗體發(fā)展相伴隨的，但是這些自身抗體的致病機(jī)制卻并未明確。而國內(nèi)外大多數(shù)理論性研究的方向都集中在疾病的診斷和鑒別上，對(duì)于其治療過程中的發(fā)展情況研究甚少。自身免疫性肝病通常需通過抗原激活，病毒通常指HCV、HBV、EB病毒以及麻疹病毒，其也會(huì)引起相應(yīng)的免疫反應(yīng)，物理、生物、化學(xué)等因素也會(huì)引發(fā)自身的抗原改變[5]。病毒性肝炎是由于人體的肝臟部位受到病毒的感染進(jìn)而導(dǎo)致肝細(xì)胞受損引起的肝功能的異常。部分患者疾病會(huì)呈現(xiàn)慢性化的發(fā)展趨勢(shì)，最后可能會(huì)發(fā)展成為肝硬化，極少數(shù)患者也有可能會(huì)發(fā)展成為肝癌。據(jù)相關(guān)調(diào)查顯示，我國屬于乙型肝炎大國，因?yàn)樽陨砻庖咝约膊≡诎l(fā)病初期通常和病毒性肝炎癥狀有著較高的相似性，無法有效確診。但是自身免疫性肝病與病毒性肝炎的治療方法并不一致，基于此原因，對(duì)自身免疫性的肝病特異性進(jìn)行準(zhǔn)確且及時(shí)的監(jiān)測(cè)，對(duì)自身抗體的診斷及治療有著至關(guān)重要的作用。目前，臨床上對(duì)自身免疫性肝病的診斷方法有很多，間接免疫熒光法、化學(xué)發(fā)光法、免疫印記條帶法都是較常使用的檢測(cè)方法。主要對(duì)患者的血清自身抗體以及肝功能進(jìn)行檢測(cè)，因此，本次研究中選擇時(shí)間為2018年6月至2019年6月，我院收治的48例自身免疫性肝病患者作為研究對(duì)象，在自身免疫肝病與病毒性肝炎鑒別診斷中，探究自身抗體及肝功能檢測(cè)的診斷價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇醫(yī)院在2018年6月至2019年6月收治的48例自身免疫性肝病（AILD）患者為A組，其中自身免疫性肝炎（AIH）11例、原發(fā)性膽汁膽管炎（PBC）32例、原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）5例。48例病毒性肝炎患者為B組，其中慢性乙型肝炎（CHB）34例、慢性丙型肝炎（CHC）14例。診斷標(biāo)準(zhǔn)：自身免疫性肝炎符合2010年美國肝病學(xué)會(huì)制定的《自身免疫性肝炎診治指南要點(diǎn)》[6]；原發(fā)性膽汁膽管炎符合2009年美國肝病學(xué)會(huì)制定的PBC相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7-8]；原發(fā)性硬化性膽管炎經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果與膽管造影結(jié)果綜合確診；慢性乙型肝炎符合《乙型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)》[9]；慢性丙型肝炎符合《WS213-2018丙型肝炎診斷》[10]。納入標(biāo)準(zhǔn)：①本研究內(nèi)所有A組患者均符合自身免疫性肝病的基本診斷標(biāo)準(zhǔn)。②A組所有患者同時(shí)伴隨有血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移同工酶和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的異常升高情況。③本研究內(nèi)所有B組患者均符合臨床病毒性肝炎的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。④B組患者均伴隨有不同程度的食欲減退、惡心、上腹不適以及肝區(qū)疼痛的情況。⑤臨床資料完整，均知曉本次研究。⑥通過倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。⑦本研究內(nèi)A組和B組患者均不存在嚴(yán)重的智力障礙和精神障礙。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他系統(tǒng)性疾病。②因其他原因造成的慢性肝損害，如新陳代謝異常性肝病、藥物性酒精性肝損害、遺傳代謝性肝病或肝內(nèi)占位性病變。③研究中途退出本次研究的患者。其中，A組患者男25例，女23例，年齡在29～70歲，平均年齡為（49.50±20.50）歲；B組患者男27例，女21例，年齡在30～69歲，平均年齡為（49.50±19.50）歲。兩組患者的相關(guān)資料對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可比較。

