參苓白術丸中5種重金屬元素的殘留檢測

李正剛，謝秋紅，曲涵婷，邵大志，王丹彧，馬 彧（.四平市食品藥品檢驗所，吉林 四平 6000；.四平市中心人民醫院，吉林 四平 6000；.四平市社會精神病院，吉林 四平 6000）

參苓白術丸由人參、茯苓、山藥、桔梗、白術（麩炒）、砂仁、白扁豆（炒）、薏苡仁（炒）、蓮子、甘草10味中藥組成，具有補脾胃，益肺氣功效。臨床用于治療脾胃虛弱，食少便溏，氣短咳嗽，肢倦乏力。其質量標準收載在《中國藥典》（2020年版）一部中[1]。經查閱文獻發現關于參苓白術丸的質量研究報道較少，且均為功效成分的質量控制研究[2]和微生物安全性研究[3-4]。因重金屬元素易在人體內產生積蓄性毒性，現階段國家對中藥材和中成藥中重金屬元素的質量控制要求越來越嚴格，新版藥典也陸續增加檢測的品種。該制劑中人參和甘草藥材標準均進行了重金屬及有害元素雜質控制[5-6]，且丸劑制備過程中制備機械等外源性元素引入情況同樣重視[7-9]。參苓白術丸為國家基本藥物，為確保患者用藥安全和藥品質量，對其重金屬元素進行測定非常必要[10-13]。基于上述因素，本研究擬采用微波消解-電感耦合等離子體質譜（inductively coupled plasma mass spectrometry，ICPMS）法建立參苓白術丸中鉛、砷、汞、鎘、銅5種重金屬元素的含量測定方法，以期為參苓白術丸樣品中重金屬含量的測定提供方法學依據。

1 儀器與試藥

NexION 350X型電感耦合等離子體質譜儀[鉑金埃爾默儀器（上海）有限公司]；BP211D型電子天平（北京賽多利斯儀器天平有限公司）；MA093型微波消解儀（意大利Milestone公司）。

鉛（Pb）元素對照品溶液（批號：GSB04-1742-2004），砷（As）元素對照品溶液（批號：GSB04-1714-2004），汞（Hg）元素對照品溶液（批號：GSB04-1729-2004），鎘（Cd）元素對照品溶液（批號：GSB04-1721-2004），銅（Cu）元素對照品溶液（批號：GSB04-1725-2004），鉍（Bi）元素對照品溶液（批號：GSB04-1719-2004），金（Au）元素對照品溶液（批號：GSB04-1715-2004），鍺（Ge）元素對照品溶液（批號：GSB04-1728-2004），銦（In）元素對照品溶液（批號：GSB04-1731-2004）濃度均為1000 μg·mL-1，均來自國家有色金屬及電子材料分析測試中心。硝酸為優級純（MERCK公司），水為超純水。5批參苓白術丸均來源于市售，規格：6 g∶100丸。

2 方法與結果

2.1 儀器工作條件

等離子體射頻功率1.6 kW，炬管水平位置2.00 mm，炬管垂直位置-0.3 mm，采樣深度17 mm；載氣流速為1.1 L·min-1，冷卻氣體流速為15.0 L·min-1，輔助氣流量為1.0 L·min-1。測定時選取72Ge作為63Cu、75As內標，115In作為114Cd內標，209Bi作為202Hg、208Pb內標。

2.2 微波消解程序

本研究采用微波消解技術，采用程序升溫方式對樣品進行密閉、高溫、高壓微波消解，可以有效防止易揮發元素的損失。具體微波消解程序見表1。

表1 微波消解程序Tab 1 Microwave digestion procedure

2.3 對照品溶液的制備

分別精密量取Pb、Cd、As、Cu單元素對照品溶液，用2%硝酸溶液分別稀釋成含Pb為0、5、10、20、50 ng·mL-1，含Cd為0、0.5、2.5、5.0、10.0 ng·mL-1，含As為 0、1、5、10、20 ng·mL-1，含Cu為 0、25、50、100、200 ng·mL-1的4種系列不同濃度的混合對照品溶液。另精密量取Hg對照品溶液適量，用2%硝酸溶液稀釋成含Hg為 0、0.2、0.5、1.0、2.5 ng·mL-1的系列不同濃度對照品溶液。

