絲素蛋白在骨組織工程領(lǐng)域的應(yīng)用研究進(jìn)展

匙 峰，梁 帥，王 倩，劉玉梅，楊在君

(西華師范大學(xué) a.組織修復(fù)材料工程技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心，b.生命科學(xué)學(xué)院，c.環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院，四川 南充 637009)

骨骼作為組成人體運(yùn)動系統(tǒng)的一部分，起支撐、保護(hù)的作用，且具有代謝、造血等重要生理功能。由于創(chuàng)傷、疾病、骨腫瘤切除等原因引起的骨缺損，是常見的臨床疾病，會引起患者骨功能受損、生活質(zhì)量下降。嚴(yán)重的骨缺損無法自愈，需要植入骨修復(fù)材料來填補(bǔ)和修復(fù)。據(jù)統(tǒng)計，全球每年的骨移植手術(shù)大約有220萬例[1]。自體骨與同種異體骨由于良好的成骨能力與骨傳導(dǎo)性而被認(rèn)為是治療骨缺損的第一與第二選擇[2]。但是臨床中自體骨和異體骨的應(yīng)用受到許多因素的限制，例如供應(yīng)的來源有限、免疫原性、二次手術(shù)等，從而推動了骨組織工程的發(fā)展。

蠶絲是我國的古代文明產(chǎn)物之一，早在4700多年前就已經(jīng)用于絲織品的制造中。幾個世紀(jì)前，醫(yī)生們開始將桑蠶絲用作手術(shù)縫合材料。我國在1957年就開始研究以桑蠶絲為原材料的人造血管，并且應(yīng)用于臨床。絲素蛋白是來源于蠶絲的纖維蛋白，作為一種天然高分子材料，避免了化學(xué)合成材料的繁瑣步驟和副產(chǎn)物的干擾，也沒有膠原、動物來源骨等免疫排斥或病原隱患，同時其來源廣泛、產(chǎn)量豐富、價格低廉，在骨組織工程研究與應(yīng)用中具有極大的價值[3]。本文首先介紹絲素蛋白材料結(jié)構(gòu)及其提取純化方法，隨后闡述了絲素蛋白在骨組織工程中應(yīng)用的材料形式和研究進(jìn)展，并討論了絲素蛋白發(fā)展的趨勢和局限性。

1 絲素蛋白材料

以絲素蛋白作為生物材料應(yīng)用于骨組織具有以下優(yōu)勢：①生物相容性良好，去除絲膠蛋白后，幾乎不會引起機(jī)體免疫反應(yīng)[4]。②生物降解速率可控，可以通過不同的方法調(diào)節(jié)絲素蛋白降解的速率，使之符合組織再生的需求。其降解產(chǎn)物主要是肽鏈和游離氨基酸，易于被機(jī)體吸收代謝，且對機(jī)體無害或無其他不良反應(yīng)[5]。③機(jī)械性能良好，能與一些高性能合成纖維相媲美，并可通過添加其他材料(羥基磷灰石、聚乙二醇、羥丙基甲基纖維素等)進(jìn)一步提高性能[6-8]。④可加工性能優(yōu)異，可根據(jù)需求與不同材料復(fù)合加工成多種形式(薄膜、微球、水凝膠、多孔支架以及復(fù)合支架等)，以滿足不同需求[9]。⑤熱穩(wěn)定性良好，在250 ℃左右都不會喪失結(jié)構(gòu)完整性，滿足醫(yī)用材料的加工滅菌需求[10]。此外，絲素蛋白還具有止血、高藥物滲透性、高氧滲透性、抗酶切性等特性[11-12]。

1.1 絲素蛋白結(jié)構(gòu)

蠶絲主要由兩部分組成：內(nèi)部的絲素蛋白以及外部包裹的絲膠蛋白(圖1a)，絲素蛋白約占總量的70%～75%，絲膠蛋白約占總量的20%～25%[4]。除此之外，還有少量蠟質(zhì)、色素以及無機(jī)物等物質(zhì)[13]。蠶絲作為天然生物絲纖維，其規(guī)模化養(yǎng)殖和商業(yè)化程度較高，從而使得蛋白原料來源廣泛，經(jīng)濟(jì)成本低。

