沙利度胺聯(lián)合化療對B細胞非霍奇金淋巴瘤免疫功能的影響

李建安 陳慧華 楊蘭平 文玲波 賈燕華

B細胞非霍奇金淋巴瘤(B cell non-Hodgkin′s lymphoma，B-NHL)是發(fā)生在淋巴造血系統(tǒng)、淋巴器官等免疫系統(tǒng)的一種惡性腫瘤，免疫功能紊亂和微環(huán)境分子異常均可導(dǎo)致B-NHL惡化[1]。沙利度胺(thalidomida)是具有抗腫瘤以及免疫功能調(diào)節(jié)等作用的藥物，廣泛用于多發(fā)性骨髓瘤、大腸癌、肝癌等惡性腫瘤的治療[2]。研究已證實，沙利度胺聯(lián)合CHOP方案治療彌漫大B細胞淋巴瘤的療效確切，安全性高，遠期療效顯著[3]。本研究主要探討沙利度胺聯(lián)合奧沙利鉑和吉西他濱對復(fù)發(fā)難治性B-NHL患者免疫功能的影響，以期為沙利度胺在B-NHL的臨床應(yīng)用中提供更多依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

資料與方法

1.一般資料：隨機選取2018年1月～2020年12月于筆者醫(yī)院腫瘤科確診為復(fù)發(fā)難治性B-NHL的100例患者，根據(jù)化療方案隨機分為觀察組(沙利度胺聯(lián)合奧沙利鉑和吉西他濱)和對照組(奧沙利鉑和吉西他濱)，每組50例。觀察組男性24例，女性26例，患者平均年齡為45.28±6.63歲。對照組男性22例，女性28例，患者平均年齡為44.32±5.23歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡18～70歲；②臨床確診為B-NHL；③經(jīng)4～6個周期以CHOP(環(huán)磷酰胺+多柔比星+長春新堿+潑尼松)為主方案化療后復(fù)發(fā)或化療后從未達到過部分緩解或完全緩解的患者；④外周血白細胞計數(shù)≥3.5×109/L，血小板計數(shù)及肝腎功能正常；⑤近3個月內(nèi)未接受輸血及其他治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他腫瘤及傳染性疾病；②有化療禁忌證者；③有嚴(yán)重心血管疾病及自身免疫性疾病者；④糖尿病患者；⑤懷孕或哺乳期女性；⑥對本研究中使用藥物過敏者。同時選取筆者醫(yī)院同期健康體檢者50例為正常組，其中男性23例，女性27例，平均年齡為44.56±6.63歲。三組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)筆者醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會審核，所有入組對象均簽署知情同意書。

2.治療方案：患者均于第1天給予靜脈滴注奧沙利鉑(H20000337，江蘇恒瑞醫(yī)藥)100mg/m2(5%葡萄糖溶液250ml)，吉西他濱(H20030104，江蘇豪森藥業(yè))800mg/m2(0.9%氯化鈉注射液100ml)，第8天只給予吉西他濱(劑量同前)。在此基礎(chǔ)上，觀察組增加沙利度胺片(H32026129，常州制藥廠有限公司)治療，初始劑量為50mg/d，每周增加50 mg/d，最大劑量不超過400mg/d，期間觀察患者，若出現(xiàn)不能耐受的毒性不良反應(yīng)時停止增加劑量或減少劑量，每天口服維持至化療結(jié)束。21天為1個周期，共治療6個周期。治療期間給予其他對癥治療及保護措施。

3.樣品收集及觀察指標(biāo)：分別于化療前、化療結(jié)束后24h抽取本研究所有入組對象空腹外周靜脈血5ml，分離血清及外周血單核細胞。采用流式細胞術(shù)檢測CD4+(CD3+CD4+)、CD8+(CD3+CD8+)、Treg(CD4+CD25+)、Th17(CD4+且IL-17A+)細胞比率，結(jié)果以百分比表示；ELISA法檢測血清中IL-17、IL-25的含量。

結(jié) 果

1. CD4+、CD8+T細胞比率的檢測：與正常組比較，化療組治療前外周血CD4+T細胞比率、CD4+/CD8+比值降低，CD8+T細胞比率升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；化療組治療前各指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與治療前比較，B-NHL患者化療后CD4+T細胞比率、CD4+/CD8+比值明顯升高，CD8+T細胞比率明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與對照組比較，觀察組治療后CD4+T細胞比率、CD4+/CD8+比值均明顯升高，CD8+T細胞比率明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，詳見表1。

2. Treg、Th17細胞比率的檢測：與正常組比較，化療組治療前Treg細胞比率、Treg/Th17比值明顯升高，Th17細胞比率明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；化療組治療前各指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與治療前比較，化療組治療后Treg細胞比率、Treg/Th17比值明顯降低，Th17細胞比率明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與對照組比較，觀察組治療后Treg細胞比率、Treg/Th17比值明顯降低，Th17細胞比率明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，詳見表2。

3.血清IL-17和IL-25的檢測：與正常組比較，化療組治療前血清中IL-17和IL-25水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；化療組治療前各指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與治療前比較，化療組治療后IL-17和IL-25水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與對照組比較，觀察組治療后IL-17和IL-25水平均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，詳見表3。

表3 各組血清IL-17和IL-25水平

討 論

沙利度胺的抗腫瘤效應(yīng)多表現(xiàn)在其抗血管生成、抑制炎癥等作用。研究指出，沙利度胺聯(lián)合CHOP化療可顯著提高B-NHL患者完全緩解率[4]，可見沙利度胺在B-NHL治療中效果良好。CHOP為治療B-NHL的基本方案，對初治者效果較好，但對復(fù)發(fā)或侵襲性B-NHL效果欠佳，緩解時間短且易復(fù)發(fā)[5]。

