干擾素α2b聯合阿昔洛韋對病毒性肺炎患兒免疫功能的影響

李 佳, 王 維, 常 穎, 曹志偉, 劉新宇

(河北省唐山市婦幼保健院, 河北 唐山, 063000)

病毒性肺炎為兒科常見病、多發病，主要是因為急性上呼吸道病毒感染，從上至下蔓延直至肺部所發生的炎癥[1]。相關數據[2]統計證實，該病的發生率占非細菌性肺炎的25%～50%, 具有病情進展迅速、發病時間短、臨床癥狀非典型等特征。隨著臨床研究不斷深入，已有研究[3]證實免疫功能紊亂在病毒性肺炎發病機制中發揮獨特作用，表明病毒感染與細胞免疫間存在密切關聯。迄今為止，中國還沒有抗病毒的特效藥品，一般多采用抗病毒藥物及抗生素等對癥支持治療，病程較長[4]。干擾素α2b屬于廣譜抗病毒藥物，具有靶向性強、療效確切、操作方便等優點，對多種RNA和DNA病毒均有抑制作用[5]。阿昔洛韋是一種合成核苷酸類抗病毒制劑，分子量小，在血腦屏障中滲透性強，敏感性高，對于病毒具有專一性，毒副作用小，骨髓抑制作用不強，在臨床中適用范圍廣泛[6]。本研究探討干擾素α2b注射聯合阿昔洛韋對病毒性肺炎患兒免疫功能的影響。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2020年4月—2021年4月在河北省唐山市婦幼保健院就診的病毒性肺炎患兒150例，年齡3～9歲，男82例，女68例，發病至入院時間12～57 h，體質量10～55 kg，身高50～160 cm。采用隨機數字表法分為空白對照組、對照組和觀察組，每組50例。

納入標準: 符合《兒童病毒性肺炎中西醫結合診治專家共識》[7]診斷標準者; 存在咳嗽、氣促、發熱等癥狀表現者; 肺部聽診聞及濕啰音者; 肺部影像學檢查顯示肺內點狀/斑片狀滲出性病灶者; 實驗室檢查、痰液培養等檢查確診為呼吸道合胞病毒性肺炎者。本研究患兒監護人知情，且簽署知情同意書，并經過院倫理委員會批準。排除標準: 心、腎等臟器功能不全者; 其他非病毒性肺炎患兒; 伴有原發性心血管、肝、腎及造血系統疾病及重癥肺炎者; 對藥物過敏者; 合并其他呼吸道疾病者; 合并免疫障礙、凝血障礙等患者; 精神疾病者; 合并自身免疫性疾病、內分泌疾病者; 合并混合感染者。

1.2 方法

所有患兒均進行吸氧、抗感染、平衡水電解質、利尿、對癥藥物等常規基礎治療。空白對照組不接受任何抗病毒藥物治療。對照組在常規治療基礎上給予阿昔洛韋(國藥準字H20052414, 煙臺只楚藥業有限公司生產)治療，靜脈滴注10 mg/kg, 每隔8 h滴注1次; 觀察組在對照組的基礎上給予重組人干擾素α2b注射液(S20140012, Merck Sharp & Dohme Limited生產)聯合治療，肌肉注射3 IU/kg, 1次/d, 阿昔洛韋使用劑量與對照組相同。3組均連續治療7 d。

1.3 觀察指標

1.3.1 記錄臨床癥狀消失時間及住院時間相關指標: 記錄3組患兒咳嗽消失、喘息消失、退熱、濕啰音消失時間及住院時間，并進行組間比較。

1.3.2 免疫功能檢測: 分別于入院當日、治療7 d后采集3組患兒清晨空腹肘部靜脈血5 mL, 2 000轉/min離心處理5 min(離心半徑為13.5 cm), -20 ℃保存。采用流式細胞儀(廣州市元晞生物科技有限公司生產)檢測CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平。

