雅安地區健康成人網織紅細胞參數參考區間的建立及驗證*

陳 濤，黃 滔，付立芳，鄭 悅，李曉芳，杜順錦，何 霞△

雅安市人民醫院：1.檢驗科；2.體檢中心，四川雅安 625000

隨著全自動血細胞分析儀的快速發展，血常規中一些新穎參數，如網織紅細胞(Ret)相關參數Ret絕對值(Ret#)、Ret百分比(Ret%)、Ret血紅蛋白含量(RET-He)、高熒光強度Ret比率(HFR)、中熒光強度Ret比率(MFR)、低熒光強度Ret比率(LFR)、未成熟Ret比率(IRF)的檢測和應用也日漸廣泛。Ret是一種骨髓新釋放的尚未完全成熟的紅細胞，單位體積血液中Ret的數量可以評估骨髓紅細胞的生成情況，有助于分析貧血的發病機制[1]。目前，中國地區可見Ret參考范圍的研究多為單一區域研究，如韓啟福等[2]和胡衛紅等[3]的研究，多數醫院參考區間來源于《全國臨床檢驗操作規程》、儀器廠家說明書、教科書、試劑廠家說明書等[4]。雅安屬中國西南地區的中小城市，目前鮮見該地區的Ret參考區間的研究，因此，筆者根據美國臨床實驗室標準協會C28-A3文件標準[5]，利用Sysmex XN-1000全自動血細胞分析儀對2 785例健康成人進行Ret計數及分群測定，探討Ret參數與年齡、性別的關系，初步建立雅安地區健康成人Ret相關參數的參考區間，以期為Ret在雅安地區的臨床應用提供準確的實驗依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年9月至2020年9月雅安市人民醫院健康體檢者作為研究對象。納入標準：(1)長期生活于四川省雅安市；(2)白細胞計數(WBC)(3.5～9.5)×109/L ；(3)男性血紅蛋白(Hb)>120 g/L，女性Hb>110 g/L；(4)體質量指數(BMI)≤24.0 kg/m2[6-8]。排除標準：(1)有腫瘤、血液病病史；(2)有吸煙、酗酒史；(3)女性在月經期及妊娠期內。最終符合條件的研究對象共2 785例，男1 561例，年齡21～91歲，女1 224例，年齡21～87歲。男女各分成3個年齡組，分別是>20～40歲組、>40～60歲組、>60歲組。

1.2儀器與試劑 Sysmex XN-1000全自動血細胞分析儀及配套試劑，儀器定期接受校準，本研究中涉及所有參數常年參加Sysmex全球在線質控，成績良好。

1.3標本采集和檢測 采集受試者空腹靜脈血液2.0 mL，用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝。檢測Ret 7項參數(Ret#、Ret%、Ret-He、HFR、MFR、LFR、IRF)。從采樣到檢測2 h內完成。

2 結 果

2.1各年齡組間Ret參數的比較 不同年齡組間7項Ret參數比較，除Ret%和Ret-He差異無統計學意義外，其余參數比較差異均有統計學意義(P<0.01)。隨著年齡增長，Ret#、LFR降低，IRF、MFR、HFR增高(P<0.01)，其中Ret#的差異主要表現在>20～40歲組與>60歲組及>40～60歲組與>60歲組之間，其余參數的差異主要表現在>20～40歲組與>40～60歲組及>20～40歲組與>60歲組之間。分別比較成年男女不同年齡的Ret相關參數發現，隨年齡變化，Ret#的變化主要體現在成年男性中，其隨年齡增加而升高(P<0.01)。LFR、IRF、MFR、HFR的差異主要體現在成年女性中，LFR隨年齡增加而降低(P<0.01)，IRF、、MFR、HFR隨年齡增加而升高(P<0.01)。見表1～3。

表1 不同年齡組成人7項Ret參數比較[M(P25，P75)]

表2 不同年齡組成年男性7項Ret參數比較[M(P25，P75)]

表3 不同年齡組成年女性7項Ret參數比較[M(P25，P75)]

2.2各年齡組不同性別成人Ret各參數的比較 在>20～40歲組和>40～60歲組中，男女間均表現為除Ret%差異無統計學意義外，其余參數比較差異均有統計學意義(P<0.05)；其中，LFR為男性小于女性(P<0.01)，Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He均表現為男性大于女性(P<0.01)。在>60歲組中，則表現為男女間僅Ret-He參數男性大于女性(P<0.01)，其余參數差異均無統計學意義(P<0.05)。見表4～6。

表4 ＞20～40歲不同性別成人Ret參數比較[M(P25，P75)]

