血清sCD54、presepsin水平對多發性骨髓瘤的診斷價值及與患者預后的關系

左立輝，李四強，秦 偉，韓紅滿

中國人民解放軍陸軍第八十二集團軍醫院血液內分泌科，河北保定 071000

多發性骨髓瘤是一種漿細胞惡性腫瘤，其特征表現為骨髓中克隆性漿細胞的惡性增殖[1]。據報道，多發性骨髓瘤約占血液系統惡性腫瘤的10%，男性發病率高于女性[2]。多發性骨髓瘤患者的中位發病年齡為65歲，<40歲患者占比不足3%[3]。多發性骨髓瘤的主要臨床表現是貧血、骨痛、病理性骨折、反復感染、高鈣血癥和腎衰竭。雖然蛋白酶體抑制劑、免疫調節藥物、自體干細胞移植和細胞免疫療法等針對多發性骨髓瘤的治療策略不斷改進，但由于多發性骨髓瘤的耐藥性和經常復發等特點，患者5年生存率仍然較低[4]。且多發性骨髓瘤發病隱匿，大多數患者出現感染、腎功能不全或骨痛等癥狀后才到醫院就診，容易誤診，錯過最佳治療時機。因此，篩選靈敏度、特異度高的生物標志物對早期發現多發性骨髓瘤、提高診斷和治療多發性骨髓瘤的水平及改善患者預后十分重要。CD54是介導黏附反應的重要黏附分子，有研究表明，可溶性CD54(sCD54)是一種重要的代表免疫激活和免疫反應的早期重要指標，同時對人內皮細胞的增殖具有重要作用[5]。可溶性CD14亞型(presepsin)是CD14的一種存在形式，既往研究發現，其對膿毒癥的診斷、評估及預后評價具有重要的臨床意義[6]。本研究通過檢測多發性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平，探討二者對多發性骨髓瘤診斷價值及與患者預后的關系，以期為多發性骨髓瘤的診治提供參考依據。現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年3月至2019年2月在本院就診住院的多發性骨髓瘤患者118例作為病例組。納入標準：(1)診斷符合《中國多發性骨髓瘤診治指南(2017年修訂)》[7]中多發性骨髓瘤的診斷標準；(2)臨床資料完整；(3)年齡18～80歲。排除標準：(1)入院前已經接受相關治療；(2)免疫性疾病及合并其他腫瘤；(3)病歷資料不全；(4)精神疾病；(5)嚴重肝、腎、心臟功能不全。另選取同期本院體檢健康者80例作為對照組。病例組中男68例，女50例；平均年齡(63.21±11.54)歲。對照組中，男45例，女35例；平均年齡(61.26±10.41)歲。兩組年齡與性別比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究獲得本院醫學倫理學委員會批準(倫理批號：倫審2017025)，所有研究對象知情同意并簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1標本采集 病例組在入院后第2天，對照組在體檢日早晨空腹采集外周靜脈血5 mL，室溫靜置30 min后，以3 000 r/min離心15 min，分離血清，-80 ℃保存備用。

1.2.2檢測方法 美國Bio-Tek ELX800多功能酶標儀檢測血清中sCD54、presepsin水平(試劑購自上海優寧維生物有限公司)：將sCD54、presepsin抗體稀釋至10 μg/mL，加入到酶標板中0.1毫升/孔，4 ℃過夜，洗滌3次，加入血漿標本和標準品0.1 mL，孵育1 h(37 ℃)，然后加入0.1 mL二抗，孵育1 h(37 ℃)，進行顯色，加入0.05 mL濃度為2 mol/L的硫酸終止反應，用酶標儀在450 nm處測各孔吸光度(A)值，制作標準曲線，計算血清中sCD54、presepsin水平。

1.2.3隨訪 治療康復出院后定期采用電話隨訪或者上門隨訪，隨訪頻率為每6個月隨訪1次，隨訪時間為2年終止，隨訪截止日期為2021年6月30日，記錄患者的存活情況。存活為預后良好，死亡為預后不良。

