成骨細胞與破骨細胞相互調節作用的研究進展

任明詩,丁 羽,李子涵,劉 波

(江西中醫藥大學藥學院,江西省中醫藥管理局中藥防治老年性疾病重點研究室，江西 南昌 330004)

破骨細胞骨吸收和成骨細胞骨形成之間的相對平衡對維持骨穩態起至關重要的作用。骨重塑階段,成骨細胞能招募破骨前體細胞進入骨單位區域并兩兩接觸,細胞間的信號從破骨前體細胞傳遞到成骨細胞,誘導成骨細胞從骨表面撤離,形成無細胞區。在成骨細胞的調控下,單核破骨前體細胞逐漸融合為多核成熟破骨細胞,分泌酸性物質和蛋白酶，分別溶解礦物質和消化骨基質的膠原纖維來進行骨吸收,并形成骨吸收陷窩。舊骨吸收后,破骨細胞產生一系列活性物質,促進成骨前體細胞遷移并募集于骨吸收處,分化為成熟成骨細胞,介導骨吸收朝骨形成的轉換。在多重因子的刺激下,活化的成骨細胞在骨吸收的凹陷處大量增殖,分泌多種骨形成相關蛋白,與細胞外結晶的羥磷灰石等無機成分結合為成熟的骨基質,并逐漸礦化形成新骨。

成骨細胞能調節破骨細胞的增殖和分化,而破骨細胞也能調節成骨細胞的活性和功能。骨微環境內,成骨細胞和破骨細胞不同分化階段產生不同活性物質,包括生長因子、細胞因子、趨化因子和微小RNA等,通過細胞與細胞直接接觸或旁分泌方式,把兩種細胞功能和作用緊密聯系起來,協同進行平穩的骨重建活動，以維持正常的骨骼結構。近年來,局部分子信號在調節骨形成和骨吸收的作用得到廣泛研究,成骨細胞和破骨細胞間的關系也引起人們的重視。本文主要介紹成骨細胞和破骨細胞產生的活性物質在細胞間相互調節的作用。

1 成骨細胞分泌的活性物質對破骨細胞功能的調節作用

成骨細胞參與破骨細胞骨吸收的功能調節。成骨細胞分泌的活性物質,如核因子κB受體活化因子配體(receptor activator of nuclear factor-κB ligand, RANKL)、巨噬細胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor, M-CSF)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、趨化因子CX3C配體1(chemokine CX3C ligand 1, CX3CL1)、單核細胞趨化蛋白l(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)、胰島素樣生長因子(insulin-like growth factor, IGF)、溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA)和miR-34c等,可以調節破骨細胞在骨表面附著、增殖、分化和成熟等,促進骨吸收。與此相反,成骨細胞來源的骨保護素(osteoprotegerin, OPG)、前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)、IL-18、IL-33、信號素Sema3A(Semaphorin3A)、miR-125b和miR-503等活性物質,可以抑制破骨細胞骨吸收(Tab 1)。

Tab 1 The active substances produced by osteoblasts and their effects

1.1 正向調節破骨細胞的活性物質

1.1.1RANKL RANKL是跨膜結合蛋白或游離型多肽。成骨細胞在骨吸收因子的刺激下能分泌RANKL,并與破骨前體細胞的核因子κB受體活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)結合,從而促使破骨前體細胞分化為成熟的破骨細胞。在酸性環境下,破骨細胞的骨吸收活性增強。Okito等[1]發現酸性培養條件下成骨細胞RANKL表達水平上調。酸性環境中的成骨細胞主要功能是支持破骨細胞的形成和分化,而不是礦化。同時RANKL誘導分化的破骨細胞中存在多種趨化因子自分泌環,強化抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)陽性多核細胞的形成。