1.3.3 炎性因子水平測定: 采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(ELIAS)測定，將血清樣本混于1% 牛血清白蛋白(BSA)的磷酸鹽緩沖液(PBS)中稀釋為工作濃度, 96孔板中加入100 μL/孔，覆蓋潔凈粘條, 4 ℃孵育過夜。去除孔內抗體，洗膜緩沖液(TBST)重復洗滌，加入200 μL 1% BAS的PBS溶液封閉反應2 h, 洗滌拍干。將96孔板中多余板條移除，在第1列中加入100 μL標準品，剩余的96孔板中加入100 μL樣品，覆蓋潔凈粘條，常溫孵育2 h。洗滌反應板拍打除去多余緩沖劑，每孔內加入血清淀粉樣蛋白A(SAA)、超敏C反應蛋白(hs-CRP)二抗，覆蓋粘條，常溫下孵育2 h, 洗滌反應板，加入100 μL底物溶液，粘條覆蓋，常溫孵育40 min, 每孔加入50 μL顯色液，孵育45 min, 加入50 μL中止液。ELISA試劑盒均購自上海恪敏生物科技有限公司，在酶標儀[賽默飛世爾科技(中國)有限公司]下測定具體數值，參照試劑盒和儀器說明書進行操作。

1.3.4 療效評定標準[8]: 療效以臨床癥狀消失時間、住院時間、免疫功能、血氣指標進行綜合評定。顯效：治療7 d后，臨床癥狀消失，指標達到正常; 好轉：治療7 d后，臨床癥狀明顯改善，血氣指標些許不正常; 無效：臨床癥狀未明顯改善甚至加重。臨床有效率=(顯效+好轉)/總例數×100%。不良反應發生率=(嘔吐+頭痛+眩暈+食欲不振)/總例數×100%。

1.3.5 患兒不良反應監測: 記錄患兒治療期間出現的嘔吐、頭痛、眩暈、食欲不振等不良事件發生情況，并進行組間比較。

1.4 統計學分析

2 結 果

2.1 患兒一般資料比較

患兒性別、年齡、病程、體質量、身高一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05), 具有可比性。見表1。

表1 患兒一般資料比較

2.2 患兒臨床癥狀改善、住院時間比較

觀察組患兒咳嗽消失、喘息消失、退熱、濕啰音消失時間及住院時間短于空白對照組、對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

d

2.3 患兒免疫功能比較

治療前, 3組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比較，差異無統計學意義(P>0.05)。治療后, 3組患兒CD3+、CD8+水平升高，CD4+、CD4+/CD8+水平降低，且觀察組CD3+、CD8+水平高于空白對照組、對照組，CD4+、CD4+/CD8+水平低于空白對照組、對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 3組患兒免疫功能比較

2.4 患兒血清炎性因子水平比較

治療前, 3組患兒血清SAA、hs-CRP水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。治療后, 3組患兒血清SAA、hs-CRP水平降低，且觀察組血清SAA、hs-CRP水平低于對照組、空白對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表4。

mg/L

2.5 患兒臨床療效比較

觀察組治療總有效率高于對照組、空白對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 患兒臨床療效比較[n(%)]

2.6 患兒不良反應發生情況比較

觀察組不良反應總發生率略高于對照組，但差異無統計學意義(P>0.05)。見表6。

表6 患兒不良反應發生情況比較[n(%)]

3 討 論

研究[9-10]表明，小兒肺炎中病毒性肺炎占比呈逐年遞增趨勢。咳嗽、發熱、呼吸困難及肺部濕啰音等作為病毒性肺炎主要表現，若未及時接受有效治療，可進展為重癥肺炎，累及患兒循環、消化及神經系統而出現相應的癥狀，對患兒生長發育造成嚴重威脅。

