懷姜的化學成分及其抗炎活性研究

廖懷玉，韓佳穎，韓紅園，劉文波，常 霞，楊 靜，張海艷，趙天增

河南省科學院 天然產物重點實驗室,鄭州 450002

懷姜為姜科姜屬植物姜(ZingiberofficinaleRoscoe)的新鮮根莖，產自古懷慶府，為河南省焦作市博愛縣特產，河南省省級非物質文化遺產，中國國家地理標志產品。主產于博愛縣北部的清化、月山(上莊)、柏山、徐良等鄉鎮和沁陽市山王莊鎮一帶，栽培迄今已有1 600多年的歷史。博愛縣土地疏松肥沃，雨量充沛，光照充足，氣候溫和，獨特的自然環境非常適宜懷姜的生長。懷慶府盛產的生姜，是同類生姜中的佼佼者，塊節緊湊、絲細色黃、味道鮮辣、質地致密，具有抗寒、健胃、發汗、祛病之功效。用于感冒風寒，嘔吐，痰飲等疾病的治療。

目前，對懷姜的研究集中在種植、栽培、營養成分等方面，系統的化學成分組研究未見報道[1-4]。為闡明懷姜的藥效物質基礎，為懷姜的開發利用提供理論基礎，本課題組首次對懷姜化學成分進行系統分離，并采用1D(1H NMR、13C NMR、DEPT)和2D(1H-1H COSY、HSQC、HMBC、NOESY)核磁共振技術對化合物進行結構鑒定[5-8]，共鑒定了12個化合物(見圖1)。植物姜屬于藥食兩用類植物，經口毒性實驗證明生姜屬于無毒級物質。姜辣素是植物姜的主要化學成分，具有3-甲氧基-4-羥基苯基結構單元，有較強的抗炎活性。有研究表明化合物6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、6-姜烯酚具有抗炎活性并且有了較為深入的研究[9]。故而選擇分離鑒定出的部分化合物進行抗炎活性篩選。為懷姜的開發利用及抗炎新藥的研發提供參考。

圖1 化合物1～12的化學結構

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Bruker ARX-400 型核磁共振儀(瑞士Bruker公司，TMS內標)；正向硅膠(200～300目)；GF254薄層色譜硅膠(青島海洋化工)；Waters 600E型分析半制備高效液相色譜(美國Waters公司)；SunFire?C18OBD制備色譜柱(10 mm×250 mm，5 μm，美國Waters公司)；FS-8200S型中壓快速純化制備系統(天津艾杰爾科技有限公司)；RP-18(Germany，40～63 μm)；其他試劑均為分析純。

1.2 材料

懷姜采自河南省博愛縣月山鎮，經河南省中醫藥研究院張留記教授鑒定為姜科姜屬多年生草本植物姜(ZingiberofficinaleRoscoe)的新鮮根莖。

1.3 實驗方法

1.3.1 提取與分離

取懷姜10 kg，切碎，用10倍量70%乙醇回流提取3次，每次提取2 h，合并提取液減壓濃縮得浸膏，將浸膏混懸于水中，使用乙酸乙酯萃取3次，得到乙酸乙酯萃取物170 g。乙酸乙酯部位經正向硅膠色譜柱(200～300 目)，使用石油醚-乙酸乙酯(100∶1→1∶9)進行梯度洗脫，在100∶1洗脫部位得到化合物1(15.6 mg)。TLC檢識合并相同餾分，得到組分 Fr.1～Fr.5。Fr.1通過RP-18硅膠柱柱層析，以乙腈-水(30∶70→60∶40)梯度洗脫，得到4個組分Fr.1-1～Fr.1-4，Fr.1-1經分析半制備高效液相色譜用乙腈-水(60∶40)得到化合物2(218.6 mg，tR= 50 min)。Fr.2經分析半制備高效液相色譜用乙腈-水(80∶20)得到化合物3(20.5 mg，tR= 42 min)。Fr.3經分析半制備高效液相色譜用乙腈-水(65∶35)得到化合物4(110.0 mg，tR= 14 min)、5(130.0 mg，tR= 20 min)、6(8.8 mg，tR= 30 min)、化合物7(11.8 mg，tR= 66 min)、8(12.3 mg，tR= 53 min)。Fr.4通過RP-18硅膠柱，以乙腈-水(10∶90→60∶40)梯度洗脫，得到Fr.4-1～Fr.4-6，Fr.4-5為化合物9(122.2 mg)，Fr.4-3經分析半制備高效液相色譜用乙腈-水(25∶75)得到化合物10(6.5 mg，tR= 76 min)。Fr.5經分析半制備高效液相色譜用乙腈-水(55∶45)得到化合物11(211.0 mg，tR= 36 min)、12(7.7 mg，tR= 90 min)。

