雙歧四聯(lián)活菌片通過調(diào)節(jié)肺腺癌患者腸道微生態(tài)輔助抗腫瘤治療的研究*

龍瑜琴，莫蘭英,高 潘

重慶市大足區(qū)人民醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，重慶 402360

肺腺癌是肺癌的一種，占全部肺癌患者的45%左右[1]。因為肺腺癌早期一般無明顯癥狀，待患者出現(xiàn)癥狀再就診時，多數(shù)已處于中晚期，已經(jīng)錯過了最佳的手術(shù)時機。放化療、分子靶向及免疫治療是目前中晚期肺腺癌的主要治療方式[2]。鉑類是一種在肺腺癌化療中使用最為廣泛的藥物，可以通過降低腫瘤活性、預(yù)防遠處轉(zhuǎn)移來提高患者近、遠期生存率，雖然80%以上的患者對化療敏感，但其耐藥性的快速出現(xiàn)使得患者很少有可能被治愈。肺腺癌患者5年生存率不足20%[3]。腸道菌群不僅可以影響炎癥、免疫、代謝和組織發(fā)育，同時與某些癌癥的發(fā)病也有著密切聯(lián)系[4]。雙歧四聯(lián)活菌片是由雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、糞腸球菌和蠟樣芽孢桿菌4種益生菌組成的復(fù)合制劑，可以有效調(diào)節(jié)腸道菌群失衡[5]。有研究報道，適當(dāng)補充益生菌可給宿主帶來健康，益生菌對多種疾病的治療發(fā)揮輔助作用[6]，但益生菌對肺腺癌的治療是否有益還鮮有報道。因此，本研究將雙歧四聯(lián)活菌片用于輔助肺腺癌患者治療，對其調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)，輔助抗腫瘤治療的效果進行了分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2019年12月于本院確診并進行治療的肺腺癌患者124例，根據(jù)數(shù)字表法隨機分為觀察組與對照組，各62例。觀察組：男29例，女33例；年齡(56.72±6.54)歲，36～74歲；病理分期ⅢB期28例，Ⅳ期34例。對照組：男31例，女31例；年齡(54.86±5.49)歲，38～71歲；病理分期Ⅲb期29例，Ⅳ期33例。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)組織學(xué)或細胞學(xué)檢查確診為肺腺癌且驅(qū)動基因陰性或未知；(2)患者預(yù)計生存期>6個月；(3)根據(jù)文獻TNM分期的標(biāo)準(zhǔn)[7]，為Ⅲ和Ⅳ期的患者；(4)治療前未服用過其他影響免疫力的藥物；(5)患者及家屬均對本研究知情同意并簽署知情協(xié)議書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有嚴(yán)重心、肝、腎功能異常的患者；(2)中途退出治療的患者。

1.3方法

1.3.1治療方案 兩組患者均采用吉西他濱聯(lián)合順鉑的靜脈化療方案。吉西他濱：治療劑量為1 g/m2，溶于250 mL生理鹽水中，在0.5 h內(nèi)靜脈滴注完畢，在每周第1天進行治療，連續(xù)治療3周后休息1周。順鉑：治療劑量為30 mg/m2，在每周治療的第2、3、4天進行靜脈滴注，1次/d；同時，給予地塞米松10 mg靜脈滴注配合水化。觀察組在此治療方案基礎(chǔ)上服用雙歧四聯(lián)活菌片(杭州遠大生物制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字S20060010)進行治療，1.5 g/次，3次/d，連續(xù)治療2個月。對照組不使用雙歧四聯(lián)活菌片進行治療。

1.3.3腸道菌群檢測及比較 采用細菌培養(yǎng)法測定腸道菌群的變化，取兩組患者治療前、后各1 g糞便樣品于無菌收集管中，加入稀釋液進行稀釋后接種于相應(yīng)的培養(yǎng)基中。乳酸菌和雙歧桿菌的培養(yǎng)：分別接種于BL和LBS培養(yǎng)基中，以37 ℃厭氧培養(yǎng)48 h；腸桿菌、腸球菌的培養(yǎng)：分別接種于EMB、EC培養(yǎng)基，以37 ℃培養(yǎng)24 h。然后，對菌群進行革蘭染色。1 g樣品菌落數(shù)=(平均菌落數(shù)/涂布平板稀釋液體積)×稀釋倍數(shù)。對菌落數(shù)的結(jié)果進行對數(shù)處理后用于后續(xù)的比較分析。

