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不同方法炮制白芍的芍藥苷含量檢測對比及其鎮痛效果比較

2022-05-23 04:47:06卜家福
中國藥學藥品知識倉庫 2022年9期
關鍵詞:高效液相色譜

卜家福

摘要: 目的 研究不同方法炮制白芍的芍藥苷含量以及鎮痛效果。方法 選擇高效液相色譜法測定生品、炒、醋制、酒制、麩炒的白芍,測定其中芍藥苷含量,比較不同方法炮制白芍的芍藥苷含量,另在2021年7月選擇雄性小鼠30只作為觀察對象,分析不同方法炮制白芍的扭體次數,最后通過Pearson計算不同炮制品的芍藥苷含量與扭體次數的相關性。結果 生品的芍藥苷含量高出炒制、醋制、酒制、麩炒,但炒制低于生品、醋制、酒制、麩炒(P<0.05)。生品、炒制組的扭體次數高出醋制、酒制、麩炒(P<0.05)。經Pearson計算,發現不同炮制品的芍藥苷含量與扭體次數并無相關性(P<0.05)。結論 不同方法炮制白芍的芍藥苷含量存在較大差異,且鎮痛效果與芍藥苷含量并無關聯,臨床應根據實際需求選擇合適的炮制方式。

關鍵詞:鎮痛效果;白芍;芍藥苷;高效液相色譜

【中圖分類號】 R282 【文獻標識碼】 A? ? ? 【文章編號】2107-2306(2022)09--01

白芍作為臨床常見的中草藥,也是毛莨科植物芍藥的干燥根,味苦性溫,并具備養血調經、收斂止痛的作用,通常被運用于腹痛、肢痛、血虛、肋痛等疾病的治療中,且取得過一定的應用價值。目前,臨床除了生白芍之外,還可通過不同炮制方法制備白芍,從而導致其功效出現較大差異[1]。從現代醫學上看,白芍以芍藥苷為主要成分,其存在一定抗炎以及鎮痛的作用,因此白芍及炮制品在藥方中通常發揮鎮痛功效,其中芍藥苷成為判斷白芍質量的重要指標[2]。若能夠完全掌握不同方法炮制白芍的芍藥苷含量,并了解其鎮痛作用,可為臨床治療提供一定指導價值。本文對此展開試驗,選擇高效液相色譜法測定生品、炒、醋制、酒制、麩炒的白芍,測定其中芍藥苷含量,另選擇雄性小鼠30只作為觀察對象,分析不同方法炮制白芍的鎮痛效果,結果如下:

1 資料與方法

1.1 儀器與設備

2021年7月選擇雄性小鼠30只,體重17-21g,平均體重(19.51±0.33)g,另選擇白芍(購自江蘇亞泰五洲藥業),芍藥苷對照品,甲醇,對乙酰氨基酚片,乙腈,乙酸,高效液相色譜儀(南京科捷分析儀器有限公司)。

1.2 方法

選擇蒸餾水清洗生白芍,常規切片并干燥,經炒(清炒)、醋制(使用米醋浸泡12h)、酒制(使用白酒浸泡12h)、麩炒(取適量與麩皮炒)不同方式進行炮制,直至白芍切面呈現微黃色后停止,等待其冷卻,常規干燥,不同方式均炮制白芍500g。

取不同炮制品的粉末(0.65g),加入甲醇置于容量瓶,搖晃均勻后常溫下靜置,30min后選擇超聲處理,時間30min,等待其自然冷卻后加入適量甲醇,定容,搖晃均勻,過濾。同時制備對照品,選擇干燥的芍藥藥苷(0.35g)放在容量內,加入甲醇,定容。

選擇高效液相色譜儀以及250mm*4.5mm、5μm的C18反相色譜柱,乙腈-水為流動相,檢測波長230nm,柱溫30攝氏度,流速1.0ml/min。另外選擇2、4、6、8、10、12μl對照品,得到峰面積及濃度,制作標準曲線,開展重復實驗。再取樣本與對照品測定樣品回收率,檢測不同炮制方法白芍的芍藥苷含量,重復三次。

將30只小鼠進行隨機分組,分別是生品、炒、醋制、酒制、麩炒、空白對照組,各組5只,選擇0.3%醋酸溶液經皮下注入小鼠頸背部,其中對照組選擇蒸餾水以0.3ml/10g蒸餾水灌胃,剩余組煎煮30g炮制品至30ml,以0.3ml/10g蒸餾水灌胃。統計15min之內小鼠的扭體次數,以此評價鎮痛效果。

1.3 觀察指標

比較不同方法炮制白芍的芍藥苷含量,同時分析不同方法炮制白芍的扭體次數,最后通過Pearson計算不同炮制品的芍藥苷含量與扭體次數的相關性。

1.4 統計學處理

全文數據選擇SPSS 20.0系統計算,x±s為計量數據,選擇t檢驗;百分比為計數數據,選擇χ2檢驗,P<0.05為數據存在統計學差異。選擇Pearson計算相關性,P<0.05表示有相關性。