1.3.2 抗炎活性篩選

RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞，置于37 ℃，5% CO2的培養箱中孵育。于96孔細胞培養板中每孔加入100 μL細胞懸液，6×10個細胞/孔，將培養板置于CO2培養箱中培養12 h。棄上清，加入50 μL含藥培養液，每個單體設4個濃度(5、10、15、20 μM)，每個濃度設3個平行孔，另設正常對照孔。2 h后，加入50 μL脂多糖溶液，脂多糖終濃度為0.5 μg/mL。加藥后，培養板于微孔板振蕩器上振蕩混勻，置于37 ℃、CO2培養箱中繼續培養24 h。吸取培養液上清50 μL，根據說明書進行NO含量檢測，用酶標儀于540 nm處測定吸光度值，繪制標準曲線，計算樣品中NO含量。所得結果用軟件GraphPad Prism 8.0.1處理。

2 結果與分析

2.1 結構鑒定

化合物1無色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：5.30(1H，m，H-5)，4.74(1H，m，H-12b)，4.71(1H，m，H-12a)，2.23(1H，m，H-6)，1.96(1H，m，H-7)，1.96(2H，m，H-3)，1.85(1H，m，H-2b)，1.71(3H，s，C-13)，1.71(1H，m，H-10)，1.62(3H，s，C-15),1.60(1H，m，H-8b)，1.60(1H，m，H-9b)，1.60(1H，m，H-1)，1.33(1H，m，H-2a)，1.30(1H，m，H-8a)，1.30(1H，m，H-9a)，1.03(3H，d，J=6.8 Hz，H-14)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：39.1(C-1)，25.7(C-2)，30.5(C-3)，133.4(C-4)，125.6(C-5)，34.6(C-6)，48.1(C-7)，26.2(C-8)，27.8(C-9)，32.9(C-10)，148.7(C-11)，110.2(C-12)，20.3(C-13)，19.5(C-14)，23.6(C-15)。以上數據與文獻[10]對照一致，故鑒定化合物1為(-)-muurola-4,11-diene。

化合物2無色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.71(2H，m，H-7，7′)，7.52(2H，m，H-8，8′)，4.31(4H，t，J=6.8Hz，H-2，2′)，1.72(4H，m，H-3，3′)，1.44(4H，m，H-4，4′)，0.96(6H，t，J=6.8 Hz，H-5，5′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：167.7(C-1，1′)，65.5(C-2，2′)，30.5(C-3，3′)，19.2(C-44′)，13.7(C-5，5′)，132.3(C-6，6′)，128.8(C-7，7′)，130.9(C-8，8′)。以上數據與文獻[11]對照一致，故鑒定化合物2為鄰苯二甲酸二丁酯。