1.1.2M-CSF M-CSF是鏈間二硫鍵連接而成的二聚體糖蛋白。經骨吸收刺激因子作用,成骨細胞能分泌M-CSF。M-CSF受體c-Fms的表達僅限于巨噬細胞譜系。M-CSF與破骨前體細胞表面受體c-Fms結合,可以調節破骨細胞的增殖、分化及成熟。在破骨細胞分化的早期階段,M-CSF可以誘導破骨前體細胞表達RANK,并通過RANKL/RANK途徑促進破骨前體細胞的分化成熟,從而增強骨吸收作用。

1.1.3IL-6 白介素是糖蛋白類細胞因子。IL-4和IL-13協同IL-1能誘導成骨樣細胞表達具有生物活性的IL-6。在含有IL-6培養條件下,破骨細胞的數量顯著增多,成骨樣細胞的堿性磷酸酶 (alkaline phosphatase, ALP)活性和膠原合成被輕微抑制。IL-6和IL-6受體(IL-6R)結合促進破骨前體細胞在骨吸收處的招募,而抗IL-6R的中和抗體抑制IL-6誘導的多核破骨細胞的形成,說明成骨樣細胞產生的IL-6能促進破骨細胞骨吸收。

1.1.4趨化因子 趨化因子是一類具有誘導反應細胞定向遷移作用的小分子蛋白質,主要有CXC、CC、CX3C和XC 4個亞家族。在IL-1的作用下,成骨細胞CX3CL1的表達增加,破骨細胞前體表達CX3C趨化因子受體1(CX3C chemokine receptor 1,CX3CR1),這是CX3CL1的唯一受體[2]。CX3CL1能劑量依賴性地增加破骨細胞數量和破骨細胞的形成,促進破骨細胞前體細胞向骨重構表面的歸巢。敲除CX3CR1并使用特異性中和抗體對CX3CL1進行功能抑制,可減少破骨細胞生成,防止骨丟失[3]。MCP-1也是趨化因子CC亞家族中的一員。金黃色葡萄球菌感染下的人成骨細胞會分泌較高水平的MCP-1。趨化因子受體2(CC chemokine receptor 2, CCR2)在人破骨前體細胞中有明顯表達,MCP-1與CCR2高選擇性結合。持續的MCP-1作用將使破骨細胞過度活躍,而缺乏CCR2會導致更高的骨量。MCP-1可以誘導破骨前體細胞趨向骨重建部位,也可以促進單核破骨前體細胞募集、融合并生成破骨細胞。MCP-1基因的破壞也會導致單核破骨前體細胞在體外的遷移和募集過程受阻[4]。

1.1.5IGF IGF是一種能調控細胞增殖的多功能細胞因子,與胰島素原的化學結構相近。在骨組織中IGF主要由成骨細胞分泌,并儲存在骨基質中。IGF隨著骨基質被吸收逐漸釋放出來并與破骨細胞表達的IGF受體(insulin-like growth factor receptor,IGFR)結合,可以增加破骨細胞的數目和骨吸收面積。IGF-I和IGF-II是骨基質中最豐富的生長因子之一,成骨細胞產生的IGF-II比IGF-I更多,但IGF-I對破骨細胞的影響較強。在IGF-I刺激下,破骨細胞分化和功能活性迅速加強,破骨細胞形成標志物也廣泛增加[5]。IGF-I基因敲除小鼠表現為較小的破骨細胞和骨吸收面積,較少破骨細胞數目和細胞核融合數,同時也促使破骨細胞成熟相關的RANKL、RANK、M-CSF和c-Fms表達水平顯著下降。IGF-I一方面可能通過間接調節RANKL和RANK表達促進破骨細胞的分化,另一方面與IGFR結合直接支持單核破骨前體細胞向成熟破骨細胞的形成。

