CTCs、ProGRP、NSE在小細胞肺癌診斷及預后評估中的臨床價值

賈萬理，楊 陽△，晉 婕

1.西安高新醫院輸血科，陜西西安 710075；2.西安金域醫學檢驗所有限公司，陜西西安 710075

肺癌是臨床上常見的起源于支氣管黏膜或支氣管腺體的惡性腫瘤。在我國，肺癌的發病率和死亡率均位居各類癌癥之首，而且呈逐年上升的趨勢[1]。大部分肺癌為非小細胞肺癌，只有10%～15%的肺癌為小細胞肺癌[2]。小細胞肺癌具有低分化、高復發、高轉移、預后差、生存期短等特點，患者確診時大多已發生轉移[3]。因此，早發現、早治療對延長肺癌特別是小細胞肺癌患者生存期具有重要意義。循環腫瘤細胞(CTCs)是指從原發腫瘤病灶或轉移灶脫落進入外周血的腫瘤細胞，是目前腫瘤研究中最有前景的項目之一[4]；胃泌素釋放肽前體(ProGRP)是胃泌素釋放肽的前體結構，體內水平穩定，是小細胞肺癌的診斷標志物之一[5]；神經元特異性烯醇化酶(NSE)存在于神經元和神經內分泌細胞中，對小細胞肺癌手術治療效果和預后評估具有重要臨床價值[6]。本研究主要探討CTCs、ProGRP、NSE在小細胞肺癌診斷及預后評估中的臨床價值，旨在為小細胞肺癌的早期診斷及預后評估提供新的思路。

1 資料和方法

1.1一般資料 采用回顧性方法，收集2017年1月到2018年6月西安高新醫院收治的102例小細胞肺癌患者作為肺癌組，年齡30～80歲、平均(56.2±8.5)歲，男64例、女38例。納入標準：(1)初次確診為小細胞肺癌；(2)經病理學、影像學核實；(3)預計生存期不低于3個月；(4)臨床資料完整，患者依從性高。排除標準：(1)嚴重肝、腎功能不全者；(2)合并嚴重心腦血管疾病者；(3)合并其他惡性腫瘤者；(4)合并其他嚴重肺部疾病者；(5)感染性疾病者；(6)妊娠期或哺乳期婦女。收集西安高新醫院收治的同期100例肺部良性腫瘤患者作為良性組，年齡30～80歲、平均(56.1±8.7)歲，男62例、女38例。良性組術后均經病理切片核實確診為肺部良性腫瘤，無其他惡性腫瘤史。另收集西安高新醫院同期100例體檢健康者作為對照組，年齡30～80歲、平均(55.9±8.3)歲，男62例、女38例。3組研究對象的年齡、性別構成差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究符合倫理學標準且經醫院倫理委員會批準通過，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2方法 所有研究對象空腹8 h以上抽取靜脈血2管。一管(ACD枸櫞酸鈉抗凝)5 mL，顛倒混勻數次，立即進行檢測；另一管(紅色無添加劑試管)3 mL，顛倒混勻數次,靜置20 min后，以3 000 r/min離心10 min，取上清液(血清)待檢。抗凝血用于CTCs檢測，先采用免疫磁珠負向富集法捕獲CTCs，再采用免疫熒光與原位雜交結合的方法進行檢測，最后采用Cell Search系統進行分析。采用羅氏Cobas e602全自動電化學發光免疫分析儀及其配套試劑檢測血清ProGRP、NSE水平。所有步驟由同一檢驗師按照試劑盒說明書進行操作，室內、室間質評均在控。

2 結 果

2.13組CTCs、ProGRP、NSE水平比較 肺癌組CTCs、ProGRP、NSE水平高于良性組及對照組，良性組高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組CTCs、ProGRP、NSE水平比較