絲素蛋白主要含有碳、氫、氧、氮等元素，還含有鉀、鈣、鍶、鐵、銅等微量元素[4]。它富含18種氨基酸，其中丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸約占總量的85%。絲素蛋白是纖維狀蛋白，由兩條肽鏈構(gòu)成：重鏈(H)約396.367 kDa，輕鏈(L)約25 kDa，二者通過二硫鍵連接在一起(圖1b)[14]。此外，還有被稱為P25的糖蛋白，通過疏水作用力與兩條肽鏈組成的復(fù)合物結(jié)合在一起。絲素蛋白二級結(jié)構(gòu)主要有α-螺旋以及β-折疊，其中，β-折疊主要是由于蛋白序列中(GAGAGS)n和(GAGAGY)n的重復(fù)延伸。在聚合狀態(tài)下，絲素蛋白由結(jié)晶區(qū)與非結(jié)晶區(qū)構(gòu)成，結(jié)晶區(qū)又分為SilkⅠ與SilkⅡ，SilkⅠ是一種介于α-螺旋與β-折疊的中間結(jié)構(gòu)，呈曲柄形；SilkⅡ為反向平行的β-折疊片層結(jié)構(gòu)，是斜方晶系，其肽鏈排列整齊，并且由于氫鍵和分子間引力的存在，使得其抗拉伸的能力強(qiáng)，因而具有很高的強(qiáng)度[15]；此外，非結(jié)晶區(qū)肽鏈之間排列不整齊，結(jié)合力較弱，使得其抗拉伸的能力弱，因而具有很強(qiáng)的韌性[16-18]。SilkⅠ與SilkⅡ二者比例受到多種因素的控制，比如溫度、pH、化學(xué)試劑等，而兩者比例會影響絲素蛋白的降解速率和力學(xué)強(qiáng)度[19-21]。

1.2 絲素蛋白的提取及溶解

由于蠶絲中絲膠蛋白會引起人體的過敏反應(yīng)，絲素蛋白在應(yīng)用于組織工程中時，需要先去除具有免疫原性的絲膠蛋白[22]。利用絲素蛋白和絲膠蛋白在水溶液體系中溶解度的差異，可采用酸、堿、皂、酶等處理蠶絲，使絲膠蛋白溶于溶液體系內(nèi)，經(jīng)過離心、過濾、透析等方法分離出絲素蛋白。常用的脫膠方法有以下幾種：①碳酸鈉脫膠；②中性皂脫膠；③酒石酸脫膠；④高溫高壓水脫膠；⑤堿性蛋白酶脫膠[4,14,23-24]。其中，碳酸鈉脫膠最為常見，其將生蠶絲置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%的碳酸鈉溶液中，在98～100 ℃下脫膠30～45 min，脫膠率可達(dá)24.44%。此外，有研究者從絲素蛋白生物來源出發(fā)，從蠶生物體中獲取絲膠酶，可專一地分解蠶絲中的絲膠蛋白[23]。不同的脫膠方法會對絲素蛋白的力學(xué)性能和降解性產(chǎn)生不同的影響[25]。

由于絲素蛋白不能直接溶于水和常規(guī)的有機(jī)溶劑，使得絲素蛋白在組織工程支架材料加工制備中受到諸多限制。一般來說，溶解脫膠蠶絲纖維主要有兩種溶劑體系：六氟異丙醇與離子溶液(離子水/醇溶液)[26]?？紤]到六氟異丙醇溶劑的高成本和毒性，通常采用后者。常見的離子水溶液有9.3 g·mol-1溴化鋰、質(zhì)量分?jǐn)?shù)50%氯化鈣、9 g·mol-1氰化鋰，常見的離子醇溶液包括氯化鈣-乙醇-水溶劑(摩爾比1∶2∶8)、溴化鋰-乙醇-水溶劑(質(zhì)量比44∶45∶1)以及四水硝酸鈣-醇溶劑(質(zhì)量比75∶72)等[27]。不同的溶解體系或同一溶解體系的不同物質(zhì)配比，都會使得脫膠蠶絲的溶解速率不同。在用氯化鈣溶解脫膠蠶絲時，溶解速率隨氯化鈣濃度增大而增大，但當(dāng)?shù)竭_(dá)一定程度后，則隨氯化鈣濃度增大而減小[28]。溶劑體系中鋰離子被長期大量攝取會產(chǎn)生一定的毒副作用，對神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、腎臟等均有影響[29]。為了純化絲素蛋白溶液，去除溶劑中的雜離子干擾，一般采用透析袋(截留分子量6000～8000 Da)在純凈水中透析3～5 d得到絲素蛋白水溶液體系[11]。若透析后絲素蛋白濃度過低，則可采用PVA等高濃度溶液反透析或者室溫?fù)]發(fā)部分溶劑進(jìn)行濃縮。