1.1.6LPA和miR-34c 成骨細胞來源的非蛋白質類的活性物質也可以促進破骨細胞骨吸收功能。LPA是一種具有強生物活性的磷脂。成骨細胞本身也能產生LPA,LPAR是破骨細胞中LPA的受體。LPA通過LPAR增強破骨細胞前體的分化,促進破骨細胞存活和融合,導致更大的破骨細胞形成[6]。miRNA是一種短小的非編碼單鏈RNA。在BMP2刺激的成骨分化過程中,成骨前體細胞中miR-34c的表達顯著升高。miR-34c轉基因小鼠表現出成骨細胞增殖分化減少,破骨細胞增多。miR-34c可以使成骨細胞的OPG水平降低以增加RANKL/OPG比值,從而導致破骨細胞分化增加。過表達的miR-34c促進破骨細胞分化,而下調miR-34c表達可以抑制破骨細胞分化。miR-34c也可以通過靶向RANKL的受體LGR4,激活Gαq/GSK3-β/NFATc1信號通路促進破骨細胞分化和骨吸收[7]。

1.2 反向調節破骨細胞的活性物質

1.2.1OPG OPG屬于TNF受體超家族,是肝素結合分泌型糖蛋白。成骨細胞可以分泌OPG,RANKL與OPG的親和力比RANK更強,OPG競爭性與RANKL結合,阻止了RANKL/RANK的信號傳導,抑制了破骨前體細胞的分化成熟。OPG/RANKL/RANK是成骨細胞調節破骨細胞形成和分化的經典通路。OPG缺陷小鼠破骨細胞數量增加,牙槽骨吸收嚴重,OPG的表達在抑制骨吸收中起重要作用。

1.2.2IL-18和IL-33 IL-18和IL-33同屬于IL-1家族。內皮素-1可以誘導人成骨細胞IL-18的表達,IL-18可以和IL-18R結合抑制破骨細胞的形成,從而抑制破骨細胞性骨吸收。甲狀旁腺激素可以誘導成骨細胞IL-33表達增加,IL-33通過IL-33R結合，發揮強烈抑制破骨細胞的形成作用,而IL-33R敲除可導致破骨細胞數量的增加,IL-33阻斷抗體可以解除IL-33對破骨細胞形成的抑制作用。IL-33可以通過弱化RANKL或M-CSF刺激減少破骨細胞形成。M-CSF可以抑制IL-33的作用,而M-CSF中和抗體可以恢復IL-33對破骨細胞形成的抑制作用[8]。

1.2.3Sema3A Sema3A是一類重要的軸突誘向因子,是一種分泌型蛋白。成骨細胞分泌的Sema3A呈劑量依賴性的抑制破骨細胞生成。Sema3A是成骨細胞產生的一種有效的骨保護因子,可以與破骨前體細胞Plexin-A和Nrp1形成的復合物受體結合,抑制破骨細胞分化,促進成骨細胞骨形成。RANKL信號能顯著下調Nrp1的表達促進破骨細胞生成,只有在RANKL刺激前加入Sema3A才能觀察到破骨形成的抑制現象。所以RANKL調控的Nrp1表達緊密控制sema3A的抗破骨細胞生成功能。sema3A與Nrp1結合通過抑制ITAM和RhoA信號通路從而減弱破骨細胞分化。破壞Nrp1基因的小鼠出現骨質減少表型,而靜脈注射sema3A可以加速小鼠骨再生[9]。

1.2.4PGE2前列腺素是一類具有廣泛生理活性的不飽和脂肪酸,骨組織中的PGE2主要由成骨細胞分泌。PGE2通過受體EP可以抑制破骨細胞骨吸收陷窩的面積擴大和數量的增加,對分離的破骨細胞骨吸收功能有抑制作用。但也有研究表明PGE2可以促進破骨細胞形成,PGE2對成熟破骨細胞的直接作用還存在爭議。

1.2.5miR-125b和miR-503 成骨細胞分泌的外泌體中含有miR-125b和miR-503。miR-125b在骨基質中儲存并積累,成熟的破骨細胞骨吸收時釋放骨基質中的miR-125b。miR-125b可以靶向并降解破骨前體細胞中的轉錄因子Prdm1來抑制其朝成熟破骨細胞方向分化。成骨細胞中過表達miR-125b的轉基因小鼠表現為破骨細胞的數量減少,骨小梁骨量增加。過表達miR-125b還可以減少去卵巢或脂多糖誘導的模型小鼠骨丟失[10]。RANK是miR-503的功能靶點,miR-503可以通過抑制RANK表達阻礙破骨細胞分化。使用agomir過表達miR-503抑制了RANKL誘導的破骨細胞形成,抑制骨吸收,防止骨丟失,而使用特異性的antagomir沉默miR-503可促進破骨細胞的形成,促進骨吸收,減少骨量[11]。