研究[11]表明，病毒侵入呼吸道后，造成支氣管上皮細胞受損，纖毛運動障礙，破壞呼吸道防御功能、中性粒細胞吞噬功能，致使肺炎發生。阿昔洛韋能夠在進入病毒細胞后，經磷酸化形成阿昔洛韋活化型三磷酸酯，干擾病毒DNA多聚酶的形成，從而抑制病毒復制過程[12]。同時，在病毒DNA多聚酶的作用下，三磷酸酯與增長DNA鏈互相結合，阻止DNA鏈延伸，被迫中斷，導致病毒復制無法順利進行[13]。但有學者[14]指出，阿昔洛韋單一藥物治療療效欠佳，需聯合其他藥物提高臨床療效。干擾素α2b是病毒進入機體后誘導宿主細胞產生的反應物，局部應用于病變部位，具有促使病變部位及其鄰近細胞抵抗病毒感染和增強免疫功能的作用[15]。本研究結果顯示，兩種藥物聯合治療對患兒咳嗽、喘息、濕啰音消失、退熱及住院時間等癥狀改善時間具有良好的促進作用，表明藥物聯合應用可有效提高臨床療效，分析原因可能與干擾素α2b聯合阿昔洛韋協同發揮良好抗病毒作用外，對患兒機體免疫力產生調節作用，促進疾病轉歸。

臨床研究[16-17]證實，免疫功能異常在兒童病毒性肺炎的發病機制中具有重要作用。CD3+、CD4+作為機體細胞免疫的主要組成部分，其水平變化可影響免疫功能調節。而CD8+作為細胞毒性T細胞，對CD4+具有抑制作用[18]。相關研究[19]表明，正常情況下, T淋巴細胞及其亞群的數目處于平衡狀態，一旦T淋巴細胞總數或者CD4+/CD8+發生變化，可引發免疫功能紊亂，對機體健康造成影響。本研究顯示，病毒性肺炎患兒外周血CD3+、CD8+較低, CD4+、CD4+/CD8+較高，提示患兒機體免疫失衡可促進病毒性肺炎發生。經干擾素α2b聯合阿昔洛韋治療后，患兒血清CD4+、CD4+/CD8+水平降低, CD3+、CD8+升高，且藥物聯合應用療效優于應用單一抗病毒藥物治療，表明干擾素α2b聯合阿昔洛韋有助于提高患兒的機體免疫能力，療效顯著。

本研究發現，干擾素α2b、阿昔洛韋聯合治療小兒病毒性肺炎，患兒血清SAA、hs-CRP水平降低，由此推測炎性反應可能參與病毒性肺炎病理、生理的發生發展過程。SAA、hs-CRP同作為炎性因子，均由肝臟分泌，并在感染過程中具有相似初始動力學，當機體被感染時，其被大量釋放入血，致使白細胞吞噬功能增加，使機體處于炎性狀態，加重組織損傷[20]。相關學者[21]指出, SAA、hs-CRP在病毒性肺炎患兒外周血中呈異常高表達，重組人干擾素α2b治療后, SAA、hs-CRP水平降低，提示降低機體炎癥反應對促進機體康復具有重要作用。本研究以干擾素α2b、阿昔洛韋治療小兒病毒性肺炎，血清SAA、hs-CRP水平降低，機體炎癥反應減輕，且藥物聯合治療療效優于單純阿昔洛韋治療，表明上述藥物聯合可有效減輕病毒性肺炎患兒機體炎癥程度，幫助促進疾病轉歸，由此證實藥物聯合治療方案的可行性。

綜上所述，干擾素α2b聯合阿昔洛韋對小兒病毒性肺炎進行治療，有效縮短患兒的臨床癥狀消失時間及住院時間，減輕機體炎癥反應，提高機體免疫能力，促進機體康復，分析其機制可能通過干預血清中T淋巴細胞、SAA、hs-CRP等因子水平，進而改善患者機體炎性浸潤。但本研究樣本納入較少，且未進行預后隨訪，致使研究具有一定局限性，結果數據可能存在偏倚，還需進一步擴大樣本量進行多中心研究證實。