文山三七的皂苷含量與商品規格劃分的相關性研究

李秋葉，陳麗莎，張玉潔

（1.文山州食品藥品檢驗研究院，云南 文山 663099；2.文山學院 文山三七研究院，云南 文山 663099）

三七為五加科植物三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen的干燥根和根莖，是我國傳統的名貴中藥材。“文山三七”作為國家地理標志產品受到了人們的廣泛認可。《七十六種藥材商品規格標準》中將三七劃分為春三七和冬三七兩種規格，并分別將這兩種規格劃分為13個等級[1]；劉大會等將三七藥材按照不同部位和采收時間劃分為主根（又分春七和冬七）、筋條和剪口4種規格，春七和冬七又按個頭大小簡化為20頭、30頭、40頭、60頭、80頭、無數頭和等外8個等級[2]；《中華人民共和國藥典》里收載的三七為秋季花開前采挖，洗凈，分開主根、支根及根莖，干燥。支根習稱“筋條”，根莖習稱“剪口”[3]；春三七為摘除花苔后采挖的三七，冬三七為留種后采挖的三七[4]；由此可見《中華人民共和國藥典》里收載的三七為春三七。春三七在外觀上飽滿健壯，細紋緊實無裂紋內在堅實不空泡，質重；冬三七外觀上干癟瘦小，皺縮不飽滿，內在稀疏松泡，質輕；結合文山本地區的實際種植采挖銷售來看，主要是采挖春三七為主，冬三七僅是三七種植戶需要留種才會延遲采挖的三七，產量較小， 所以在本地區的三七市場中，一般意義上的三七指的是春三七，本文所討論的三七也僅限春三七。通過多次走訪文山三七市場發現，市場中對三七的劃分與相關標準中劃分略有不同，例如存在不少標注為50頭的三七；還有一部分三七的剪口和主根部分并沒有分離開，這樣顯得三七個頭更大，在當地俗稱“戴帽三七”，與之相對應的只有主根部位的三七俗稱“滑頭三七”，相同頭數時，在價格上帶剪口的三七明顯低于不帶剪口的三七；另外不同頭數規格的三七價格差異更是顯著，甚至每斤相差數倍價格。鑒于此本研究選取了文山當地不同商品規格的三七，通過對其皂苷成分含量的分析，以對商品規格劃分進行相關性討論，為合理使用不同規格的三七提供一定的理論依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器

高效液相色譜儀（U3000，賽默飛）、色譜柱（Waters C18，250 mm×4.6 mm，5 μm）、電子分析天平（BP211D，北京賽多利斯）、電熱恒溫水浴鍋（HWS-24型，上海惠泰），電熱恒溫干燥箱（DHG-9101-2A，上海三發）。

1.2 材料

三七購于文山市三七國際交易市場，分別為不同商家隨機購買，共9種規格，每種規格三七樣品3批次，總計27批次；對照品人參皂苷Rg1（110703-201933，純度93.4%，中國食品藥品檢定研究院）、人參皂苷Rb1（110704-202028，純度93.1%，中國食品藥品檢定研究院）、三七皂苷R1（110745-201921，純度90.4%，中國食品藥品檢定研究院）；乙腈、甲醇均為色譜純，水為超純水。

2 方法

2.1 對照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1及三七皂苷R1對照品適量，加甲醇制成每1 mL含人參皂苷Rg10.4 mg、人參皂苷Rb10.4 mg、三七皂苷R10.1 mg的混合溶液，即得。

2.2 供試品溶液的制備

三七樣品粉碎，精密稱取粉末（過四號篩）約0.6 g，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，放置過夜，置80 ℃水浴上保持微沸2 h，放冷，稱重，用甲醇補足減失量，搖勻，取續濾液，即得。[3]

2.3 色譜條件

采樣Waters C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，梯度洗脫條件為：0～12 min，19% A，81% B ；12～60 min，19%～36% A，81%～64% B。檢測波長為203 nm，流速1 mL/min，進樣量10 μL。理論板數按三七皂苷R1峰計算應不低于4 000。