為了提高絲素蛋白的溶解性和可加工性，研究者通過化學(xué)反應(yīng)法(如偶聯(lián)反應(yīng)、氨基酸接枝、化學(xué)接枝)對絲素蛋白進(jìn)行改性。其中，利用絲素蛋白中的氨基酸氨基，特別是賴氨酸中自由的氨基進(jìn)行化學(xué)接枝被研究得最多。Kim等[30-31]在絲素蛋白自由氨基上接枝具有光敏作用的甲基丙烯酸縮水甘油酯基團(tuán)，得到的改性絲素蛋白具有良好的水溶性，并且可通過紫外引發(fā)形成光交聯(lián)凝膠，從而應(yīng)用于3D打印方面。

2 絲素蛋白在骨組織工程領(lǐng)域的應(yīng)用

骨組織具有疏密有序的孔隙

結(jié)構(gòu)，其再生與自我修復(fù)能力有限。從化學(xué)成分上看，骨組織由有機(jī)部分(膠原、各種蛋白、透明質(zhì)酸等)與無機(jī)部分(羥基磷灰石、碳酸鹽、無機(jī)鹽等)組成，其中有機(jī)組分約占骨組織的35%，無機(jī)組分約占65%；從組成結(jié)構(gòu)上看，骨組織表面有富含干細(xì)胞的骨膜，內(nèi)部孔隙中分布有骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞和血管組織等。在組織工程領(lǐng)域，利用絲素蛋白良好的生物相容性和降解性，可根據(jù)不同目的和加工工藝，將絲素蛋白制備成不同的結(jié)構(gòu)形式，以發(fā)揮獨特的作用(圖2)[4]。在骨組織工程應(yīng)用中，絲素蛋白主要以微球、水凝膠、膜和多孔支架形式發(fā)揮促進(jìn)骨缺損修復(fù)的作用。

2.1 載體微球

骨組織再生過程中涉及多種細(xì)胞(包括成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等)的增殖、分化等生理活動，受體內(nèi)鈣磷離子、生長因子等的調(diào)控。為了促進(jìn)骨組織的再生，加速骨缺損的愈合，骨組織工程領(lǐng)域常將外源調(diào)控因子(如生長因子、中藥提取物、金屬離子)引入骨缺損處，靶向刺激細(xì)胞生長和組織再生。載藥微球可作為上述外源調(diào)控因子的載體。載藥微球一般為直徑1～250 μm的球狀實體，由藥物吸附或分散在高分子聚合物基質(zhì)中形成，具有靶向性、緩釋與長效性、高藥物穩(wěn)定性、低細(xì)胞毒性等優(yōu)點，已逐漸成為骨組織工程領(lǐng)域的研究熱點。