吉西他濱是阿糖胞苷新一代的嘧啶類似物，具有廣譜抗腫瘤活性，作用于S期細胞，抑制DNA合成。奧沙利鉑是第3代鉑類抗癌藥物，對DNA合成也具有抑制作用。吉西他濱聯(lián)合奧沙利鉑治療復(fù)發(fā)難治性B-NHL具有一定療效，然而吉西他濱的使用可影響患者免疫功能，引發(fā)血小板、白細胞減少等不良反應(yīng)[6]。

近年來研究發(fā)現(xiàn)，沙利度胺具有免疫調(diào)節(jié)功能，在抗腫瘤過程中具有重要地位[7]。在多發(fā)性骨髓瘤中，沙利度胺治療可以顯著提高CD4+T細胞，降低調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)的水平，改善T細胞亞群分布，提高患者治療緩解率[8]；李麗等[9]研究顯示，沙利度胺治療彌漫大B細胞淋巴瘤時，可顯著提高患者外周血Th17細胞和IL-17水平，表明沙利度胺的抗腫瘤作用與其免疫功能調(diào)節(jié)作用相關(guān)。故本研究運用沙利度胺聯(lián)合奧沙利鉑和吉西他濱治療復(fù)發(fā)難治性B-NHL患者，探究其對免疫功能的影響。

機體抗腫瘤免疫反應(yīng)以細胞免疫為主，T淋巴細胞亞群不僅是細胞免疫的效應(yīng)細胞，功能各異的細胞亞群也在調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)中起重要作用。CD4+T細胞是免疫應(yīng)答中的主要反應(yīng)細胞，可直接抗腫瘤；CD8+T細胞可對靶細胞產(chǎn)生細胞毒性作用，同時對CD4+T細胞具有調(diào)節(jié)性抑制性作用，可抑制抗體合成和T淋巴細胞增殖。CD4+T和CD8+T細胞存在平衡關(guān)系，其比值下降表明機體處于免疫抑制狀態(tài)，常表現(xiàn)為CD4+T細胞的亞群Treg免疫抑制功能過強，輔助性T細胞(Th)功能減弱。已有研究指出，較高的外周血Tregs和Treg/Th17比值可能與淋巴瘤患者的預(yù)后和化療反應(yīng)良好，以及復(fù)發(fā)率降低有關(guān)[10]。Treg細胞是免疫抑制型細胞，可通過直接接觸細胞促進CD4+T、CD8+T、NK等免疫細胞的增殖和活化[11]。Th17則通過分泌IL-17家族細胞因子參與機體免疫反應(yīng)。

當(dāng)CD4+T細胞活化程度不足以抵抗腫瘤細胞時，機體抗腫瘤免疫能力減弱，導(dǎo)致B-NHL腫瘤細胞不斷增殖、惡化進展為難治性腫瘤[12]。B-NHL患者體內(nèi)也存在免疫抑制現(xiàn)象，表現(xiàn)為外周血CD4+T、Th17比例下降，Treg、Treg/Th17升高[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，B-NHL患者外周血CD4+/CD8+T細胞比例降低，Treg/Th17細胞比例升高，證實了B-NHL患者存在免疫功能紊亂；化療后，B-NHL患者CD4+/CD8+T細胞及Treg/Th17細胞比例均得到顯著改善，且沙利度胺聯(lián)合化療組的改善效果優(yōu)于單純化療組，表明沙利度胺聯(lián)合奧沙利鉑和吉西他濱化療法可有效改善B-NHL患者T淋巴細胞亞群比例，增強免疫功能，且效果優(yōu)于單純化療，這或許是因為沙利度胺的免疫調(diào)節(jié)功能減少了單純化療所造成的免疫系統(tǒng)不良反應(yīng)，同時抑制了患者體內(nèi)的免疫抑制現(xiàn)象。

細胞因子在抗腫瘤免疫及其調(diào)節(jié)中具有重要作用。IL-17家族細胞因子包括IL-17A、B、C、D、E、F，其中IL-17A通常簡稱為IL-17，IL-17E又稱為IL-25。IL-17是Th17細胞的效應(yīng)分子，可通過激活NF-κB和MAPK途徑來發(fā)揮其生物學(xué)活性，參與調(diào)控炎癥和自身免疫性疾病。IL-25促進Th2免疫應(yīng)答，介導(dǎo)過敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。Ferretti等[14]研究發(fā)現(xiàn)，IL-25可以通過抑制新生血管的生成來抑制B-NHL細胞的生長。此外，B-NHL患者治療緩解后外周血中IL-17升高與較好預(yù)后有關(guān)，表明上調(diào)IL-17和IL-25對增強B-NHL患者免疫功能具有重要作用[15,16]。本研究發(fā)現(xiàn)，B-NHL患者外周血IL-17和IL-25水平顯著低于健康者，與黃穎等[16]的研究結(jié)果相符，進一步說明B-NHL患者免疫功能的下調(diào)；經(jīng)化療治療后，B-NHL患者IL-17和IL-25水平均升高，且沙利度胺聯(lián)合化療組的效果顯著高于單純化療組，表明沙利度胺聯(lián)合奧沙利鉑和吉西他濱化療法可通過顯著提高B-NHL患者IL-17和IL-25的水平，進而調(diào)節(jié)機體免疫反應(yīng)，發(fā)揮抗腫瘤作用。

綜上所述，沙利度胺聯(lián)合奧沙利鉑及吉西他濱治療可通過調(diào)節(jié)CD4+/CD8+T、Treg/Th17細胞比例和IL-17、IL-25水平，調(diào)節(jié)T淋巴細胞亞群分布，進而改善B-NHL患者的免疫功能，更利于復(fù)發(fā)難治性B-NHL的治療，值得進一步研究予以證實。