2 結果

2.1 不同方法炮制白芍的芍藥苷含量

生品的芍藥苷含量高出炒制、醋制、酒制、麩炒,但炒制低于生品、醋制、酒制、麩炒(P<0.05)。見表1。

2.2 不同方法炮制白芍的扭體次數

生品、炒制組的扭體次數高出醋制、酒制、麩炒(P<0.05)。見表2。

2.3 相關性分析

經Pearson計算,發現不同炮制品的芍藥苷含量與扭體次數并無相關性,r=0.023,p=0.082。

3 討論

白芍作為毛茛科芍藥屬植物,廣泛種植于國內各地區,且存在悠久的種植歷史,被廣泛運用于臨床治療中。其中芍藥苷作為白芍主要成分,存在保肝護肝、退熱解痙的作用。而生白芍的功效為補陰強肝、斂固止痛,其作用受到芍藥苷含量的影響[3]。一旦經過炒制后,其中芍藥苷明顯減少,從而導致其藥效更加平穩,且滋陰養血的效果更為突出,被廣泛應用于疲弱陰虛、肝火旺盛的疾病治療中[4]。而酒炒白芍的鞣質、多糖增加,可明顯增強調節免疫以及抗氧化的作用,同時可發揮鎮痛效果,加速芍藥苷起效,尤其適用于產后鎮痛。醋炒后可進入肝經,進一步提升柔肝止痛以及疏肝解郁的效果。最后麩炒白芍的酸痛作用明顯,同時可增強柔肝以及養肝效果[5]。由此可見,白芍的作用機制較多且復雜,在臨床治療上具備極大優勢。因此掌握不同方法炮制白芍的芍藥苷含量及鎮痛效果,可為指導臨床治療提供重要價值。

曾有報道表示[6],不同方法炮制的白芍可能存在不同的功效,其可能與白芍主要成分有關。但目前相關報道較少,本文對此進行試驗,結果顯示:生品的芍藥苷含量高出炒制、醋制、酒制、麩炒,但炒制低于生品、醋制、酒制、麩炒(P<0.05);生品、炒制組的扭體次數高出醋制、酒制、麩炒(P<0.05);經Pearson計算,發現不同炮制品的芍藥苷含量與扭體次數并無相關性(P<0.05),提示不同方法炮制白芍的芍藥苷含量差異明顯,且鎮痛效果與芍藥苷含量并無關聯。經分析發現,芍藥苷含量可能隨著不同炮制方法而逐漸減少,其中生品、炒制、醋炒、酒炒白芍可直接作用在離體兔腸,且自發振幅、收縮活動逐漸增強,同時隨著藥物劑量的不斷增多而隨之升高,并有效抑制腎上腺素性腸管蠕動[7-8]。另外上述表格中看到,炒制白芍的芍藥苷含量較低,但其小鼠扭體次數與生品更為接近,證實芍藥苷含量與鎮痛效果并無關系,還需臨床在使用期間按照實際需要選擇更為適宜的炮制方法[9]。

綜上所述,不同方法炮制白芍的芍藥苷含量存在較大差異,且鎮痛效果與芍藥苷含量并無關聯,臨床應根據實際需求選擇合適的炮制方式。

參考文獻:

[1]劉亮鏡,徐斌,張強.白芍炮制過程中的美拉德反應及芍藥苷的變化[J].中華中醫藥學刊,2020,38(3):74-77,后插6.

[2]丁妍,孔銘,徐亞運,等.炮制對硫熏白芍飲片檢控指標的影響[J].東南國防醫藥,2022,24(1):50-53.

[3]于定榮,鄧志灝,翁小剛,等.炮制加工對白芍中9個成分含量的影響[J].中藥材,2020,43(12):2909-2913.

[4]王楊,甄臻,隆毅,等.基于顏色變化的酒白芍質量標準及炮制工藝研究[J].中藥材,2020,43(9):2141-2145.

[5]馬靈珍,馬亞利,劉耀武.白芍不同炮制工藝優選[J].遼寧中醫藥大學學報,2019,21(2):69-73.

[6]熊賢兵,關媛媛,張凌.微波消解-火焰原子吸收光譜法測定白芍及其炮制品中5種微量元素的含量[J].中南藥學,2021,19(1):118-122.

[7]梁偉,董烜彤.中藥復方炮制液中芍藥苷含量高效液相色譜法快速檢測研究——評《中藥材高效液相色譜檢定》[J].分析測試學報,2020,39(1):后插2.

[8]熊哲,謝家璇,朱鯤博,等.芍藥苷調控酸敏感離子通道發揮鎮痛作用[J].醫藥導報,2019,38(11):1403-1407.

[9]林秀敏,張振凌,王勝超,等. 白芍飲片的HPLC指紋圖譜建立及聚類分析、主成分分析[J]. 中國藥房,2019,30(24):3375-3382.

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