卡式微柱凝膠試驗與傳統鹽水法在輸血檢驗中的應用價值

葉曉芳

解放軍陸軍第七十三集團軍醫院檢驗病理科檢驗中心 （福建廈門 361001）

輸血檢驗是保障臨床危重癥患者輸血安全的重要手段，其主要通過檢測出受檢者機體血液內不完全抗體及完全抗體的組成情況，并以此推斷患者輸血后是否存在發生特異性或非特異性凝集的可能性，以確保輸血安全[1]。目前，臨床常用的輸血檢驗方法有鹽水法、低離子凝聚胺法及卡式微柱凝膠試驗等。其中，傳統配血方法——鹽水法主要的應用優勢為檢驗設備少、操作簡易等，但此種檢驗方法無法準確檢出機體不完全抗體，輸血后發生不良反應的風險較大。卡式微柱凝膠試驗可有效彌補鹽水法的弊端，其主要的應用優勢為檢驗技術易掌握，靈敏度高、結果穩定易判斷，可重復性強等[2]。基于此，本研究比較卡式微柱凝膠試驗與傳統鹽水法在輸血檢驗中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2020年1月至2021年1月在我院接受輸血治療的112例患者的臨床資料，根據輸血檢驗方法的不同將其分為兩組，各56例。對照組男31例，女25例；年齡1～76歲，平均（38.42±3.17）歲。試驗組男30例，女26例；年齡2～75歲，平均（38.45±3.14）歲。兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

納入標準[3]：均經臨床診斷存在危重癥且經相關檢查證實；符合輸血指征；已簽署研究知情同意書。排除標準：存在輸血禁忌證；存在精神及認知障礙；臨床資料不完整。

1.2 方法

采集所有受檢對象肘靜脈血液標本3 ml。

對照組采用傳統鹽水法進行輸血檢驗：使用美國賽默飛sorvall st 40型離心機對血液標本以3 500 r/min 離心3 min 以獲得上層血清，在血清標本內加入0.9%氯化鈉注射液配置成5%紅細胞生理鹽懸液，隨后正定型添加抗-H、抗-AB、抗A1及人源血清等血型試劑，反定型添加A2細胞及自身細胞，并結合吸收放散試驗進一步確定紅細胞上的A、B 抗原。

試驗組采用卡式微柱凝膠試驗進行輸血檢驗：使用美國賽默飛sorvall st 40型離心機對血液標本以3 500 r/min離心3 min，離心后，取10 μl壓積紅細胞加入1 ml低離子強度鹽溶液制備成1%樣本紅細胞1管；用0.9%氯化鈉注射液洗滌剩余血液標本以制備上清液1管，用酸放散試劑處理洗滌過的紅細胞以制備酸放散液1管；取被檢血漿50 μl分別加入抗人球蛋白溶血三項檢測卡1、2號孔，再加入與患者血型一致的標準紅細胞及“O”形標準紅細胞開展游離抗體試驗；取酸放散液75 μl加入3、4號孔，再加入與患者血型一致的標準紅細胞及“O”形標準紅細胞開展抗體放散試驗；直接加入上清液及與患者血型一致的標準紅細胞到5號孔后置于孵育器內進行15 min的孵育（溫度為37 ℃），隨后取出抗人球蛋白溶血三項檢測卡，再將0.8%樣本紅細胞加入6號孔進行直接抗球蛋白試驗（direct antiglobulin test，DAT）；最后將抗人球蛋白溶血三項檢測卡置于離心機內，先以900 r/min的速度離心2 min，再以1 500 r/min的速度離心5 min后判讀結果。

1.3 觀察指標

（1）正向定型及反向定型符合情況：傳統鹽水法，紅細胞發生凝集提示為陽性，紅細胞處于游離狀態提示為陰性；卡式微柱凝膠試驗，紅細胞發生凝集、未有沉底現象提示為陽性，試管內紅細胞全部沉底提示為陰性[4]；正向定型與反向定型是指兩種檢測方法所獲得的結果是否符合傳統鹽水法及卡式微柱凝膠試驗的陽性判定結果。（2）輸血不良反應：比較兩組頭暈頭痛、發熱、胸悶、乏力等輸血不良反應發生情況。（3）檢驗總時長：比較兩組的檢測總時長，即自檢驗醫師獲取血液標本至得出檢驗結果的時間。（4）滿意度：自制滿意度調查問卷（Cronbach’α 系數為0.897，內容效度為0.875）評估檢驗醫師（17名）對兩組輸血檢驗效果的滿意度，問卷采用百分制，評分≥90分為十分滿意，75～89分為滿意，60～74分為一般，＜60分為不滿意，總滿意度=（十分滿意人數+滿意人數+一般人數）/總人數×100%。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 正向定型及反向定型符合情況