2 破骨細胞分泌的活性物質對成骨細胞功能的調節作用

破骨細胞參與成骨細胞骨形成功能調節。在破骨細胞來源的活性物質中,轉化生長因子β(transforming growth factor-β, TGF-β)、骨形態發生蛋白2(bone morphogenetic protein-2, BMP-2)、Wnt10b、肝配蛋白B2(erythropoietin-producing human hepatocellular receptors ligand B2, ephrinB2)、基質細胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1, SDF-1)和1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate, S1P)等可以正向調節成骨細胞的生理活動,包括促進成骨細胞的募集、成熟、分化和礦化等。相反地,肝配蛋白A2(erythropoietin-producing human hepatocellular receptors ligand A2, ephrinA2)、信號素Sema4D(Semaphorin4D)、絲氨酸蛋白酶1(high temperature requirement A1, HtrA1)、骨硬化蛋白 (sclerostin)、miR-214-3p和miR-23a-5p等可以反向調節成骨細胞的活性和功能(Tab 2)。

Tab 2 The active substances produced by osteoclasts and their effects

2.1 正向調節成骨細胞的活性物質

2.1.1TGF-β 參與骨重建的破骨細胞可以分泌TGF-β,TGF-β最初以無活性形式儲存于骨基質中。當破骨細胞積極參與骨吸收時,破骨細胞分泌組織蛋白酶,從而釋放并激活骨基質中的TGF-β。TGF-β可與成骨細胞膜上各個亞型的TGF-β受體(TGF-βR)結合發揮作用。TGF-β信號可以誘導成骨細胞前體細胞遷移和成熟,促使成骨細胞合成各型膠原蛋白、骨黏連蛋白和骨橋蛋白等細胞外骨基質的有機成分,并促進骨基質礦化。同時TGF-β也增強成骨細胞RANKL的表達,從而促進破骨前體細胞的募集。TGF-β對成骨細胞和破骨細胞分化具有雙向作用,突出了其對骨代謝的復雜影響[12]。

2.1.2BMP BMP屬于TGF-β超家族成員,是從骨基質中分離的一種活性蛋白質,BMP通過與細胞骨形態發生蛋白受體(bone morphogenetic protein receptor,BMPR)結合來發揮作用。IL-23可促使破骨細胞中成骨因子BMP2的表達。BMP2顯著增加骨鈣素表達,促進成熟成骨細胞的生成。BMP2/4基因敲除小鼠表現為成骨細胞的形態較小且生長緩慢,ALP活性和成骨相關基因表達減弱,礦化能力降低和嚴重的成骨損傷。而外源性添加的BMP2或BMP4可以使成骨細胞分化和礦化能力恢復[13]。BMP6也是破骨細胞分泌產物之一,其能增加去勢大鼠的骨體積和改變骨組織力學特性,上調成骨細胞表面骨保護素、ALP和Ⅰ型膠原水平,從而恢復骨微結構和骨骼質量。

2.1.3Wnt10b Wnt10b是一種分泌型糖蛋白,也是Wnt膜蛋白受體的配體。活化的TGF-β可以刺激破骨細胞生成和分泌Wnt10b,促進成骨細胞礦化。用Wnt信號抑制劑dickkophrelated protein 1阻斷Wnt10b活性,可抑制TGF-β處理的破骨細胞條件培養基促進成骨細胞礦化的能力[14]。Wnt10b的缺失小鼠導致骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)自我維持和更新的缺陷,BMSCs來源的成骨細胞活性降低,并引發后續的成骨細胞分化標志物ALP和骨鈣素的表達降低以及骨小梁的骨損失[15]。

