落新婦粉色幻想組培快繁技術研究

魏進莉

（北京市花木有限公司天卉源綠色科技研究院，北京 100093）

落新婦（Astilbe chinensis）為虎耳草科（Saxifragaceae）落新婦屬（Astilbe）多年生耐寒草本花卉[1]。落新婦的穗狀花序簇擁在一起，酷似蓬松的泡沫，觀賞效果極佳，因而在日本被稱為“泡盛草”。落新婦的園藝栽培雜交種花色有紅色、粉紅和白色等，色澤鮮艷美觀，花朵錯落有致，株型華貴典雅。落新婦是21世紀新興的種植植物，也是營造花境的主要栽培品種之一，適合于花壇、盆栽和庭院栽培，同時落新婦是極好的鮮切花品種。此外，落新婦是很好的藥用植物，全草含氰酸，花含槲皮素，根莖含巖白菜素。根狀莖入藥可散瘀止痛、祛風除濕和清熱止咳。落新婦具有較好的抗癌作用，是一種值得開發的抗癌新資源[2]。落新婦作為一種集醫藥價值與園藝觀賞價值于一身的植物種類，具有廣闊的應用前景。落新婦以播種繁殖為主，也可分株繁殖。分株繁殖在春季萌芽前或夏季花后進行，挖出根莖，分割帶芽植株，直接栽植，每4～5年分株1次，繁殖效率較低[3]。播種繁殖通常在春季進行，發芽率較低，發芽較慢，發芽難度較大。例如，穴盤播種育苗時，每穴播種3～5粒，以保證每穴的出芽率；種子需在0～5℃低溫條件下處理3～4周，之后逐漸升高溫度，在20～25℃條件下，需14～21 d發芽；基質需保持較低的可溶性鹽含量，pH值保持在5.8～6.0之間；種子萌發需要光照，但也要進行遮陰處理，避免陽光直射；整個穴盤育苗時間達9周。然而，落新婦播種繁殖和分株繁殖的繁殖系數低，受環境因素影響大，無法實現快速繁殖。基于此，應開發落新婦組培快繁技術，以實現大量規模化生產，滿足市場需求。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 植物材料。外植體材料為落新婦粉色幻想的幼嫩葉片，來自北京市花木有限公司天卉源綠色科技研究院品種資源圃。

1.1.2 培養基。以MS為基本培養基，添加不同濃度的6-BA和NAA，以及白砂糖30 g/L、瓊脂4.5 g/L（凝膠強度≥1 300 g/cm2，下同）。生根培養以1/2MS為基本培養基，添加不同濃度NAA、白砂糖20 g/L、瓊脂5.0 g/L。各培養基pH值均為5.8～6.0，121℃高壓蒸汽滅菌20min。

1.2 試驗方法

1.2.1 外植體接種。采取落新婦粉色幻想的幼嫩葉片，放入自來水中浸泡8～15min，再用自來水沖洗20～30min，在超凈工作臺上用酒精浸泡消毒20～30 s，用20%次氯酸鈉溶液浸泡消毒8～10min，無菌水沖洗3～4次，剪去葉緣被消毒液殺死的組織，接入添加6-BA 1.0mg/L和NAA 0.1mg/L的培養基中進行培養，共接種50瓶，每瓶1個葉片，培養30 d后統計結果。

1.2.2 增殖培養基的篩選。將無菌的芽苗接入添加激素 6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L、6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L、6-BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L 的培養基中，增殖培養溫度為（23±2）℃，光照強度為1 500～2 000 lx，每處理6瓶，每瓶7株，培養30 d統計結果。

1.2.3 最佳生根培養基的篩選。將大小適宜的組培苗分別接入添加NAA 0.10、0.25、0.50mg/L的培養基中，培養溫度（25±1）℃，光照強度 1 500～2 000 lx，每處理6瓶，每瓶15株，培養15 d觀察統計結果。

1.2.4 不同溫度對生根培養的影響。將接種于生根培養基中的落新婦組培苗置于光照培養箱中培養，光照時間12 h，溫度為19～20℃，培養7 d后將一個培養箱溫度調至23～24℃，再培養23 d，觀察統計結果；另一個光照培養箱19～20℃培養15 d后將溫度調至23～24℃，再培養15 d，觀察統計結果。將接種于生根培養基中的落新婦組培苗置于光照培養箱中培養，光照時間 12 h，分別于溫度 21～22、23～24、25～26℃條件下培養，培養 10、20、30 d時觀察統計結果。

1.2.5 溫室煉苗。將已生根的組培苗移到溫室，在瓶內煉苗3～5 d后，取出洗去根部培養基，分1.0～1.5 cm、1.5～2.0 cm和1.5～2.5 cm等3種不同的規格，栽入準備好的煉苗基質（草炭∶珍珠巖=7∶3），噴水保濕，置于溫室遮陰網拱棚內，光照強度不高于8 000 lx；移栽后4～5 d之內，適當提高葉片噴水頻率，保證空氣濕度在85%以上；5～7 d后，新根逐漸形成，降低噴水頻率；10 d左右，逐漸改為澆水，在溫室光照不高于15 000 lx的情況下，拆除遮陰網，常規養護。在夜溫24℃、日溫26～27℃和空氣濕度70%～80%的條件下，養護30 d觀察統計結果。