1.3.4淋巴細胞亞群指標(biāo)的檢測 采用流式細胞儀檢測T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)及B淋巴細胞亞群(CD3-CD19+)指標(biāo)。

1.3.5腫瘤標(biāo)志物的檢測 于治療前、后分別抽取患者空腹靜脈血各5 mL，以3 000 r/min離心10 min，取血清作為檢測標(biāo)本，于-80 ℃儲存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清腫瘤特異性生長因子(TSGF)、癌胚抗原(CEA)水平，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測糖類抗原72-4(CA72-4)水平，所用檢測試劑為美國R&D公司產(chǎn)品。所有試劑均在有效期內(nèi)使用，嚴(yán)格按照儀器說明書的實驗步驟進行操作。

1.3.6不良反應(yīng)評價 根據(jù)世界衛(wèi)生組織制定的不良反應(yīng)評價標(biāo)準(zhǔn)[8]，分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 4級，以Ⅲ～Ⅳ級為嚴(yán)重不良反應(yīng)。

1.3.7觀察指標(biāo) (1)比較兩組患者治療前后的腸道菌群，包括常見的有益菌(乳酸菌、雙歧桿菌)和潛在致病菌(腸球菌、腸桿菌)。(2)對兩組患者治療前后的細胞免疫功能進行比較與分析，本研究采用淋巴細胞亞群指標(biāo)來反映細胞免疫功能。(3)對兩組患者治療前后血清腫瘤標(biāo)志物水平進行比較與分析，包括TSGF、CEA、CA72-4。(4)對兩組患者用藥期間的不良反應(yīng)進行比較與分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組腸道菌群比較 治療前 兩組患者4種腸道細菌水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后：觀察組4種腸道細菌水平與治療前比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；對照組腸道菌群中的雙歧桿菌水平低于治療前，而腸球菌與腸桿菌水平高于治療前(P<0.05)；兩組患者間比較，除乳酸桿菌外，其余3種細菌水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患者治療前后腸道菌群比較

2.2兩組患者治療前后細胞免疫功能比較 治療前：兩組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD3-CD19+比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后：兩組的各項標(biāo)均比治療前有所下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、低于對照組(P<0.05)，而兩組間CD3-CD19+比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組患者治療前后的淋巴細胞亞群指標(biāo)比較

2.3兩組患者治療前后血清腫瘤標(biāo)志物水平比較 治療前：兩組患者血清TSGF、CEA、CA72-4水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后：兩組患者血清TSGF、CEA、CA72-4水平均較治療前有所下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；觀察組各項指標(biāo)水平均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組患者治療前后腫瘤標(biāo)志物水平比較

2.4兩組患者治療期間不良反應(yīng)的比較與分析 觀察組中，有Ⅲ～Ⅳ級不良反應(yīng)的患者共6例，嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生率為9.68%(6/62)；對照組中，有Ⅲ～Ⅳ級不良反應(yīng)的患者共15例，不良反應(yīng)發(fā)生率為24.19%(15/62)；兩組間嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生率比較，觀察組低于對照組(χ2=7.142，P<0.05)。

3 討 論

肺癌是目前對人類健康威脅最大，而且最常見的惡性腫瘤之一。隨著生活環(huán)境的改變和生活節(jié)奏的加快，肺癌在我國的發(fā)病率和死亡率呈不斷上升的趨勢，現(xiàn)已成為男性人群中死亡率最高的腫瘤類型和女性人群中死亡居第2位的腫瘤類型[9]。腺癌是肺癌的一種，約占肺癌的45%左右，目前中晚期腺癌尚無十分有效的治療方法，主要以放、化療、分子靶向及免疫治療為主。但是臨床中常用的化療藥物在殺傷腫瘤細胞的同時也會給機體帶來各種不良反應(yīng)，嚴(yán)重損害患者自身的免疫功能[10]；當(dāng)患者免疫功能低下時，腸道微生態(tài)也會失調(diào)，增加了內(nèi)源性感染的概率，這通常也是患者化療過程中病情惡化或者治療中斷的重要原因[11]。乳酸菌和雙歧桿菌作為腸道益生菌具有拮抗病原微生物、輔助營養(yǎng)吸收、增強免疫力、延緩衰老和抗腫瘤的作用，而致病菌腸球菌和腸桿菌的增高會使腸道菌群比例失衡，進一步使菌群失調(diào)，嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致敗血癥的出現(xiàn)[12]。雙歧四聯(lián)活菌片是由嬰兒雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、糞腸球菌和蠟樣芽孢桿菌組成的復(fù)合微生態(tài)調(diào)節(jié)制劑，可以有效調(diào)節(jié)腸道菌群失衡，同時參與機體內(nèi)維生素合成，增加營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高人體免疫力[13]。有研究顯示，危重癥患者服用益生菌可有效調(diào)節(jié)腸道菌群，提高免疫力，減少感染發(fā)生[14]。高舉梅等[15]在研究中還指出雙歧四聯(lián)活菌片具有一定抗炎作用。鄭方義[16]在研究中指出雙歧四聯(lián)活菌片可有效調(diào)節(jié)腸道菌群失衡，療效確切，安全性高。