化合物3無色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.82(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.70(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.68(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6′)，5.33(1H，dq，J=6.4，1.2 Hz，H-2′′)，5.18(1H，d，J=6.4 Hz，H-1′′)，5.11(1H，tq，J=6.8，1.2 Hz，H-6′′)，3.86(3H，s，3′-OCH3)，3.62(1H，m，H-5)，3.62(1H，m，H-3)，2.72(1H，m，H-1b)，2.62(1H，m，H-1a)，2.12(2H，m，H-5′′)，2.05(2H，m，H-4′′)，1.90(1H，m，H-2b)，1.74(3H，d，J=1.2 Hz，1.70(1H，m，H-2a)，1.68(3H，br s，H-8′′)，1.60(1H，m，H-6b)，1.58(3H，br s，H-10′′)，1.50(1H，m，H-4b)，1.42(1H，m，H-6a)，1.42(1H，m，H-7b)，1.28(1H，m，H-7a)，1.28(1H，m，H-4a)，1.28(2H，m，H-8)，1.28(2H，m，H-9)，0.88(3H，t，J=6.8 Hz，H-10)，H-9′′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：30.9(C-1)，37.8(C-2)，75.4(C-3)，36.9(C-4)，76.5(C-5)，35.9(C-6)，24.7(C-7)，31.8(C-8)，22.6(C-9)，14.0(C-10)，133.9(C-1′)，111.0(C-2′)，146.4(C-3′)，143.7(C-4′)，114.2(C-5′)，121.0(C-6′)，98.6(C-1′′)，122.5(C-2′′)，142.3(C-3′′)，39.3(C-4′′)，26.2(C-5′′)，123.9(C-6′′)，131.7(C-7′′)，25.7(C-8′′)，17.4(C-9′′)，17.7(C-10′′)，55.8(3′-OCH3)。以上數據與文獻[12]對照一致，故鑒定化合物3為(2Z)-neral acetal-[6]-gingerdiol。

化合物4黃色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.81(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.67(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.64(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6′)，4.03(1H，m，H-5)，3.84(3H，s，3′-OCH3)，2.82(2H，A2B2系統-A2，J=6.4 Hz，H-1)，2.72(2H，A2B2系統-B2，J=6.4 Hz，H-2)，2.55(1H，ABX系統-B，J=17.2，3.2 Hz，H-4b)，2.50(1H，ABX系統-A，J=17.2，8.4 Hz，H-4a)，1.47(1H，m，H-6b)，1.42(1H，m，H-7b)，1.38(1H，m，H-6a)，1.38(1H，m，H-7a)，1.30(2H，m，H-9)，1.28(2H，m，H-8)，0.88(3H，t，J=6.8 Hz，H-10)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：29.3(C-1)，45.4(C-2)，211.5(C-3)，49.3(C-4)，67.7(C-5)，36.4(C-6)，25.1(C-7)，31.7(C-8)，22.6(C-9)，14.0(C-10)，132.6(C-1′)，111.1(C-2′)，146.5(C-3′)，144.0(C-4′)，114.5(C-5′)，120.7(C-6′)，55.9(3′-OCH3)。以上數據與文獻[13]對照一致，故鑒定化合物4為6-姜酚。

化合物5黃色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.82(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.81(1H，dt，J=15.9，7.1 Hz，H-5)，6.71(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.68(1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6′)，6.09(1H，dt，J=15.9，1.3 Hz，H-4)，5.58(1H，br s，4′-OH)，3.86(3H，s，3′-OCH3)，2.86(2H，J=7.0 Hz，H-1)，2.83(2H，J=7.0 Hz，H-2)，2.19(2H，dq，J=7.1，1.3 Hz，H-6)，1.44(2H，m，H-7)，1.30(2H，m，H-9)，1.28(2H，m，H-8)，0.89(3H，t，J=7.0 Hz，H-10)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：29.9(C-1)，41.9(C-2)，199.9(C-3)，130.3(C-4)，147.9(C-5)，32.4(C-6)，27.8(C-7)，31.3(C-8)，22.4(C-9)，13.9(C-10)，133.2(C-1′)，111.1(C-2′)，146.4(C-3′)，143.9(C-4′)，114.3(C-5′)，120.8(C-6′)，55.9(3′-OCH3)。以上數據與文獻[14]對照一致，故鑒定化合物5為6-姜烯酚。

