一例南美白對蝦放苗后大量死亡原因的調查及分析

姜路辛，施禮科，陳 喆，陸曉明，孫海濤，陳 凡，郭水榮

(1.杭州市農業技術推廣中心，浙江 杭州 310017；2.嘉興華才檢測技術有限公司，浙江 嘉興 314500)

南美白對蝦是我國重要的蝦類養殖品種，在養殖過程中，放苗前后的相關環節至關重要。2021年3月中旬，浙江某養殖場在放養南美白對蝦苗種后出現大量死亡，為明確死亡原因，筆者進行了實地取樣調查。現將有關情況總結如下。

一、基本情況

養殖場位于杭州灣圍墾區域，上一年度養殖池發生了白對蝦“長不大”的情況，經原因調查，為腸胞蟲病害。為殺滅底泥中的腸胞蟲，養殖戶在清塘時使用了敵百蟲，7天后進水放苗，隨后出現了蝦苗大量死亡情況。以同一河道為水源的白對蝦周邊養殖場未出現類似情況，故排除外源水污染的可能性，將主要原因判定為場內因素。由于未能采集到存活的白對蝦苗，未對常規病原進行檢測，考慮到甲殼動物對敵百蟲敏感，重點對水中殘存的敵百蟲和其在堿性條件下易轉化成的敵敵畏進行了檢測分析。

二、實驗室分析結果

1.池塘水中敵百蟲含量檢測

取養殖池塘水20.12 克于50 毫升離心管中，加入40毫升乙腈，勻漿提取1分鐘，再加入5克氯化鈉，3 800 轉/分離心5 分鐘，取上清液20 毫升40℃旋蒸至1 毫升，過氨基固相萃取柱，收集液40℃旋蒸至近干，加入1 毫升乙腈＋水(3＋2)混勻，過0.22 微米濾膜，在液相色譜—串聯質譜儀中檢測，未檢出敵百蟲，檢測結果見表1。

2.池塘水中敵敵畏含量檢測

取養殖池塘水25.30 克于50 毫升離心管中，加入40 毫升乙腈、4 克硫酸鎂、1 克氯化鈉、1 克檸檬酸鈉、0.5 克檸檬酸氫二鈉及1 顆陶瓷均質子，蓋上離心管蓋，劇烈振蕩1分鐘后4 200轉/分離心5 分鐘，吸取6 毫升上清液加到內含900 毫克PSA 的15 毫升離心管中；4 200 轉/分離心5 分鐘，準確吸取1 毫升上清液于10 毫升試管中，40℃水浴中氮氣吹至近干；加入20 微升內標溶液，加入1毫升乙酸乙酯復溶，過微孔濾膜，進行氣相色譜—質譜測定，結果顯示池水中敵敵畏的含量達到60微克/千克，測定結果見表1。

表1 池水中敵百蟲、敵敵畏含量檢測結果

三、分析和討論

敵敵畏對南美白對蝦幼蝦的毒性較敵百蟲更強，根據文獻報道，其半致死濃度為0.22×10-7毫克/千克，本案例中池水敵敵畏濃度達到60 微克/千克，故初步判定本次白對蝦苗種死亡是由敵敵畏中毒造成。

根據文獻報道，敵百蟲對池內的蟹類、橈足類和白對蝦等具有較強的殺滅力，因此敵百蟲常用作清池藥物以預防蝦類病害。但敵百蟲在弱堿性條件下可形成毒性更大的敵敵畏，該過程隨堿性的增強和溫度的升高而加速，當pH 為8～10 時，敵百蟲轉變成敵敵畏僅需半小時。考慮到杭州灣圍墾區域土壤普遍呈堿性，清塘時使用敵百蟲，相當于作用于堿性土壤的浸出液，加速了敵百蟲的轉化。敵敵畏在30℃的環境中，18 天水解50%，所以本案例中養殖戶在使用敵百蟲7 天后進水放苗，顯然是在敵敵畏沒有完全降解的情況下進行的。雖然筆者對該池底部土壤的腸胞蟲檢測結果顯示呈陰性，但仍不建議在堿性土壤的白對蝦池清塘時使用敵百蟲。

腸胞蟲對世界各地的對蝦養殖均造成了不同程度的損害，是目前危害南美白對蝦的主要病害。2021年2月，筆者對杭州南美白對蝦主養區的池塘底泥進行了抽樣檢測，在41批次樣品中，3批次的池塘底泥呈現腸胞蟲陽性；進一步跟蹤了解，發現陽性池塘前期均使用了漂白粉消毒，而使用生石灰消毒的池塘未檢測到陽性。根據該檢測結果，在殺滅底泥中的腸胞蟲時，筆者初步認為生石灰的作用優于漂白粉，建議采用生石灰作為防控腸胞蟲的清塘手段。