1.2.4國際分期體系(ISS分期) ISS分期是以血清β2-微球蛋白和清蛋白為基礎的分類。Ⅰ期：血清β2-微球蛋白<3.5 mg/L；清蛋白≥35 g/L。Ⅱ期：不符合Ⅰ期而又未達到Ⅲ期。Ⅲ期：血清β2-微球蛋白≥5.5 mg/L。

2 結 果

2.1兩組Ca2+、C反應蛋白、β2-微球蛋白水平比較 病例組Ca2+、β2-微球蛋白水平高于對照組，C反應蛋白水平低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組Ca2+、C反應蛋白、β2-微球蛋白水平比較

2.2兩組血清sCD54、presepsin水平比較 病例組血清sCD54、presepsin水平明顯高于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組血清sCD54、presepsin水平比較

2.3不同預后多發性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平比較 多發性骨髓瘤患者中，預后良好98例，預后不良20例，預后良好患者血清sCD54、presepsin水平低于預后不良患者(P<0.05)，見表3。

表3 不同預后情況多發性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平比較

2.4多發性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平與臨床病理特征指標的相關性分析 相關性分析結果顯示，血清sCD54、presepsin水平與年齡、ISS分期嚴重程度、Ca2+、β2-微球蛋白均呈正相關(r=0.426～0.723，P<0.05)，與C反應蛋白呈負相關(r=-0.572、-0.683，P<0.05)，見表4。

表4 多發性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平與臨床特征指標的相關性分析

2.5血清sCD54、presepsin水平對多發性骨髓瘤的診斷價值 血清sCD54、presepsin單項及聯合檢測診斷多發性骨髓瘤的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.784(95%CI：0.713～0.857)、0.674(95%CI：0.568～0.763)、0.832(95%CI：0.783～0.881)。當sCD54為310 ng/mL時，診斷多發性骨髓瘤的靈敏度為75.5%，特異度為81.3%；當presepsin為280 pg/mL時，診斷多發性骨髓瘤的靈敏度為67.2%，特異度為68.4%；二者聯合檢測診斷多發性骨髓瘤的靈敏度為80.5%，特異度為91.2%。見表5。

表5 血清sCD54、presepsin水平對多發性骨髓瘤的診斷價值

圖1 血清sCD54、presepsin水平診斷多發性骨髓瘤的ROC曲線

2.6血清sCD54、presepsin與多發性骨髓瘤患者預后關系的多因素Logistic回歸分析 多因素Logistic回歸分析結果顯示，sCD54在模型1(未校正前)、模型2(校正性別、年齡、Ca2+)、模型3(在模型2基礎上再校正C反應蛋白、β2-微球蛋白)的OR(95%CI)分別為1.887(1.191～2.991)、2.036(1.104～3.752)、2.087(1.676～2.600)，presepsin在模型1(未校正前)、模型2(校正性別、年齡、Ca2+)、模型3(在模型2基礎上再校正C反應蛋白、β2-微球蛋白)的OR(95%CI)分別為1.823(1.399～2.376)、1.747(1.479～2.064)、2.029(1.412～2.917)。sCD54、presepsin水平升高均是多發性骨髓瘤患者預后不良的獨立預測因素(P<0.05)，見表6。

表6 血清sCD54、presepsin與多發性骨髓瘤患者預后關系的多因素Logistic回歸分析

3 討 論

多發性骨髓瘤是一種常見的血液系統惡性腫瘤，目前還不能完全治愈，該病具有隱蔽性，不易及時發現，進而導致患者錯過治療的最佳時機。此外，多發性骨髓瘤的異質性明顯，疾病進展程度不同。部分有高危因素的多發性骨髓瘤患者生存率較低。因此，疾病的早期及時發現對改善多發性骨髓瘤患者預后具有重要意義。有研究顯示，sCD54可能是組織損傷、炎癥及蛋白水解的表現形式，通過抑制淋巴細胞與其他細胞的結合，進而限制淋巴細胞的功能，使機體免疫系統耐受[8]。有研究表明，感染患者中presepsin血漿水平明顯高于健康人群或非感染性全身炎癥反應綜合征患者，presepsin水平與降鈣素原(PCT)水平、序貫器官衰竭評分、急性生理與慢性健康評分Ⅱ均呈正相關[9]。本研究結果顯示，多發性骨髓瘤組血清sCD54和presepsin水平高于對照組，提示sCD54和presepsin可能參與了多發性骨髓瘤的病理生理過程。

