液質聯用技術在改善睡眠類非法添加檢驗工作中的應用

王曄

關鍵詞：液質聯用 ? 非法添加 ?改善睡眠類保健品

【中圖分類號】 R338.63 【文獻標識碼】 A ? ? ? 【文章編號】2107-2306（2022）06--02

Key words： UPLC-MS-MS ?Illegally added drugs ?Improving sleep health foods

隨著我國保健食品醫藥經濟在內的健康產業的快速發展，滿足了人們追求高質量生活的需求，但同時也帶來了一系列的食品安全問題[1]。諸如保健食品中非法添加化學成分的造假行為以達到短期內收到立竿見影的效果，從而迅速占領市場收獲了經濟效益，卻損害了人民群眾的身心健康，嚴重的甚至威脅生命。為了有效打擊這些非法添加行為，液質聯用技術的引入，先準確定性，排除假陽性的可能，如樣品中確定含有非法添加的化學成分再逐一定量計算，為食藥監管部門的嚴格監管提供了有力保障[2，3]。

改善睡眠類保健食品以其獨特的效果和較小的副作用為廣大失眠患者接受，可是一些不法分子在改善睡眠類保健食品中非法添加鎮靜催眠類化學藥物，以達到快速治療失眠的效果，從而吸引患者購買，但是此類化學藥物會造成嚴重的不良反應，甚至會造成自殺性傾向，由于具有耐藥性和依賴性，大多列為國家二類精神藥品。本文主要建立了比較常見添加的10種苯并二氮雜卓類鎮靜催眠類化學藥物液質聯用檢測方法[4]。

1 材料與方法

1.1材料與儀器

對照品采購均來源于SIGMA公司，樣品從市場購買改善睡眠類保健品，乙腈及甲酸均為色譜純，水為經Millipore超純水器凈化而得的超純水。Waters Xevo TQ-S 三重四極桿質譜儀，ESI電離源，Waters Acquity RTM 超高效液相色譜儀。

1.2 實驗方法

1.2.1 ?樣品提取及前處理 對于固體試樣取一次口服劑量的樣品研細，加50ml甲醇，稱重，超聲處理30min，取出，放冷至室溫，用甲醇補重，過濾，取1ml溶液至10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，作為供試品溶液。對于液體試樣取一次口服量減壓濃縮至近干，轉移至具塞三角瓶中，其于同固體試樣操作。

1.2.2 標準品溶液的配制 分別精密稱取咪達唑侖、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖、氯氮卓、硝西泮、奧沙西泮、勞拉西泮、地西泮、氯硝西泮10種標準品10mg置100ml量瓶中用甲醇溶解稀釋制成各濃度均為0.1mg/ml的標準品儲備液，標準品用甲醇單獨溶解稀釋制成濃度為0.1mg/ml的標準品儲備液。分別取上述標準品儲備液適量用甲醇稀釋至濃度為0.1ug/ml的混標溶液，其中氯硝西泮為負離子檢測模式單獨另配。

1.2.3 色譜條件 色譜柱為ACQUITY UPLC BEH C18（2.1mm×50 mm，1.7 μm）;柱溫：30 ℃;流動相：乙腈為流動相A，0.5%甲酸溶液為流動相B，按下表梯度洗脫，流速：0.3 ml/min。負離子模式等度洗脫乙腈-0.5%甲酸溶液（30：70）

1.2.4 質譜條件 ?離子源為ESI源，毛細管電壓3Kv，離子源溫度150 ℃;脫溶劑氣流為800L/h;脫溶劑氣流溫度為500 ℃;錐孔氣流為150 L/h。正離子方式檢測（ESI+）：咪達唑侖、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖、氯氮卓、硝西泮、奧沙西泮、勞拉西泮、地西泮。負離子方式檢測（ESI-）：氯硝西泮

1.2.5 樣品測定 在正離子檢測模式與負離子檢測模式下分別取供試品溶液和對照品溶液各1ul注如入液質聯用儀，按上述測定條件進行測定分析。

2 結果與分析

2.1 色譜條件的優化 （總離子圖）

2.3 檢出限

本實驗選用10種混合標準品溶液適量，加甲醇逐步稀釋，按上述液質聯用條件進行測定，以S/N=3，計算各化學成分的檢測限，檢出限均小于1ng，達到標準檢測要求。

2.4 方法專屬性

實驗表明，在陰性樣品中加入適量對照品，按上述樣品提取方式處理，配成上述對照品溶液的濃度，結果發現，陰性樣品基質無干擾，在有基質共存情況下仍可篩查出上述10種非法添加成分。

2.5樣品測定結果

該方法主要是用來對保健食品中是否非法添加了化學藥品作定性分析，如供試品色譜圖中檢出的某離子色譜峰保留時間與混合標準品溶液中某化學成分相一致，則取該化學成分的準分子離子進行二級質譜全掃描驗證，若供試品的保留時間和特征碎片離子均與標準品相同，則判斷該供試品中含有此化學成分[5，6]。

3 討論

上述實驗中地西泮和阿普唑侖兩種成分在總離子圖中保留時間接近難以分開，但其質量數不同，在各離子圖中可以得到很好的區分，這是液-質-質聯用技術的優勢。本方法主要是快速初篩保健品中有無添加上述10種化學成分，如檢出上述某一種或幾種成分，再用靈敏度高、信號強的離子對做定量分析以計算出準確添加的化學成分含量。

參考文獻：

[1]謝志潔，雷毅，羅卓雅等.健康產品中非法添加化學成分快速篩查方法理論與實踐[M].廣州：華南理工大學出版社，2011.

[2]王貞媛，李丹，文紅梅，等.LC-MS/MS法快速篩選保健食品中非法添加的18種止咳平喘化學成分[J] .中華中醫學刊，2012，30（1）：172-175.

[3]黎銀波，孟慶玉，鐘慶元，等.UPLC-MS/MS法快速檢測減肥類保健食品中7種違法添加的藥物[J] .中南藥學，2012，10（10）：752-756

[4]國家食品藥品監督管理局藥品檢驗補充方法和檢驗項目批準件 批準件編號2009024.安神類中成藥[Z].2009-12-04

[5]Wang J，Chen B，Yao S，Analysis of six synthetic adulterants in herbal weight-reducing dietary supplements by LC electrospray ionization-MS[J]. Food Addit Contam， 2008，25（7）：822-830

[6]Liang Q，Qu J，Luo G，et al.Rapid and reliable determination of illegal adulterant in herbal medicines and dietary supplements by LC/MS/MS[J].J Pharm Biomed Anal，2006，40（2）：305-311