1.2 方法 兩組患者的自身抗體均通過間接免疫熒光法以及化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)。其中，間接免疫熒光法通常用于檢測(cè)抗核抗體（ANA），抗體的滴度超過1∶100時(shí)，呈現(xiàn)陽性。可溶性酸性磷酸化核蛋白SP100抗體（SP100）、抗可溶性肝抗原抗體（SLA）、抗肝腎微粒體抗體1型（LKM-1）、血清抗核胞膜糖蛋白210抗體（GP210）、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1型抗體（LC-1）、抗線粒體抗體M2型（AMA-M2）則通過北京貝爾生物工程股份有限公司的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀Savi-180進(jìn)行檢測(cè)。肝功能指標(biāo)的檢測(cè)：抽取5 mL空腹靜脈血，經(jīng)離心處理后，通過型號(hào)為德國 SIEMENS 2400的全自動(dòng)生化儀對(duì)患者的肝功能指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，包括天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、免疫球蛋白G（IgG）等。試劑來源：乙型肝炎病毒標(biāo)志物購自雅培生物技術(shù)有限公司；肝病相關(guān)抗原基質(zhì)、試劑以及相關(guān)抗體由歐蒙德國醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用（±s）表示，組間比較行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)；P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者自身抗體陽性檢出率比較 A、B組的LKM-1與LC-1的檢查率對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），A組患者的SP100、GP210、AMA-M2、SLA、ANA均比B組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者自身抗體陽性檢出率比較[n（%）]

2.2 兩組患者肝功能有關(guān)指標(biāo)比較 A組患者的AST、ALT、ALP、GGT、IgG肝功能水平均比B組高（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組患者肝功能指標(biāo)比較（±s）

表2 兩組患者肝功能指標(biāo)比較（±s）

2.3 兩組患者ANA熒光核型占比比較 A、B組熒光核型中均質(zhì)型、顆粒型占比對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；A組ANA熒光核型主要以均質(zhì)型、核仁型為主，B組則以顆粒型為主。見表3。

表3 兩組患者ANA熒光核型占比比較[n（%）]

3 討 論

根據(jù)相關(guān)報(bào)道顯示，我國近些年肝臟疾病的發(fā)病率不斷增加，上升趨勢(shì)較為嚴(yán)重，這主要和我國廣大人民群眾的日常生活方式有著必然的聯(lián)系[11-12]。病毒性肝炎疾病主要是因?yàn)楦窝准膊∷斐傻囊环N傳染性疾病，此疾病的臨床癥狀體現(xiàn)在患者出現(xiàn)乏力、食欲缺乏、肝功能異常等多種癥狀上，如果不及時(shí)進(jìn)行治療，部分患者會(huì)由于多種因素逐漸形成重癥肝炎[13-14]。重癥肝炎具有十分兇險(xiǎn)的病情，對(duì)患者的身體健康造成嚴(yán)重的不利影響，具有極高的病死率，主要是因?yàn)楦位杳浴⒏喂δ芩ソ叩劝Y狀發(fā)生。自身免疫性肝病通常是將肝臟作為特異性的免疫病理而造成器官損傷的自身免疫性的疾病[15-16]。在具體診斷過程中，此疾病主要是按照患者日常生活異常、自身抗體和肝組織特征進(jìn)行。病毒性肝炎的主要治療類藥物為干擾素，誤診會(huì)嚴(yán)重影響患者的生命安全，嚴(yán)重耽誤藥物的治療療效，當(dāng)前我國的病毒性肝炎診斷水平有了顯著的提升，國內(nèi)、國外與自身免疫性肝病患病率的相關(guān)報(bào)道也逐漸呈上升趨勢(shì)，并受到廣泛的關(guān)注與重視。

