稻田養殖克氏原螯蝦感染白斑綜合征病毒研究

楊宗英，姚 毅，曾柳根，嚴保華，雷小青，熊春賢，許亮清

(南昌市農業科學院，江西 南昌 330038)

隨著稻田養殖克氏原螯蝦(小龍蝦)規模日益擴大，小龍蝦病害逐年增多，白斑綜合征病毒(WSSV)引起的暴發性疾病已經成為制約稻田小龍蝦養殖產業發展的主要因素之一。筆者通過在江西省鄱陽湖區實地調查稻田蝦白斑綜合征的發病情況，結合定點取樣及水質因子的測定，初步找出了WSSV 致病的相關環境因子，以期為養殖戶防控小龍蝦WSSV暴發提供技術指導。

一、研究方法

稻田養殖克氏原螯蝦的大規模放苗時間一般從3 月初開始，規格較大的苗種在5 月即可上市。調查期間，筆者對江西省鄱陽湖區稻田養殖小龍蝦情況進行了實地跟蹤，利用便攜式水質分析儀實時監測水體pH、溫度、溶氧、氨氮等水質指標。在發現病蝦時，除了記錄發病癥狀，還通過優勢菌的分離、回感、寄生蟲鏡檢以及WSSV 的定性和定量檢測等方法來確定病因。

二、發病癥狀

2021年5月初，筆者發現部分稻田開始出現病蝦。癥狀表現主要是吃食量下降、活動能力減弱、趴邊、外殼顏色加深，蛻殼后的小龍蝦外殼鈣化比較慢、殼薄且脆、肝胰腺顏色變淡，嚴重者肝胰腺呈糨糊狀。

筆者對發病小龍蝦(圖1)的肝胰腺和鰓等組織進行優勢菌的分離和16S rDNA 測序分析，獲得的優勢菌分別是庫特氏菌和弗氏檸檬酸桿菌，且回感均未出現癥狀；鏡檢僅在鰓上發現了少量的固著類纖毛蟲，且病蝦和正常蝦差異不大；WSSV 檢測發現病蝦攜帶的WSSV 量顯著高于正常蝦，由此判定此次小龍蝦發病是由于WSSV感染導致。

圖1 病蝦

三、WSSV攜帶情況

連續3個月采集江西省鄱陽湖區恒湖墾殖場稻田養殖小龍蝦150 尾，來自15 塊稻田。檢測發現4月小龍蝦的WSSV攜帶率為15.8%，肝胰腺WSSV平均攜帶量為0.33拷貝/微克DNA，鰓的WSSV平均攜帶量為0.38 拷貝/微克DNA；5 月小龍蝦WSSV 攜帶率為23.6%，肝胰腺平均攜帶量為0.47 拷貝/微克DNA，鰓平均攜帶量為0.54 拷貝/微克DNA；6 月小龍蝦WSSV 攜帶率為33.9%，肝胰腺平均攜帶量為0.76 拷貝/微克DNA，鰓平均攜帶量為0.85 拷貝/微克DNA。

四、定點監測

筆者選擇3塊發病稻田和3塊正常稻田進行定點監測，從發病稻田和正常稻田中選擇病蝦和健康蝦進行兩個月持續的WSSV 定性和定量檢測，結果發現無論是發病蝦還是健康蝦都存在攜帶WSSV的情況，且在6月，無論是病蝦還是正常蝦的WSSV攜帶量普遍高于5 月，鰓的WSSV 攜帶量始終高于肝胰腺的WSSV攜帶量(表1)。

表1 定點監測小龍蝦WSSV攜帶情況

五、發病與環境因子的相關性分析

經過4、5、6月的調查跟蹤，筆者發現發病稻田和正常稻田水質的顯著性差異是氨氮和溶氧，而pH、溫度等指標差異性不大，由此看出小龍蝦感染WSSV后發病與水質環境關系密切，且與水體的氨氮、溶氧量直接相關(表2)。

表2 定點監測稻田的水質變化情況

六、總結與討論

通過本研究可知，稻田養殖小龍蝦感染WSSV 的情況也已經非常普遍。WSSV 易感宿主種類繁多，如枝角類、橈足類等都能夠成為該病毒的中間宿主，小龍蝦養殖過程中也可能通過攝食中間宿主感染WSSV。除此之外，水體中的浮游微藻也能夠攜帶WSSV。本研究發現與水體直接接觸的鰓組織病毒載量高于肝胰腺的病毒載量，可能與存在于水環境中的WSSV有關。

稻田養殖小龍蝦感染WSSV 發病和水質環境關系密切，本研究發現影響小龍蝦WSSV 發病的直接環境因子為高氨氮和低溶氧。郝晨光(2020)研究表明高氨氮和高亞硝態氮脅迫會促進WSSV 在蝦體內增殖，加速克氏原螯蝦的死亡。徐日俊等(2020)研究表明溶氧、pH 及氨氮等環境因素同WSSV 的發生直接相關，溶氧、氨氮及亞硝態氮等水環境指標可作為WSSV 發生的預警因子。值得注意的是，小龍蝦存在帶毒不發病的情況，本研究就發現了高病毒載量但在優質水體環境中不發病的情況。因此針對稻田養殖小龍蝦WSSV 的防控，應該多從生態防控方面入手，制定高效防控策略，保護生態環境。

1.嚴控苗種來源 由于目前小龍蝦“帶毒”的現象已經非常普遍，因此在選擇苗種時應該盡量從非疫區引進，有條件的養殖者可取樣進行苗種WSSV的檢測，做到心里有數。

2.精細化日常管理 除了小龍蝦攜帶WSSV，水體環境中也存在WSSV，在苗種下塘前要進行全面仔細的消毒；養殖過程中要用心保草、護草，保證水體環境不發生劇烈變動；遵守“三定”原則進行飼料投喂，保證小龍蝦的營養供給，以提高其免疫力。

3.發現病蝦，及時撈出 出現病蝦時及時撈出，防止病蝦被蠶食造成交叉感染；一旦發現小龍蝦因感染WSSV 而出現暴發性死亡，應該將其全部起捕，防止造成更嚴重的經濟損失。