2 結果與分析

2.1 外植體接種無菌苗的獲得情況

落新婦粉色幻想的幼嫩葉片培養15 d時，近葉柄的葉脈上開始形成愈傷組織，繼續培養至30 d，有小芽形成。此外，葉片越嫩越易形成愈傷組織和芽。

2.2 不同激素濃度對增殖的影響

由表1可知，培養基中添加的激素濃度越高，落新婦粉色幻想芽的增殖系數越高，組培苗生長越細弱。當培養基中添加的激素濃度較低時，組培苗生長較為健壯。

表1 不同培養基中芽的增殖及組培苗生長情況

當培養基中添加6-BA 1.5mg/L、NAA 0.2mg/L時，增殖倍數最高，達21.6，但芽小而細弱，不宜生根培養；當培養基中添加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L時，苗大小一致性較差，大苗較高而健壯，小芽較小。比較而言，培養基中添加6-BA 1.0mg/L、NAA 0.2mg/L最佳，苗的大小均一性較好，也較健壯，用來接種增殖和生根培養均較好。

2.3 不同激素濃度對生根培養的影響

由表2可知，在添加不同激素濃度的生根培養基中，組培苗生根率和根的生長情況不同。當NAA濃度較低時，根較少，根長一致性相對較差；隨著NAA濃度的增加，組培苗的生根率提高，根長較為一致；隨著NAA濃度的進一步增加，組培苗生根率下降，根的形成和生長受到抑制。由表2可知：添加NAA 0.25mg/L的生根培養基最佳，生根率達到100%，根較多，一致性也較好；添加NAA 0.10mg/L的生根培養基次之，生根率為98%，根數較少，根長短差異較大；添加NAA 0.50mg/L的生根培養基最差，生根率最低，為95%，根很短且有叢生現象。

表2 不同激素濃度對生根培養的影響

2.4 培養溫度對苗生長情況的影響

由表3可知，落新婦粉色幻想在培養過程中對溫度較為敏感，當溫度低于一定程度時，會出現死苗現象，隨著培養時間的延長，死亡現象加重。在19～20℃溫度條件下培養7 d，再將溫度升高到23～24℃繼續培養23 d時，苗的死亡率為7.3%，活苗較小，枯葉較少，根數較多；在19～20℃溫度條件下培養15 d，再將溫度升高到23～24℃繼續培養15 d，苗的死亡率達40.8%，活苗很小，葉片偏黃且枯葉較多，根系也很少。苗的生長情況具體見圖1和圖2。

表3 溫度變化對苗生長的影響

2.5 不同培養溫度對根形成的影響

由表4可知，溫度對落新婦粉色幻想的根系形成及苗的生長情況影響較大。溫度越低，落新婦粉色幻想根的形成和生長越慢，苗的生長也越慢；相反，溫度越高，落新婦粉色幻想根系的形成和生長越快，苗的生長也越快。當溫度為21～22℃時，培養20 d落新婦粉色幻想尚未生根，培養30 d落新婦粉色幻想的生根率與其他溫度條件一樣，達100%。當溫度為25～26℃時，培養10 d落新婦粉色幻想開始生根；培養20 d約有50%生根，根長約2mm；培養30 d生根率達100%，根長達10mm，根數≥10條，葉片數為12～14片，株高達 15mm。

表4 落新婦粉色幻想在不同溫度條件下的生根及生長情況

2.6 溫室煉苗成活情況

落新婦粉色幻想的生根苗在溫室煉苗的難度比較大，苗易爛根，根的形成和生長較慢。當落新婦粉色幻想組培苗較大時，其成活率相應較高。結果表明：當落新婦粉色幻想組培苗高度為2.0～2.5 cm時，組培成活率最高，為94.6%；當落新婦粉色幻想組培苗高度為1.0～1.5 cm，組培苗成活率最低，為90.5%；當落新婦粉色幻想組培苗高度為1.5～2.0 cm，組培苗成活率為93.2%

3 結論與討論

在外植體接種培養過程中，葉片越幼嫩越易誘導形成愈傷組織[4]。在消毒過程中，幼嫩的葉片組織易被消毒液損傷或殺死[5-6]。因此，在選取外植體材料時，要求植株健康無病蟲害、葉面干凈、葉片的幼嫩程度適中。

在增殖階段，培養基中激素的添加濃度與配比對芽苗的增殖倍數和生長情況有一定的影響，將組培快繁技術推廣應用于落新婦的工廠化生產過程中，應根據生產需求進行進一步改進優化。在保持較高增殖倍數的情況下，保障芽苗的生長狀況良好，便于生根培養和提高煉苗成活率，以進一步控制生產成本。在組培繁殖過程中，落新婦對溫度較為敏感。溫度越高，芽苗的生長和生根狀況越好；溫度較低時，芽苗的生長狀況較差，尤其是當培養溫度低于20℃時，甚至會出現死苗的現象。此外，在低溫下存放時間越長，芽苗的死亡率越高。因此，落新婦的組培快繁生產適宜在夏季進行，不宜在冬季進行，以滿足其較高的生長溫度需求，提高增殖倍數、芽苗的生長規格、生根率和煉苗成活率，有效降低生產成本和提高煉苗成活后的穴盤苗質量。如何更好地把控生產成本與苗的質量，有待進一步試驗研究。