自身免疫性疾病是患者自身機(jī)體對(duì)其抗原所表現(xiàn)出來的免疫反應(yīng)，并會(huì)對(duì)自身的相關(guān)組織造成嚴(yán)重的損害[17-18]。總結(jié)來看就是人體機(jī)體對(duì)自身抗原引起免疫反應(yīng)導(dǎo)致的一種疾病，屬于自身免疫性肝疾病。當(dāng)機(jī)體自身免疫對(duì)肝臟進(jìn)行侵犯后會(huì)出現(xiàn)炎性反應(yīng)，通常會(huì)導(dǎo)致肝細(xì)胞以及膽管壞死等，則為自身免疫性肝病[19-20]。原發(fā)性膽汁性肝硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、自身免疫性肝炎等都是較常出現(xiàn)的類型。自身免疫性肝病在確診之后，根據(jù)患者的患病類型進(jìn)行區(qū)分，自身免疫性肝炎患者通常使用免疫抑制和硫銼嘌呤激素療法進(jìn)行治療，原發(fā)性膽汁性肝硬化患者通常采用熊去氧膽酸進(jìn)行治療。原發(fā)性硬化性膽管炎通常可使用糖皮質(zhì)激素或抗生素進(jìn)行治療。但是，目前仍然未確定自身免疫性肝病的主要發(fā)病機(jī)制[21-22]。作為自身免疫性肝病，很多的患者在臨床上不會(huì)表現(xiàn)出明顯的特異性，多數(shù)的患者僅能診斷出肝功能的異常，因此自身免疫性肝病經(jīng)常會(huì)被誤診為病毒性肝炎。根據(jù)相關(guān)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，此疾病和其他疾病之間確實(shí)存在一定的必然聯(lián)系，其中就包括病毒性肝炎[23-24]。機(jī)體由于病毒的產(chǎn)生而出現(xiàn)感染，通過這一現(xiàn)象導(dǎo)致自身抗原的修飾，同時(shí)引起相應(yīng)的免疫反應(yīng)，對(duì)自身免疫系統(tǒng)造成破壞，加之該疾病的最初臨床表現(xiàn)通常與病毒性肝炎具有較強(qiáng)的相似性，這就會(huì)造成誤診[25]。但是治療自身免疫性肝病的方法是通過使用激素類免疫抑制劑進(jìn)行治療，而病毒性肝炎的治療方法則截然不同，是選擇使用干擾素進(jìn)行治療。不論基于何種原因，對(duì)自身免疫性肝病特異性進(jìn)行準(zhǔn)確且及時(shí)的檢測(cè)，對(duì)自身抗體的診斷有著至關(guān)重要的作用[26]。自身抗體主要是人體自身組織中的各個(gè)細(xì)胞，包括器官的抗體、細(xì)胞與細(xì)胞成分。人體血液在處于正常情況下存在滴度較低的自身抗體，當(dāng)自身抗體滴度超過某水平，會(huì)嚴(yán)重影響人體的健康，使人體出現(xiàn)損傷，從而引發(fā)多種疾病。針對(duì)慢性肝病的不同類型，各個(gè)特征具有一定的相似性，也就是說，在血清中，和肝臟疾病有相關(guān)的免疫抗體。通常在不同的免疫性疾病中自身抗體以及ANA、ANA不會(huì)出現(xiàn)程度不同的陽性檢出率。