將能提高骨組織再生相關(guān)的藥物或生長因子分散在絲素蛋白溶液體系內(nèi)，經(jīng)特定的加工過程，即可制得具有特定功能的載藥微球。常用的制備絲素蛋白微球的方法有乳化分散法、賦形法和凝聚法。劉海龍等[32]制備了絲素蛋白/重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2微球，并通過超聲波按照30 mg∶1 g的比例與多孔雙相磷酸鈣混合，制成了人工骨。在植入綿羊體內(nèi)的實驗中發(fā)現(xiàn)，隨著材料的降解，首先釋放重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2，較小的微球分散在人工骨表面，大的微球則更多的被包裹在內(nèi)，且其中還含有更小的微球，從而達(dá)到緩慢釋放的目的，這樣就使得重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2始終保持在一定濃度，以促進(jìn)新骨形成。此外，為加快骨缺損修復(fù)過程中患處募集成骨細(xì)胞的速率，通常在絲素蛋白中添加海藻酸鈉、明膠等材料為細(xì)胞的轉(zhuǎn)移提供載體，從而將細(xì)胞定向運(yùn)載至骨缺損處促進(jìn)骨的再生。純海藻酸鈉載體不利于細(xì)胞的黏附與增殖，且降解速率緩慢。在海藻酸鈉體系內(nèi)混入絲素蛋白后，制成絲素蛋白-海藻酸鈉混合微球并在其上培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，實驗發(fā)現(xiàn)細(xì)胞在復(fù)合微球上的黏附能力和增殖能力均有所提高，且能促進(jìn)成骨細(xì)胞內(nèi)骨鈣素的合成[33]。Luetchford等[34]利用絲素蛋白與膠原蛋白的混合材料，通過微流體技術(shù)得到尺寸分布均一、孔隙結(jié)構(gòu)豐富的細(xì)胞微載體，具有良好的細(xì)胞相容性和力學(xué)性能。

2.2 水凝膠

水凝膠是由親水或水溶性的高分子通過物理或化學(xué)交聯(lián)形成的一種三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，可用于載藥和細(xì)胞運(yùn)輸。水凝膠的溶液狀態(tài)含水量較高，可以模仿細(xì)胞內(nèi)部的三維微環(huán)境并可以均勻地包裹細(xì)胞和藥物，同時，部分水凝膠還具有可注射性，利于生物組織的原位再生與重建[35]。水凝膠的這些性質(zhì)使其被廣泛運(yùn)用于骨組織修復(fù)工程領(lǐng)域。與其他高分子相同，可通過對絲素蛋白側(cè)鏈上的氨基酸活性基團(tuán)進(jìn)行化學(xué)修飾從而促進(jìn)絲素蛋白纖維間進(jìn)行交聯(lián)的方法制得水凝膠。但絲素蛋白區(qū)別于其他高分子的獨特優(yōu)勢是利用絲素蛋白分子結(jié)構(gòu)內(nèi)的β-折疊，使大分子肽鏈纏繞、聚集，形成蛋白微球膠束，使絲素蛋白凝膠化，避免接枝等過程中有毒化學(xué)試劑的使用。常見的有高溫、超聲、渦流、化學(xué)交聯(lián)以及化學(xué)改性等水凝膠化方法[18]。

夏一菁等[36]對絲素蛋白/氧化石墨烯水凝膠進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)加入氧化石墨烯后，水凝膠的壓縮強(qiáng)度最大能夠提升40%，當(dāng)加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.2%的氧化石墨烯時，壓縮強(qiáng)度與韌性表現(xiàn)最優(yōu)；此外，由于絲素蛋白-氧化石墨烯水凝膠中氫鍵、極性基團(tuán)的存在，使得材料的降解速率和骨組織的再生速率能更好地匹配，更加適用于骨組織的修復(fù)。Li等[37]制備了一種用于軟骨組織的絲素蛋白-羧甲基殼聚糖水凝膠，經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)其具有良好的機(jī)械性能，降解速率與細(xì)胞的再生速率相匹配，在其上培養(yǎng)兔軟骨細(xì)胞，細(xì)胞能較好地生長。Zhang等[38]將從軟骨細(xì)胞提取的細(xì)胞外基質(zhì)與絲素蛋白溶液混合，在PEG的輔助下形成可3D打印的水凝膠支架結(jié)構(gòu)，同時還包裹干細(xì)胞，但由于制備的水凝膠力學(xué)強(qiáng)度限制，僅能應(yīng)用于軟骨方面。