化合物6黃色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.82(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.79(1H，dt，J=16.0，6.8 Hz，H-5)，6.71(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.68(1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6′)，6.09(1H，dt，J=16.0，1.2 Hz，H-4)，5.49(1H，s，5′-OH)，3.87(3H，s，3′-OCH3)，2.86(2H，J=7.0 Hz，H-1)，2.83(2H，J=7.0 Hz，H-2)，2.19(2H，dq，J=6.8，1.2 Hz，H-6)，1.44(2H，m，H-7)，1.28(8H，m，H-8，9，10，11)，0.88(3H，t，J=6.8 Hz，H-12)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：29.9(C-1)，42.0(C-2)，199.8(C-3)，130.3(C-4)，147.9(C-5)，32.5(C-6)，28.1(C-7)，29.1*(C-8)，29.0*(C-9)，31.7(C-10)，22.6(C-11)，14.1(C-12)，133.3(C-1′)，111.1(C-2′)，146.4(C-3′)，143.9(C-4′)，114.3(C-5′)，120.8(C-6′)，55.9(3′-OCH3)。以上數據與文獻[14]對照一致，故鑒定化合物6為8-姜烯酚。

化合物7黃色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.82(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.79(1H，dt，J=16.0，6.8 Hz，H-5)，6.71(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.68(1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6′)，6.09(1H，dt，J=16.0，1.2 Hz，H-4)，5.48(1H，s，5′-OH)，3.87(3H，s，3′-OCH3)，2.86(2H，J=7.0 Hz，H-1)，2.83(2H，J=7.0 Hz，H-2)，2.19(2H，dq，J=6.8，1.2 Hz，H-6)，1.44(2H，m，H-7)，1.26(12H，m，H-8，9，10，11，12，13)，0.88(3H，t，J=6.8 Hz，H-14)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：29.9(C-1)，42.0(C-2)，199.8(C-3)，130.3(C-4)，147.9(C-5)，32.5(C-6)，28.1(C-7)，29.2*(C-8)，29.3*(C-9)，29.5*(C-10)，29.4*(C-11)，32.5(C-12)，22.7(C-13)，14.1(C-14)，133.3(C-1′)，111.1(C-2′)，146.4(C-3′)，143.9(C-4′)，114.3(C-5′)，120.8(C-6′)，55.9(3′-OCH3)。以上數據與文獻[14]對照一致，故鑒定化合物7為10-姜烯酚。

化合物8黃色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.82(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.68(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.64(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6′)，5.51(1H，s，J=2.0 Hz，4′-OH)，4.02(1H，m，H-5)，3.87(3H，s，3′-OCH3)，2.93(1H，d，J=4.0 Hz，5-OH)，2.83(2H，J=7.1 Hz，H-1)，2.73(2H，J=7.1 Hz，H-2)，2.55(1H，J=17.4，3.0 Hz，H-4b)，2.49(1H，J=17.4，8.8 Hz，H-4a)，1.38(1H，m，H-6a)，1.48(1H，m，H-6b)，1.27(1H，br s，H-7a)，1.38(1H，m，H-7b)，1.27(12H，br s，H-8，9，10，11，12，13)，0.88(3H，t，J=8.0 Hz，H-14)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：29.3(C-1)，45.4(C-2)，211.4(C-3)，49.4(C-4)，67.7(C-5)，36.5(C-6)，25.5(C-7)，29.5*(C-8)，29.5*(C-9)，29.5*(C-10)，29.6*(C-11)，31.9(C-12)，22.7(C-9)，14.1(C-14)，132.6(C-1′)，111.0(C-2′)，146.4(C-3′)，144.0(C-4′)，114.4(C-5′)，120.8(C-6′)，55.9(3′-OCH3)，其中*歸屬可互換。以上數據與文獻[14]對照一致，故鑒定化合物8為10-姜酚。