本研究結(jié)果顯示，A、B組的LKM-1與LC-1的檢查率對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），A組患者的SP100、GP210、AMA-M2、SLA、ANA、肝功能水平均比B組高（P＜0.05）。即ANA處于自身免疫性的肝病中，其陽性檢出率更高，可用于對(duì)病毒性肝炎以及自身免疫性肝病的鑒別與診斷中。另外，肝病的自身抗體SLA、SP100、AMA-M2、SLA均屬于對(duì)病毒性肝炎以及自身免疫性肝病進(jìn)行鑒別的指標(biāo)。本次研究中，LKM-1與LC-1的陽性檢出率均為0，表示LKM-1與LC-1無法對(duì)病毒性肝炎以及免疫性肝病進(jìn)行有效的鑒別。除此之外，A組的肝功能相關(guān)指標(biāo)均比B組高，表明肝功能能夠作為對(duì)病毒性肝炎及免疫性肝病進(jìn)行輔助鑒別診斷的依據(jù)。本次研究結(jié)果與王憲紅和高志峰[24]的研究結(jié)果一致，說明免疫性肝病的ANA、AMA-M2、SLA均高于病毒性肝炎。

自身免疫性肝病核型在臨床上的分類較多，常見的類型有均質(zhì)型、核膜型、顆粒型、著絲點(diǎn)型與核仁型等[25]。自身免疫性肝病核型在自身免疫性肝炎與病毒性肝炎疾病中具有明顯的差異[26]。病毒性肝炎患者的抗體主要以顆粒性為主，其次是均質(zhì)型。而自身免疫性肝病患者的抗體主要以均質(zhì)型為主，其次是核仁型。并且考慮到自身免疫性肝疾病本身是以肝臟為靶向器官的自身免疫性疾病，因此疾病出現(xiàn)后患者的部分生化指標(biāo)會(huì)出現(xiàn)異常的情況，臨床上可以通過對(duì)患者指標(biāo)的進(jìn)一步檢查來準(zhǔn)確辨別疾病類型，并配合抗體類型的判別完成區(qū)分。當(dāng)前臨床上針對(duì)肝病患者進(jìn)行抗體檢驗(yàn)已經(jīng)成為了自身免疫性肝病的初篩實(shí)驗(yàn)，通過對(duì)抗體的集中檢測(cè)，能夠大大提升自身免疫性肝病的診斷準(zhǔn)確率。

本研究通過對(duì)比A、B兩組ANA熒光核型中均質(zhì)型、顆粒型占比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；且A組的ANA熒光核型中，均質(zhì)型與核仁型占比較多，而B組則主要以顆粒型為主。這一結(jié)果提示，通過ANA熒光核型特征能夠有效鑒別與診斷自身免疫性肝炎與病毒性肝炎，自身免疫性肝病患者在ANA熒光核型中均質(zhì)性和核仁型較多，這符合自身變異性肝病患者的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，而病毒性肝病患者的顆粒型較多，兩組數(shù)據(jù)對(duì)比明顯，在臨床上具有一定的指導(dǎo)意義。本次研究中研究對(duì)象均為住院患者，存在一定局限性，對(duì)研究結(jié)果可能存在一定影響，受到樣本例數(shù)和試驗(yàn)場地的影響，本次的研究成果并不能作為最終結(jié)論進(jìn)行處理，且本次研究為回顧性分析，臨床資料收集具有局限性，且并未對(duì)自身患者治療后自身抗體、肝功能檢測(cè)進(jìn)行深入分析，將來仍需樣本數(shù)量更大，研究時(shí)間、隨訪時(shí)間更廣的研究進(jìn)一步證實(shí)。目前臨床上對(duì)病毒性肝炎和免疫性肝病患者的鑒別和診斷研究并不是個(gè)例，但是從抗體以及患者的肝功能指標(biāo)入手進(jìn)行鑒別的相關(guān)研究數(shù)據(jù)仍然不多，相信未來伴隨著臨床診斷水平的不斷提升，免疫性肝炎與病毒性肝炎的誤診情況會(huì)不斷地下降，其診斷指標(biāo)會(huì)更加細(xì)化，診斷相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)也更為細(xì)致。

綜上所述，自身抗體以及肝功能指標(biāo)的檢測(cè)在病毒性肝炎、免疫性肝病的鑒別及診斷中有著重要的意義。