義烏孕婦外周血未成熟粒細胞生物參考區間的建立

駱婷婷(通信作者) 方海俊 陳如昌 丁愛娟 張立晶

322000義烏市中心醫院檢驗科1，浙江義烏

322000義烏市中心醫院婦產科2，浙江義烏

綜合應用電學和光(化)學原理進行檢測的全自動血液分析儀，是臨床檢驗最常用的篩檢儀器之一。隨著科技的進步，全自動血液分析儀不再局限于傳統的白細胞三分類和五分類，部分型號的血液分析儀擁有更多的細胞計數和分類的擴展功能，能檢測包括未成熟粒細胞(IG)在內的參數。孕婦因妊娠而導致一系列生理性變化，為了更好地了解IG 在健康孕婦外周血中的情況，建立孕婦外周血未成熟粒細胞生物參考區間，以便臨床醫生能更準確的診斷和治療。

資料與方法

選取2020年8月-2021年4月在義烏市中心醫院門診常規孕檢的孕婦，按照《婦產科學》第7版孕期分類標準，分為早孕(≤12周)、中孕(13～27周)和晚孕(≥28周)3組。同時隨機選取同期體檢中心健康育齡期女性作為健康女性對照組。選取健康對照組120 例，年齡18～45 歲，平均(28±7)歲；早孕組120 例，年齡18～38 歲，平均(28±5)歲；中孕組120 例，年齡18～41歲，平均(27±5)歲；晚孕組211例，年齡20～45 歲，平均(29±4)歲。各組患者一般資料比較，差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審批。

納入標準：①單胎妊娠；②生命體征平穩；③1個月內無感染性疾病；④采集標本前未劇烈運動、未處于興奮狀態。

排除標準：①多胎妊娠者；②尿常規沉渣定量檢測細菌＞4000 個/μL；③存在嚴重肝、腎疾病者；④存在免疫性疾病者；⑤存在惡性腫瘤疾病。

方法：采集靜脈血3 mL 于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝的試管中，使用深圳Mindary 6900 全自動血細胞分析儀及配套試劑進行檢測，山東卓越生物技術股份有限公司的兩水平血細胞分析用質控物，當日結果均在控。整個檢測過程1 h 內完成，記錄IG＃(絕對值)和IG%(百分比)。

觀察指標：①比較健康對照組和不同孕周組外周血IG＃中位數M(P25-P75)；②比較健康對照組和不同孕周組外周血IG%中位數M(P25-P75)。

統計學處理：采用SPSS 23.0 軟件進行統計學分析。首先采用Kolmogorov-Smirnov 檢驗對IG 檢測結果進行正態性檢驗，IG 數據為偏態分布資料，以中位數及百分位數〔M(P25-P75)〕表示。在臨床應用中，IG 結果以過高為異常，本研究制定其單側參考區間，計算第95 百分位數值(P95)。不同孕期組之間IG 的比較采用Kruskal-Wallis 秩和檢驗(H 檢驗)，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

結果

健康對照組和不同孕周組外周血IG＃中位數M(P25-P75)比較：健康對照組、早孕組、中孕組和晚孕組外周血IG＃總體分布比較，差異有統計學意義(H=287.27，P＜0.05)，除中孕組和晚孕組IG＃總體分布比較差異無統計學意義(P＞0.05)外，其余各兩組間比較，差異均有統計學意義(P＜0.05)。女性健康對照組外周血IG＃生物參考區間：0×109/L～0.01×109/L；早孕組外周血IG＃生物參考區間：0×109/L～0.03×109/L；中晚孕組外周血IG＃生物參考區間：0×109/L～0.24×109/L。見表1。

表1 健康對照組和不同孕周組外周血IG＃中位數M(P25-P75)5比較(×109/L)

健康對照組和不同孕周組外周血IG%中位數M(P25-P75)比較：健康對照組、早孕組、中孕組和晚孕組外周血IG%總體分布比較，差異有統計學意義(H=289.69，P＜0.05)，除中孕組和晚孕組IG%總體分布比較，差異無統計學意義(P＞0.05)外，其余各兩組間比較，差異均有統計學意義(P＜0.05)。女性健康對照組外周血IG%生物參考區間：0～0.2%；早孕組外周血IG%生物參考區間：0～0.3%；中晚孕組外周血IG%生物參考區間：0～2.6%。見表2。

表2 健康對照組和不同孕周組外周血IG%中位數(P25-P75)比較(%)