試驗組正向定型及反向定型符合率均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組正向定型及反向定型符合情況比較[例（%）]

2.2 輸血不良反應發生情況

試驗組輸血不良反應發生率低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組輸血不良反應發生情況比較[例（%）]

2.3 檢驗總時長

試驗組檢驗總時長為（5.12±0.46）min，短于對照組的（7.69±0.81）min，差異有統計學意義（t=20.646，P＜0.05）。

2.4 檢驗醫師滿意度

檢驗醫師對試驗組輸血檢驗效果的總滿意度高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 17名檢驗醫師對兩組輸血檢驗效果的滿意度比較

3 討論

輸血治療多針對臨床危重癥患者，若錯過最佳輸血時間，易增加患者殘疾或死亡風險；同時，若血型不匹配，患者可能會出現抗凝、血管栓塞等不良情況，從而誘發心血管疾病，嚴重影響其身心健康；此外，輸血治療過程中亦存在較高的風險，患者易出現發熱、溶血性反應等諸多輸血不良反應，從而影響康復，甚至可能危及生命。為了保證輸血治療的有效性和安全性，開展輸血前的交叉配血試驗極為重要。以往臨床采用的檢驗方法為傳統鹽水法，該方法操作煩瑣且標準化及自動化水平偏低，多采用手動操作，易受人為因素干擾[5]；且臨床部分患者（如新生兒、老年人、白血病患者、惡性腫瘤患者）存在紅細胞抗原較弱現象，手動操作對血型的判定難度較大，故積極探索更為科學合理的輸血檢驗方法尤為必要。

劉颯爽等[6]的研究指出，在臨床輸血檢驗中，合理應用卡式微柱凝膠試驗可確保患者輸血安全，且其血液配對速度相對較快，檢驗優勢更為明顯。卡式微柱凝膠試驗作為新型免疫學檢測技術，其主要通過調節葡聚糖凝膠濃度以控制分子篩孔徑的大小，促使分子篩規格僅允許游離分子通過，從而達到分析凝集紅細胞與游離紅細胞的目的；該技術所使用的管柱具有一定的離心力，可發揮篩選作用，凝膠與網狀復合物表面結合后可將紅細胞與復合物分離，從而準確鑒別。總之，卡式微柱凝膠試驗具有操作簡便、定量檢測標準化、可快速完成血型匹配且匹配準確率較高、不易受人為因素干擾、可重復性良好等優勢[7]。本研究結果顯示，試驗組正向定型及反向定型符合率均高于對照組，輸血不良反應發生率低于對照組，檢驗總時長短于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；檢驗醫師對試驗組輸血檢驗效果的總滿意度高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。卡式微柱凝膠試驗采用標準化定量操作，可最大限度地規避檢驗人員的操作隨意性，其中的凝膠分子篩可促使檢驗結果的客觀性提高，且對標本量需求較少，尤其適用于對臨床標本抽取困難患者（如新生兒、大面積燒傷患者）的輸血檢驗中。卡式微柱凝膠試驗僅允許未發生凝集的紅細胞通過，可將已凝集的紅細胞有效分離至柱外，故該檢驗方法具有較高的靈敏度，尤其針對具有重要臨床意義的紅細胞抗體（如抗-E 等），其靈敏度更高[8]。新生兒溶血或自身免疫性疾病患者血液標本內的紅細胞會自發凝集，且紅細胞膜獲得性或遺傳性異常也可引發凝集現象[9]，故單純開展正定型檢測時可能會因上述情況而影響檢驗結果的判定；而卡式微柱凝膠試驗通過添加抗人球蛋白可幫助紅細胞發生特異性凝集，故該檢驗方式具有更高的特異性，且正反定型結合可有效彌補單純正定型檢測的不足。但也有研究指出，采用卡式微柱凝膠試驗開展輸血檢驗后，實際臨床輸血過程中仍可能出現血型不符的情況，今后臨床開展輸血操作前還應結合患者當前病情及既往病史等進行綜合評估，以進一步提升輸血安全性[10]。

綜上所述，卡式微柱凝膠試驗的開展可有效提高輸血檢驗的準確率，降低輸血不良反應發生率，縮短檢驗耗時，為患者輸血安全提供保障，進而提高檢驗醫師的滿意度。