2.3 膜材料

生物膜結(jié)構(gòu)在體內(nèi)發(fā)揮著重要的作用。骨骼表面的骨膜內(nèi)富含豐富的干細(xì)胞，在骨折愈合過程中起重要作用。骨膜存在骨祖細(xì)胞，可增殖分化為成骨細(xì)胞。人工制造的絲素蛋白膜材料可模擬骨組織外部的骨膜結(jié)構(gòu)，用于修復(fù)骨缺損。絲素蛋白膜的應(yīng)用十分廣泛，不僅可用于骨組織修復(fù)，也可用于血管修復(fù)、角膜修復(fù)以及肌腱修復(fù)等領(lǐng)域。絲素蛋白膜的制作方法有溶液-凝膠法、溶液共混法、靜電紡法、冷凍干燥法等。Chen等[39]提出一種利用氣液界面張力制作絲素蛋白膜的方法：在絲素蛋白溶液中混入不同比例的明膠，然后滴在亞相(水和(NH4)2SO4水溶液)的表面，由于絲素蛋白親水與疏水片段交替排列的特殊結(jié)構(gòu)，使得絲素蛋白快速自組裝，從而在液體表面形成多孔絲素蛋白凝膠薄膜。用這種方法制得的絲素蛋白膜厚度極薄，在其上培養(yǎng)小鼠L929成纖維細(xì)胞，細(xì)胞在薄膜上能更好地生長。該材料在對生物體內(nèi)的血管、尿道、骨組織等的修復(fù)方面表現(xiàn)出較好的應(yīng)用前景。后續(xù)該課題組在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步與致密的PEG膜、甲殼素膜結(jié)合構(gòu)建了具有抗菌性的三明治結(jié)構(gòu)膜材料[40]。

為提高絲素蛋白膜的機(jī)械性能和生物學(xué)活性，在膜的制備過程中常混入無機(jī)材料、活性因子、金屬離子等。張玉[41]將絲素蛋白溶液與氧化石墨烯混合，烘干后得到絲素蛋白/氧化石墨烯復(fù)合膜，將其植入兔體內(nèi)后發(fā)現(xiàn)，氧化石墨烯的摻入不僅可以提高復(fù)合膜的力學(xué)性能(氧化石墨烯含量越高，復(fù)合膜內(nèi)部的β-折疊構(gòu)象含量越高)，還可促進(jìn)成骨細(xì)胞的生長，誘導(dǎo)骨組織的形成。陸史俊等[42]研究了一種碳酸鍶/絲素蛋白納米纖維膜，將其與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能較好的生長和增殖，這種納米纖維膜中的碳酸鍶可提高膜材料上堿性磷酸酶的活性，使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨基因表達(dá)水平提高，從而使材料具有較好的誘導(dǎo)骨再生的能力。此外，絲素蛋白膜也可以負(fù)載促進(jìn)骨再生相關(guān)藥物，尤其是一些容易失活的大分子蛋白質(zhì)物質(zhì)。

2.4 多孔支架

骨組織內(nèi)部具有多級微納米孔隙結(jié)構(gòu)，為骨組織再生過程中細(xì)胞的遷移與募集、增殖與分化、血管長入與體液循環(huán)提供了空間結(jié)構(gòu)和力學(xué)支撐。因此，用于骨修復(fù)的多孔支架除了要具備生物材料的一般條件(良好的生物相容性、一定的機(jī)械強(qiáng)度等)，還需具有一定的孔隙率和孔隙大小，以容納細(xì)胞的遷移活動。以絲素蛋白為基礎(chǔ)，制造多孔支架方法有很多，例如，編制纖維法：先將絲素蛋白紡成纖維，再將纖維進(jìn)一步編制成支架；顆粒瀝濾法：通過添加鹽或糖作為成孔劑，制造多孔支架等(圖3)[4,43-44]。