討論

目前，被批準用于臨床的血液分析儀檢測參數，如白細胞計數和分類、紅細胞計數、血紅蛋白測定、血小板計數、網織紅細胞計數等，其臨床意義已經明確。隨著血液分析儀檢測原理和技術的發展，新近開發的多種檢測參數，經受臨床實踐的驗證，未成熟粒細胞就是新研究參數的一種。邁瑞血液分析儀采用核酸熒光染色和導體激光流式細胞分析相結合的方法，根據細胞內核酸含量的高低來檢測未成熟粒細胞。IG主要包括桿狀核粒細胞、早幼粒細胞、中幼粒細胞和晚幼粒細胞，但不包括原始細胞，有助于篩檢和監測炎癥、類白血病反應、組織壞死、腫瘤、骨髓異常增生性疾病等，有較多的臨床應用價值。

“健康人群”的解剖、生理、生化等各種數據不僅因人而異，而且同一個人還會因為身體內外環境的改變而改變，因而要確定波動區間，即參考區間。參考區間是表示兩個參考限之間的距離，即參考范圍。參考范圍用途廣泛，主要在流行病學調查中用于研究與性別、年齡、職業、習慣、遺傳、種族、地理位置等因素有關疾病的病因學和發病機制；鑒定商品新儀器與成套試劑，將其測定值與已制定的參考區間比較；用于室內質控和室間質評，在確定醫學決定水平時進行參考。在確定參考區間時通常需要考慮地區、民族、性別、年齡、勞動條件、遺傳、時間(季節與晝夜)、月經、妊娠、飲食、藥物和生活習慣等因素帶來的差異。已有較多的學者對健康兒童和健康成人外周血IG 進行了研究。Wiland EL 等[1]研究得出美國俄亥俄州新生兒出生后前48 h IG%的參考區間為0～8.4%；Roehrl MH 等[2]研究得出美國馬薩諸塞州波士頓人群中外周血IG 與年齡有關，但與性別無關，并建議門診IG%的參考區間上限為0.30(≤10 歲)和0.90(＞10 歲)。馬科等[3]研究得出河北省健康成人外周血IG#的參考區間為0.00×109/L～0.06×109/L，IG%的參考區間為0.0～0.8%，與性別和年齡無關。各地區健康人群外周血中IG 的參考區間略有不同。IG 的生物參考區間因年齡、性別、地域而有所差異。

由于胚胎、胎兒生長發育的需要，在胎盤產生的激素參與、神經內分泌的影響下，孕婦體內各系統發生一系列適應性的解剖和生理變化，部分參數的生物參考區間區別于非妊娠人群[4-6]。柳國洪[7]等研究顯示正常妊娠組各孕周紅細胞計數、血紅蛋白、紅細胞壓積均明顯低于非孕對照組，正常妊娠組血小板水平在整個孕期中為緩慢下降，平均血小板體積逐漸上升。彭傳梅[8]等研究顯示云南昆明地區不同孕周健康孕婦D-二聚體生物參考區間高于健康非妊娠女性。Fernandez Suarez A 等[9]研究說明當在IMI(幼稚細胞)通道上發現報警時，82%孕婦處于妊娠晚期。馬芬等[10]學者研究顯示，孕婦IG 檢出率明顯高于其他正常人群，孕婦在整個孕期外周血IG 檢出率升高，尤其是在懷孕中、后期。綜上所述，了解孕婦外周血中IG情況，有助于做好孕期保健工作，有利于優生優育。

本次研究采用了公認的孕期分組方法，對入選人群進行了合理的納入和排除，每組樣本量符合CLSI(臨床實驗室標準化協會)C28-A3文件中的要求。從研究的結果中可以得出健康孕婦外周血IG 高于未妊娠健康女性，健康對照組＜早孕組＜中晚孕組。女性健康對照組外周血IG＃生物參考區間：(0～0.01)×109/L，IG%生物參考區間：0～0.2%，與馬科等[3]研究的成人外周血IG＃的正常參考值為(0～0.06)×109/L，IG%的正常參考值為0～0.8%有較大差異，可能是與筆者研究中使用的血液分析儀廠家和試劑廠家、研究樣本量的大小、研究人群所處的區域、飲食結構等有關。本次研究早孕組IG＃參考區間：(0～0.03)×109/L，IG%參考區間：0～0.3%；中晚孕組IG＃參考區間：(0～0.24)×109/L，IG%參考區間：0～2.6%，得出生物參考區間的研究結果和結論與王彥平等[11]學者研究的早中晚孕不同孕期IG 計數和百分比的生物參考區間結果相近。

本次研究建立了本地區孕婦外周血IG 計數和IG 百分比的生物參考區間，可為臨床醫生對孕婦的診斷和治療提供參考依據，幫助臨床區分健康妊娠或合并感染性疾病或合并血液系統疾病，減少漏診和誤診。