2.2CTCs、ProGRP、NSE對小細胞肺癌的診斷效能分析 ROC曲線結果顯示CTCs、ProGRP、NSE聯合檢測診斷小細胞肺癌的曲線下面積(AUC)為0.932，靈敏度為92.1%，特異度為90.0%，均優于CTCs、ProGRP、NSE單獨檢測的AUC、靈敏度和特異度，見表2和圖1。

圖1 CTCs、ProGRP、NSE診斷小細胞肺癌的ROC曲線

表2 CTCs、ProGRP、NSE對小細胞肺癌的診斷效能分析

2.3小細胞肺癌預后影響因素的Cox回歸模型分析 Cox回歸模型分析結果顯示，臨床分期為廣泛期、有淋巴結轉移及CTCs、ProGRP、NSE水平升高是小細胞肺癌預后不良的獨立危險因素(P<0.05)，見表3。

表3 小細胞肺癌預后影響因素的Cox回歸模型分析

3 討 論

肺癌是全球發病率和致死率最高的惡性腫瘤，按組織細胞學可分為非小細胞肺癌和小細胞肺癌。其中小細胞肺癌僅占20%左右，但其惡性程度較高，進展較快，早期階段就容易發生轉移，預后較差[8]。臨床上對中、晚期小細胞肺癌以化療為主，盡管其對化療藥物比較敏感，但極易造成繼發性耐藥[9]。因此，早發現、早干預對改善患者預后尤為重要。

CTCs檢測是目前最新的“液體活檢”技術,CTCs是由實體腫瘤病灶中轉移出來而進入血液系統、淋巴系統的細胞，能夠反映腫瘤的發生、發展情況以及可能介導腫瘤轉移[10]。王瑩等[11]的報道指出，CTCs在小細胞肺癌早期診斷、療效評價、預后評估、復發檢測上具有重要作用。胃泌素釋放肽(GRP)可刺激胃內G細胞分泌胃泌素，收縮平滑肌，促進自分泌或細胞間相互作用而誘發癌細胞增殖、分化。ProGRP作為GRP前體，廣泛分布于肺組織神經內分泌細胞及非胃竇組織中，半衰期長，穩定性強，更能反映肺癌的臨床情況[12]。NSE屬于神經源性蛋白，能夠參與磷酸肌醇的代謝，影響丙酮酸進入線粒體的速度，導致肺泡上皮細胞的異常代謝,促進腫瘤細胞增殖[13]。本研究結果顯示，CTCs、ProGRP、NSE水平在小細胞肺癌中升高，說明這些指標均參與了腫瘤的發生、發展。采用ROC曲線分析CTCs、ProGRP、NSE單獨和聯合檢測對小細胞肺癌的診斷效能，不難發現，3項指標聯合檢測可進一步提高診斷效能，AUC為0.932，靈敏度和特異度分別分別為92.1%、90.0%，診斷效能比較理想。

小細胞肺癌按臨床分期可分為廣泛期和局限期。經過治療的局限期小細胞肺癌生存期為1～3年，而廣泛期不足1年[14]。相比較而言，廣泛期小細胞肺癌預后較差。淋巴結轉移是肺癌轉移的主要途徑，也是影響患者預后的重要因素之一，小細胞肺癌容易發生轉移，一旦發生轉移，其治療難度增大，對預后影響較大[15]。本研究利用Cox回歸模型分析小細胞肺癌預后的影響因素，結果顯示，臨床分期為廣泛期、有淋巴結轉移及CTCs、ProGRP、NSE水平升高是小細胞肺癌預后不良的獨立危險因素。這與上述理論一致，在唐興等[16]、秦文燕等[17]的報道中也有體現。本研究存在不足之處，如樣本量較小，且為回顧性研究，尚待日后加大樣本量進行更深入的研究來佐證結論的正確性，以期為臨床診療工作提供新的思路。

綜上所述，CTCs、ProGRP、NSE水平在小細胞肺癌患者中明顯升高，且與患者預后密切相關，3項指標聯合檢測有助于患者早期診斷及預后評估，值得臨床推廣應用。