2.4 標準曲線的制作

精密稱取三七皂苷R12.89 mg、人參皂苷Rg111.72 mg、人參皂苷Rb112.18 mg于25 mL容量瓶中，配置成對照品混合溶液，分別吸取對照品溶液2、5、10、15、20、25 μL注入液相色譜儀，記錄色譜峰以進樣x（μL）為橫坐標，峰面積y為縱坐標，繪制標準曲線。

2.5 加樣回收率試驗

精密稱定已知含量的同一批三七6份，每份約0.3 g，精密加入混合對照品溶液適量，分別照“2.2”項下方法操作，照“2.3”項下色譜條件進行試驗，計算回收率。

2.6 樣品測定

每組樣品選取參照“2.2”方法制作樣品溶液，參照“2.3”方法進行色譜測定，本次所檢樣品中，共9種規格，每種規格三七樣品3批次，總計27批次。

3 結果

3.1 三種皂苷對照品

吸取“2.1”項下對照品溶液10 μL，按“2.3”項下色譜條件測定，結果表明三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1的分離度均較好，三種皂苷的HPLC色譜圖見圖1。

圖1 三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1對照品的HPLC色譜圖

3.2 標準曲線及線性關系

按“2.4”項下以進樣量x（μL）為橫坐標，峰面積y為縱坐標，繪制標準曲線，進行線性回歸，得回歸方程，結果表明三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1這3種皂苷成分線性關系良好，線性回歸方程及線性關系見表1。

表1 三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1標準曲線及線性關系

3.3 加樣回收率試驗結果

按“2.5”項下測定加樣回收率，三七皂苷R1的平均回收率為99.41%，RSD值為2.88%；人參皂苷Rg1的平均回收率為100.31%，RSD值為1.47%；人參皂苷Rg1的平均回收率為97.35%，RSD值為1.85%，表明該方法準確度較好，結果見表2。

表2 加樣回收率

3.4 樣品測定結果

本次所測樣品中，商品規格為20頭、30頭、40頭的三七，存在兩種類型，分別為僅有主根部分的三七及主根和剪口兩部分相連的三七，商品規格為50頭、60頭的三七，僅有主根部分。每種規格三七樣品3個批次，總計27批次，經檢測，27批次樣品的總皂苷含量在5.73%～9.84%之間，均符合《中國藥典》三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1的總量不得少于5.0%的規定，其中20頭主根和剪口兩部分相連的三七總皂苷含量最高，3批次的平均值為9.33%，50頭三七總皂苷含量最低，3批次的平均值為7.45%，其余商品規格的三七總皂苷含量介于這二者之間，其總皂苷含量與其商品規格無規律性的對應關系，結果見表3。

表3 皂苷含量測定

4 討論

（1）在本地三七市場中普遍存在著僅有主根部分的三七及主根和剪口兩部分相連的三七，在外觀形態上前者更受消費者青睞，所以相同頭數時，一般前者價格高于后者價格。本次分別測定了這兩種類型的20頭、30頭、40頭三七，結果顯示，相同頭數時，主根和剪口兩部分相連的總皂苷含量高于僅有主根部分的三七，推測可能與剪口有關；相關前期研究證實三七的剪口部分皂苷含量高于主根部分[5-6]。

（2）傳統市場分類按照1市斤三七含幾頭來劃分的商品規格，頭數越少價格越高，20頭與60頭三七相比，價格甚至相差數倍。

本文分別選取了僅有主根部分的20頭、30頭、40頭、50頭、60頭三七進行總皂苷的含量測定，結果顯示，40頭平均皂苷含量最高，為8.45%，50頭平均皂苷含量最低，為7.45%；同時還對價格最便宜的筋條進行了含量測定，平均皂苷含量為7.89%，其含量高于本次所檢測的50頭三七；另外早在1999年秦雪梅等[7]就曾用薄層鑒別的方法證實了僅用個頭大小不能鑒別三七藥材的優劣；本研究采用HPLC法證實了三七中的人參類皂苷含量與其商品規格無顯著相關性。由此可以看出，人們普遍認為的三七個頭越大質量越好以及筋條質量較差的說法并不可靠，就文山本地三七市場而言，三七總皂苷含量與其商品規格的劃分并無明顯相關性，對于消費者來說，沒有必要盲目追求個頭大的三七。