化合物9黃色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.81(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.69(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.66(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6′)，3.86(3H，s，3′-OCH3)，2.82(2H，t，J=7.6 Hz，H-1)，2.69(2H，t，J=7.6 Hz，H-2)，2.37(2H，t，J=7.6 Hz，H-4)，1.54(2H，m，H-5)，1.25(8H，m，H-6，7，8，9)，0.87(3H，t，J=7.2 Hz，H-10)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：29.6(C-1)，44.6(C-2)，210.8(C-3)，43.2(C-4)，23.8(C-5)，29.2(C-6)，29.1(C-7)，31.7(C-8)，22.6(C-9)，14.1(C-10)，133.1(C-1′)，111.1(C-2′)，143.9(C-3′)，146.5(C-4′)，114.4(C-5′)，120.8(C-6′)，55.9(3′-OCH3)。以上數據與文獻[14]對照一致，故鑒定化合物9為6-paradol。

化合物10褐色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.83(1H，d，J=8.0 Hz,H-5′)，6.71(1H，d，J=1.6 Hz，H-2′)，6.64(1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-6′)，4.13(2H，q，J=6.8 Hz，H-4)，3.87(3H，s，3′-OCH3)，2.88(2H，t，J=7.6 Hz，H-1)，2.56(2H，t，J=7.6 Hz，H-2)，1.24(3H，t，J=6.8 Hz，H-5)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：30.7(C-1)，36.4(C-2)，173.0(C-3)，60.4(C-4)，14.2(C-5)，132.5(C-1′)，111.0(C-2′)，146.4(C-3′)，55.9(3′-OCH3)，144.0(C-4′)，114.3(C-5′)，120.9(C-6′)。以上數據與文獻[15]對照一致，故鑒定化合物10為dihydroferulic acid ethyl ester。

化合物11黃色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.81(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.66(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.63(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6′)，4.94(1H，m，H-5)，4.94(1H，m，H-3)，3.86(3H，s，3′-OCH3)，2.55(2H，m，H-1)，2.05(3H，s，5-OAc)，1.99(3H，s，3-OAc)，1.89(2H，m，H-2)，1.89(1H，m，H-4b)，1.75(1H，dt，J=8.4，5.6 Hz，H-4a)，1.51(2H，m，H-6)，1.25(6H，m，H-7，8，9)，0.87(3H，t，J=6.8 Hz，H-10)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：31.2(C-1)，35.9(C-2)，70.9(C-3)，38.4(C-4)，71.2(C-5)，34.2(C-6)，24.7(C-7)，31.5(C-8)，22.5(C-9)，13.9(C-10)，133.1(C-1′)，111.1(C-2′)，146.5(C-3′)，143.9(C-4′)，114.4(C-5′)，120.8(C-6′)，170.7*[3-OAc(C=O)]，21.1**[3-OAc(CH3)]，170.8*[5-OAc(C=O)]，21.2**[5-OAc(CH3)]，55.8(3′-OCH3)，其中*歸屬可互換，**歸屬可互換。以上數據與文獻[16]對照一致，故鑒定化合物11為(3R,5S)-3,5-diacetoxy-1-(4-hydroxy-3- methoxy- phenyl)decane。

化合物12黃色油狀物;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：9.66(1H，s，CHO)，7.68(2H，d，J=8.4 Hz，H-2，6)，6.82(2H，J=8.4 Hz，H-3，5)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：192.9(CHO)，165.3(C-4)，133.5(C-2，6)，130.3(C-1)，116.9(C-3，5)。以上數據與文獻[17]對照一致，故鑒定化合物12為p-hydroxybenzaldehyde。

2.2 活性測試結果

Dugasani[18]研究發現6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、6-姜烯酚可以抑制脂多糖誘導的炎癥細胞產生NO，發揮其抗炎功效，6-姜酚、8-姜酚可以抑制其NO的產生(P<0.05)，10-姜酚可以顯著抑制NO的產生(P<0.01)，6-姜烯酚有極其顯著抑制NO的產生(P<0.001)。本實驗采用脂多糖(LPS)誘導的RAW 264.7細胞炎癥模型[19-21]，以吲哚美辛為陽性對照，對懷姜中分離得到的化合物1、3、6、7、9、11進行了抗炎活性篩選，結果化合物3(IC50=13.16 μg/mL)、6(IC50=1.63 μg/mL)、9(IC50=2.38 μg/mL)、11(IC50=6.56 μg/mL)對LPS誘導的炎癥細胞中NO的產生有明顯的抑制作用，表現出比陽性對照吲哚美辛(IC50=15.84 μg/mL)更強的抗炎活性(見表1)。