表5 ＞40～60歲不同性別成人Ret參數比較[M(P25，P75)]

表6 ＞60歲不同性別成人Ret參數比較[M(P25，P75)]

2.4參考區間的驗證 選擇2020年5月5-15日來本院健康體檢者血常規標本40份，其中男20例，女20例,對上述參考范圍進行驗證，檢測結果全部落在所建立的參考區間范圍內，驗證通過。

3 討 論

Ret相關參數對多種疾病的診斷、治療具有重要價值，包括評估腫瘤化療患者骨髓抑制和恢復情況、癌癥兒童缺鐵狀況、孕婦缺鐵狀況、炎癥性腸病兒童缺鐵情況、透析患者鐵代謝情況等[9-16]；尤其對貧血的鑒別診斷具有重要價值[17-19]；此外，Ret相關參數可監測骨髓移植后的造血功能[20]。

但多項研究結果顯示，不同地區人群由于地理環境、生活方式等差異，Ret相關參數存在較大差異[21-26]，目前中國南方健康成人的Ret相關參數參考區間鮮有報道。本研究對雅安地區健康成人的Ret相關參數進行研究發現，Ret參數在不同年齡組之間存在差異，其中Ret#的差異主要體現在>20～40歲組、40～60歲組和>60歲組的男性之間，成年男性Ret#隨年齡增加而降低，考慮主要與老年男性雄激素的部分缺乏引起促紅細胞生成素分泌減少有關。而IRF、MFR、HFR的差異主要體現在>20～40歲組女性低于>40～60歲組和>60歲組的女性，相反，LFR表現為>20～40歲女性高于>40～60歲組和>60歲組的女性，考慮與女性月經、內分泌因素有關。但此結果與李小龍等[27]的研究結果恰好相反，考慮可能因地域和研究人群不同引起。

對同一年齡組不同性別之間的Ret相關參數分析發現，>20～40歲組和>40～60歲組的Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He和LFR存在性別差異，其中Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He表現為男性高于女性，LFR表現為男性低于女性，這與成年男性RBC和Hb參考范圍均高于女性是一致的，且與樂家新等[28]的研究結論也相同。考慮可能與在這個年齡段，男性雄性激素水平較高，而睪酮有促進紅細胞生成作用有關[29]，且男性運動量普遍大于女性，而運動能刺激骨髓造血功能增生活躍，從而促進RBC更新代謝[30]，而MFR、HFR、IRF正是反映機體RBC生成的靈敏指標，其值越高，說明RBC代謝越旺盛。>60歲組中，Ret相關參數僅表現為Ret-He男性大于女性(P<0.000 1)，其余Ret相關參數則表現為在性別之間差異無統計學意義(P>0.05)，這可能是因為隨男女性步入老年以后內分泌生理因素、運動量在性別間的差異逐漸減小，因此Ret相關參數的差異也隨之消失。

此外，本研究結果顯示，Ret-He的成年男性[(26.3，37.2)pg]、成年女性[(24.1，36.1)pg]參考區間，與北京[31]成人男性[(29.25，33.83)pg]、成年女性[(29.25，33.83)pg]，以及深圳[32]成年男性[(32.96，39.28)pg]、成年女性[(31.11，36.99)pg]的參考區間有較大的差異，表現為參考區間下限值偏低，參考范圍變大，甚至和深圳[32]地區的缺鐵性貧血男性[(24.72±3.91)pg]、缺鐵性貧血女性[(22.63±3.76)pg]有較大重合部分，但高于汕頭[33]地區的缺鐵性貧血人群[16.70(14.32，19.70)pg]。這可能是因為本研究的人群為雅安地區人群，屬西南地區中小城市，而后者為北方、沿海等地，這充分說明了不同人群可能由于地理環境、生活方式及生理結構等因素的差異而導致機體內鐵含量的不同，從而導致不同人群Ret-He有所差異，甚至差異很大，因此建立不同地區實驗室的參考區間尤為重要。

綜上所述，Ret相關參數的參考區間因受地區、民族、性別、年齡、儀器等眾多種因素影響而不同，不同地區各實驗室應根據本地區人群建立適合自己實驗室的參考區間，若是使用不適合本地區的Ret相關參數參考區間，極易造成臨床誤診。因此，設置區域化的Ret相關參數參考區間對臨床診斷和療效判斷十分必要。本研究按照年齡和性別分組初步建立雅安地區健康成人Ret相關參數參考區間，已在本實驗室驗證，驗證全部通過，可推廣至雅安甚至川西地區驗證使用。