2.4 混合內標溶液的制備

精密量取Ge、In、Bi內標對照品溶液適量，用2%硝酸稀釋制成每1 mL中各含上述元素1 ng的混合內標溶液。

2.5 樣品的制備

取供試品，剪碎，取0.5 g精密稱定，置于消解罐內，加入8 mL硝酸，消解罐置恒溫加熱器中，120 ℃預消解1 h，放涼，補加硝酸2 mL，蓋好內蓋，旋緊外套，置于微波消解儀中，按“2.2”項下消解程序進行消解。消解完全后，消解液冷卻至約50 ℃，取消解罐置于恒溫加熱器中120 ℃緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，濃縮消解液至約2 mL，放冷，將消解液轉入50 mL量瓶中，用少量水洗滌消解罐3次，洗液合并于量瓶中，加入金單元素標準溶液200 μL（1 μg·mL-1），用水稀釋至刻度，搖勻。按同樣方法制得空白溶液。

2.6 重金屬含量測定

采用在線內標法，依次進行空白溶液、標準曲線溶液及樣品溶液測定，以各元素濃度為橫坐標，Ratio值（待測元素與內標元素響應值比值）為縱坐標繪制標準曲線，計算樣品中各重金屬元素的含量。

2.7 方法學驗證

2.7.1 線性范圍和檢出限 取系列不同濃度的混合對照品溶液與混合內標溶液，按“2.1”項下條件進樣測定。以對照品溶液質量濃度（X，ng·mL-1）為橫坐標，Ratio值為縱坐標，進行線性回歸。在試驗條件下，重復測定空白溶液11次，各元素信號響應的3倍標準偏差對應的元素濃度即為檢出限，結果見表2。

表2 回歸方程、線性范圍和檢出限Tab 2 Regression equation, linear range and detection limit

2.7.2 精密度考察 取Pb、Cd、As、Cu混合對照品中標準曲線第4點溶液及Hg標準曲線第4點溶液，重復進樣6次，各元素含量RSD為2.3% ～ 3.6%，表明儀器精密度較好。

2.7.3 重復性考察 取同一批參苓白術丸（批號：201001）按照“2.5”項下方法平行制備6份樣品溶液，進行測定。結果顯示6份樣品中Pb、Cd、As、Hg、Cu測定結果的RSD分別為4.5%、3.1%、3.8%、3.6%、3.5%、5.3%（n= 6），表明本方法重復性良好。

2.7.4 加樣回收率試驗 精密稱取已知5種元素含量的參苓白術丸（批號：201001）6份，每份約0.5 g，分別加入相當于樣品中測定元素含量的金屬元素對照品溶液，按照“2.5”項下進行樣品制備，計算加樣回收率及RSD，結果見表3。

表3 加樣回收率試驗結果Tab 3 Results of recovery test

2.8 樣品測定結果

本次共收集到7家公司生產的參苓白術丸，對每批樣本進行Pb、Cd、As、Hg、Cu金屬元素含量檢測，結果顯示7批樣品不同程度的檢測出了上述5種重金屬，但均在安全限度之內。見表4。

表4 參苓白術丸樣品中重金屬測定. mg·kg-1Tab 4 Determination of heavy metal content in Shenling Baizhu pills samples. mg·kg-1

3 討論

3.1 方法選擇

《中國藥典》（2020年版）中重金屬元素鉛、鎘、砷、汞、銅的測定方法主要有原子吸收分光光度法和電感耦合等離子體質譜法兩種。原子吸收分光光度法中樣品前處理和測定均比較繁瑣，但現階段大部分中小型制藥企業由于資金限制，仍然采用該方法。電感耦合等離子體質譜儀是以獨特的接口技術方法將離子源的高溫電離特性與四級桿質譜儀的靈敏、快速掃描的優點相結合的一種新型的元素和同位素分析技術[14-17]。近年來，ICP-MS技術因其靈敏、快速，能同時測定多種金屬元素等優點而被大型科研院所采用。本研究亦采用ICP-MS進行參苓白術丸中5種重金屬元素的測定，方法簡便，測定結果準確可靠。

3.2 限量值討論

目前《中國藥典》還未明確規定中成藥中重金屬及有害元素的最大限量，本文參考《中國藥典》（2020年版）通則9302中藥有害殘留物限量制定指導原則[18]和相關文獻研究報道，進行了參苓白術丸中鉛、鎘、砷、汞、銅的限量值計算。按照相關公式[19-21]計算得出參苓白術丸中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬及有害元素的最大限量理論值分別為：6.5、4.0、14.9、3.0、2 484.0 mg·kg-1。本次檢測的7批樣品中鉛、鎘、銅、汞、砷均被不同程度檢出，但檢測含量均低于限量的理論值，證明產品是安全可靠的。

綜上，本研究采用了ICP-MS法對參苓白術丸中5種重金屬元素進行檢測，該方法靈敏、操作較簡便，結果準確度較高，為制藥企業進行藥品質量的把控提供了相關參考依據。