表1 化合物1、3、6、7、9和11的體外抗炎活性

3 討論與結論

植物姜中主要含有揮發油、姜辣素、二苯基庚烷類化合物[22]。本研究首次對懷姜的化學成分進行了系統分離，從懷姜的乙酸乙酯部位分離得到12個化合物，包含1個倍半萜類化合物，2個羧酸酯類化合物，8個姜辣素類化合物及1個其他類化合物，其中8個姜辣素成分為2個姜酚、3個姜烯酚、1個副姜油酮、2個姜辣二醇。除化合物5之外，其余11個化合物均為首次從懷姜中分離得到，4個化合物為首次從姜屬植物中分離得到。

在LPS誘導的炎癥細胞中，一氧化氮合酶(iNOS)表達增加，催化NO生成，進而促使細胞分泌炎癥標志因子腫瘤壞死因子(TNF-α)，TNF-α誘導白細胞介素-1(IL-1)和白細胞介素-6(IL-6)表達釋放，使炎性損傷的級聯效應放大，從而進一步加劇炎癥反應[19]。生姜提取物可以通過降低iNOS和環氧化酶-2(COX-2)的mRNA表達抑制LPS誘導的炎癥細胞NO和前列腺素E2(PGE2)釋放增加，進一步下調炎癥因子的表達，減少炎癥因子的釋放，發揮抗炎功效[9]。姜辣素類化合物對炎癥介質(NO和PGE2)的產生有明顯的抑制作用，且呈明顯的劑量依賴性；濃度為6 μM時，6-姜烯酚對產生NO和PGE2的抗炎抑制作用優于10-姜酚，10-姜酚對產生NO和PGE2的抗炎抑制作用優于6-姜酚、8-姜酚；姜酚的碳鏈長度影響其抗炎活性，不飽和酮結構使得姜烯酚抗炎活性優于姜酚[18]。Van Breemen等[23]使用純化的人類重組蛋白環氧化酶-1(COX-1)、環氧化酶-2(COX-2)代替細胞實驗方法，發現8-姜烯酚、10-姜烯酚和10-姜酚通過抑制COX-2而非抑制COX-1的產生發揮抗炎作用；濃度為1.3 μM時，10-姜烯酚比8-姜烯酚對COX-2的抑制作用更強。本研究選取化合物(-)-muurola-4,11-diene、(2Z)-neral acetal-[6]-gingerdiol、8-姜烯酚、10-姜烯酚、6-paradol、(3R,5S)-3,5-diacetoxy-1-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)decane，以脂多糖(LPS)誘導的RAW 264.7細胞炎癥為模型，以NO含量為評價指標，吲哚美辛為陽性對照，評價化合物的抗炎活性；結果顯示，化合物(2Z)-neral acetal-[6]-gingerdiol、8-姜烯酚、6-paradol、(3R,5S)-3,5-diacetoxy-1-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)decane與吲哚美辛相比均具有更強的抗炎活性，其中8-姜烯酚的抗炎活性優于化合物(2Z)-neral acetal-[6]-gingerdiol、6-paradol、(3R,5S)-3,5-diacetoxy-1-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)decane。本文抗炎活性研究以抑制iNOS的表達，降低LPS誘導的炎癥細胞NO的釋放，進而起到抗炎的功效，證實8-姜烯酚具有良好的抗炎活性，可能是開發治療炎癥疾病的良好候選藥物。本研究不僅豐富了懷姜的化學結構信息，為其抗炎活性的研究提供依據，也為懷姜的開發利用提供基礎。

致謝：鄭州大學分析測試中心的朱衛國老師幫助進行核磁共振儀樣品測試，中國醫學科學院藥物研究所的秦海林研究員團隊幫助進行抗炎活性篩選，在此特致謝意！