為增強(qiáng)純絲素蛋白力學(xué)性能、提高生物活性，在絲素蛋白支架制備中常引入其他物質(zhì)作為增強(qiáng)相。劉勇等[45]構(gòu)建了一種絲素蛋白/羥基磷灰石/聚多巴胺/BMP-2多孔支架：先用冷凍干燥法制備絲素蛋白/羥基磷灰石支架，再浸泡入聚多巴胺溶液中，隨后接枝骨形態(tài)發(fā)生蛋白，經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)，復(fù)合支架的親水性能、粗糙度相對于絲素蛋白/羥基磷灰石支架而言，均有所增強(qiáng)，細(xì)胞在其上的增殖能力也相對更好。Ding等[46]向絲素蛋白/羥基磷灰石支架中負(fù)載骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2，通過調(diào)節(jié)骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2在復(fù)合支架中的比例，調(diào)節(jié)骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2在體內(nèi)的釋放，為細(xì)胞在支架上的生長提供了良好的微環(huán)境，進(jìn)一步促進(jìn)支架的成骨能力。Shao等[47]制備了一種羥基磷灰石/絲素蛋白復(fù)合支架，并將其與純絲素蛋白支架對比，發(fā)現(xiàn)二者性能有所不同。在機(jī)械性能方面，純絲素蛋白比較柔韌，伸長率較大，加入了羥基磷灰石后，復(fù)合材料的楊氏模量與斷裂應(yīng)力均大于純絲素蛋白；在細(xì)胞增殖方面，前期細(xì)胞在純絲素蛋白支架上生長較好，但后期明顯在復(fù)合支架上增殖更多，且出現(xiàn)了成熟的紡錘形；在生物礦化方面，復(fù)合支架上的堿性磷酸酶活性、骨鈣素含量以及礦物沉積物含量均大于純絲素蛋白支架。由于直接在絲素蛋白溶液體系中混合無機(jī)顆粒可能存在混合不均勻的情況，且制備過程中容易發(fā)生固液分離，絲素蛋白溶液經(jīng)凍干后進(jìn)行再礦化也是一種策略。Shao等[48]采用低濃度絲素蛋白溶液長時間加熱，誘導(dǎo)溶液內(nèi)絲素蛋白自組裝為長纖維，并與普通絲素蛋白溶液混合，凍干后較普通絲素蛋白支架力學(xué)性能有所增強(qiáng)。進(jìn)一步將以上凍干支架浸泡在模擬體液中礦化，并采用微波輔助加速礦化過程，短時間內(nèi)可得到礦化良好的復(fù)合多孔支架。

3 總結(jié)與展望

絲素蛋白通過與其他各種生物材料相結(jié)合，根據(jù)需求加工成微球、水凝膠、薄膜、支架等多種形態(tài)，發(fā)揮著藥物靶向、結(jié)構(gòu)支撐、原位誘導(dǎo)等功效，不僅可以應(yīng)用于骨組織工程，還可應(yīng)用于軟骨、肌腱、韌帶、血管、神經(jīng)等領(lǐng)域。對蠶絲進(jìn)行深度加工，開發(fā)以絲素蛋白為基礎(chǔ)的骨組織工程支架，有利于深化蠶絲產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，使低附加值產(chǎn)品向高附加值產(chǎn)品延伸，促進(jìn)農(nóng)業(yè)和加工業(yè)的發(fā)展。但仍有些問題亟待解決：首先，由于蠶絲來源、批次差異和提取手段的不同，絲素蛋白原料質(zhì)量難以保證完全一致，從而造成最終產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性問題，限制了其進(jìn)一步產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用研究；其次，以絲素蛋白制備膜、多孔支架等材料的過程一般以實驗室小規(guī)模研究為基礎(chǔ)，在放大生產(chǎn)過程中仍有很多問題亟待解決；再次，絲素蛋白雖已在骨組織工程的體外細(xì)胞學(xué)研究和動物體內(nèi)試驗階段取得良好效果，但尚未進(jìn)入臨床研究和驗證，對于骨再生過程的細(xì)胞外基質(zhì)礦化、血管形成等過程及機(jī)理仍需要更加深入的研究。隨著未來加工技術(shù)的不斷進(jìn)步與科學(xué)研究的不斷深入，絲素蛋白材料將在骨組織修復(fù)中得到更多的發(fā)展應(yīng)用，為整個組織工程領(lǐng)域開辟更多的發(fā)展空間。