sCD54與整合素家族成員LFA-1互為配基，屬于免疫球蛋白超家族成員之一。有研究證實，sCD54參與T細胞活化、殺傷腫瘤細胞等靶抗原及免疫效應細胞識別等[10]。據報道，sCD54是免疫激活和免疫反應早期重要指標之一[11]。其他研究證實，sCD54可作為結直腸癌診斷的分子標志物，其與直腸癌的發生密切相關，表現為sCD54在直腸癌患者中高表達，趨勢表達與本研究結果一致[12]。有研究表明，sCD54在機體內呈現低表達或不表達現象，而當炎性細胞分子攻擊或其他因素刺激機體后，sCD54則在多種細胞表面表達，從而促進炎癥的發生與發展[13]。ROC曲線分析發現，血清sCD54的AUC為0.784，最佳截斷值為310 ng/mL，靈敏度和特異度分別為75.5%和81.3%，表明血清sCD54在診斷多發性骨髓瘤時具有較高的價值，可以用來輔助診斷。有研究顯示，sCD54的作用類似于ICAM-1的單抗功能，可以阻止免疫細胞間的信號傳遞，使機體免疫監視功能降低，從而促進腫瘤的進展[14]。有研究發現，sCD54水平隨著患者腫瘤最大徑的增加而升高，但具體機制有待進一步研究[15]。本研究發現，多發性骨髓瘤患者血清sCD54與患者Ca2+、β2-微球蛋白呈正相關，提示較高水平血清Ca2+及β2-微球蛋白患者易出現sCD54水平升高。本研究發現，預后不良組sCD54水平明顯高于預后良好組，且多因素Logistic回歸模分析顯示，sCD54水平升高是多發性骨髓瘤患者預后不良的獨立危險因素，提示高水平sCD54患者預后較差。

有研究表明，presepsin血漿水平在嚴重膿毒癥到膿毒性休克、普通膿毒癥、全身炎癥反應綜合征患者中呈遞減趨勢[16]。動物實驗表明，presepsin產生于細菌感染的吞噬作用[17]。presepsin水平在內毒素休克模型中不見改變，但在盲腸結扎穿孔模型中顯著增高。有研究顯示，與白細胞介素-6和PCT相比，presepsin的ROC曲線的AUC在不同時間點更高，在整個病程中更具診斷優勢，presepsin與急診膿毒癥病死率評分相結合時診斷膿毒癥的AUC甚至更高[18]。本研究結果顯示，多發性骨髓瘤組presepsin水平明顯高于對照組，提示presepsin可能也是多發性骨髓瘤診斷的一種重要生物標志物。ROC曲線分析發現，血清presepsin的AUC為0.674，最佳截斷值下靈敏度和特異度分別為67.2%和68.4%，說明血清presepsin對輔助診斷多發性骨髓瘤具有一定的價值。本研究還發現，多發性骨髓瘤患者血清presepsin水平與患者的Ca2+、β2-微球蛋白水平呈正相關，提示較高水平血清Ca2+及β2-微球蛋白的患者易出現presepsin水平升高。同時發現預后不良組血清presepsin水平高于預后良好組，并且多因素Logistic回歸模分析顯示，presepsin水平升高是多發性骨髓瘤患者預后不良的獨立危險因素，提示高水平presepsin的多發性骨髓瘤患者預后較差。

綜上所述，多發性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin明顯升高，二者對多發性骨髓瘤具有一定的診斷價值，聯合應用診斷價值更高，血清sCD54、presepsin水平升高均是多發性骨髓瘤患者預后不良的獨立預測因子，有助于早期識別評估疾病嚴重程度，有望作為早期的分子生物標志物。