本研究中，給予了觀察組患者雙歧四聯(lián)活菌片治療，探討了服用腸道益生菌對肺腺癌化療患者免疫功能和場地微生態(tài)的保護作用。對照組在化療后明顯存在腸道菌群失調(diào)現(xiàn)象以及免疫力降低的情況。觀察組在肺腺癌化療后服用雙歧四聯(lián)活菌片，具有調(diào)節(jié)腸道菌群失調(diào)、提高免疫力的作用，且用藥安全。分析可能原因：腫瘤本身屬于消耗性疾病，特別是中晚期患者出現(xiàn)惡病質(zhì)，機體免疫力大幅度下降，同時，化療后的消化道反應(yīng)使患者食欲不振、營養(yǎng)不良，進一步降低了機體免疫力；其次，化療后粒細胞水平的降低加上免疫力的低下，使機體對細菌感染的抵抗力降低，導(dǎo)致腸道內(nèi)潛在致病菌定植，引起菌群失調(diào)，出現(xiàn)益生菌降低，致病菌增多的現(xiàn)象。隨著醫(yī)療水平的不斷進步，臨床治療不但追求療效的提高，同時也追求患者生活質(zhì)量的改善，特別在癌癥不能治愈的情況下，患者生活質(zhì)量更是被視為治療方案的評價指標(biāo)之一[17]。因此，在晚期胃癌患者的治療中，選擇療效確切、不良反應(yīng)小且能提高患者免疫能力的藥物與治療方案尤為重要。

長期以來，化療一直是癌癥治療的主要手段，在術(shù)前、術(shù)中、術(shù)后以及沒有手術(shù)機會的患者中均有應(yīng)用。然而，化療在殺傷腫瘤細胞的同時也將正常免疫細胞一同殺滅，使患者免疫功能降低。在以往的治療中，患者免疫功能低下以及化療所帶來的不良反應(yīng)一直是后期促進患者病情發(fā)展的重要因素。目前，盡管有研究報道了腸道微生態(tài)與肺癌的發(fā)生、發(fā)展存在密切關(guān)系[4]，但通過調(diào)節(jié)腸道菌群輔助治療肺癌的研究卻鮮有報道。本研究將口服雙歧四聯(lián)活菌片聯(lián)合應(yīng)用于對肺癌患者的治療，不但降低了化療帶來的嚴(yán)重不良反應(yīng)，還提高了患者免疫力。但本研究仍存在一定不足之處：(1)樣本量較小，存在一定局限性；(2)研究不夠深入，只是單純的觀察了患者腸道菌群變化以及反映細胞免疫功能的部分指標(biāo)和腫瘤標(biāo)志物的變化，未能進一步進行內(nèi)在分子生物學(xué)機制的研究，故無法闡明腸道微生態(tài)在肺腺癌的發(fā)生、發(fā)展中的具體作用；(3)由于雙歧四聯(lián)活菌片應(yīng)用于肺腺癌的報道相對較少，文獻中沒有各階段患者的最佳劑量作為參考。大劑量使用雙歧四聯(lián)活菌片是否效果更佳，其對合并其他疾病的患者是否安全等問題還需要更多的基礎(chǔ)實驗研究來進行闡明。

綜上所述，雙歧四聯(lián)活菌片在肺腺癌患者治療中可以調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)，提高患者免疫力，輔助抗腫瘤治療，同時安全性較好。