2.1.4EphrinB2 Ephrin是Eph樣受體酪氨酸蛋白激酶的配體,也是膜結合型信號傳遞蛋白質。破骨細胞表達的ephrinB2能與成骨細胞表達的受體EphB4結合,向成骨細胞傳遞正向信號增強成骨分化。成骨細胞過表達EphB4可以增強小鼠成骨細胞功能,而siRNA敲低EphB4導致成骨細胞分化減少。RANKL能刺激破骨細胞ephrinB2的表達,并通過EphB4激活ERK1/2通路和減弱RhoA活性,促進下游成骨細胞成骨相關因子Runx 2和Osterix的轉錄,強化成骨細胞骨形成作用[16]。

2.1.5SDF-1 SDF-1也稱CXCL12,屬于CXC類趨化因子。破骨細胞分化或骨吸收過程中,破骨細胞向胞外分泌SDF-1 因子。BMSCs表達SDF-1的特異性受體CXCR4,SDF-1因子具有引導BMSCs遷移,分化為成熟的成骨細胞作用[17]。CXCR4在未成熟成骨細胞中表達比在成熟成骨細胞和骨細胞的表達更多。SDF-1與成骨細胞受體CXCR4結合,參與成骨細胞成骨相關蛋白表達和骨形成。CXCR4敲除小鼠表現為骨質減少,礦物附著速率減慢,成骨相關的I型膠原和骨鈣素表達減少。通過siRNA、抗SDF-1的中和抗體或CXCR4拮抗劑阻斷SDF-1/CXCR4通路會抑制成骨細胞分化。表明SDF-1/CXCR4信號通路通過影響成骨細胞的發育而在骨形成中發揮作用[18]。

2.1.6S1P S1P是一種具有生物活性的鞘氨醇骨架脂類分子。在成熟的多核破骨細胞中,升高的鞘氨醇激酶1能催化S1P的形成并分泌到細胞外。S1P與S1P受體(sphingosine 1-phosphate receptor,S1PR)結合誘導成骨細胞前體遷移到骨重塑位點,增強成骨細胞的存活和刺激骨形成。而S1P拮抗劑能減弱人間充質干細胞向成骨細胞分化能力,降低S1P對成骨細胞礦化結節的形成和趨化作用[19]。同時，S1P 還能夠刺激成骨細胞分泌RANKL,也能間接調控破骨前體細胞的分化。

2.2 反向調節成骨細胞的活性物質

2.2.1EphrinA2 破骨細胞源外泌體表達EphrinA2,通過靶向成骨細胞膜表面的受體EphA2,引導外泌體與成骨細胞融合并釋放內容物miR-214,從而發揮抑制成骨作用。EphrinA2/EphA2途徑的抑制成骨分化作用可被EphrinA2蛋白的Efna2 siRNA或EphA2 siRNA緩解。抑制破骨細胞源外泌體的形成和釋放，也可減弱miR-214對成骨細胞活性降低作用。nSMase和Rab27a是破骨細胞生成外泌體的兩個關鍵蛋白,nSMase的拮抗劑GW4869和Rab27a siRNA通過減少破骨細胞源外泌體的形成和釋放,可以達到減弱成骨細胞活性抑制效果[20]。

2.2.2Sema4D Sema4D是一種免疫信號素,參與多種重要生理功能的跨膜蛋白分子。破骨細胞分泌的sema4D能與成骨細胞Plexin-B1受體結合,干預IGF-1信號通路,抑制成骨細胞分化,促進骨形成向骨吸收的轉化。sema4D敲除小鼠和Plexin-B1敲除小鼠的骨形成增多,出現骨硬化表型,而抗sema4D的特異性抗體能防止骨質疏松癥模型小鼠的骨丟失[21]。在骨重建過程中,破骨細胞通過sema4D與Plexin-B1的結合來調控成骨細胞的遷移。sema4D誘導的接觸排斥現象解釋了成骨細胞和破骨細胞之間存在的空間間距,而Plexin-B1基因敲除消除了兩種細胞的間距。破骨細胞可能利用sema4D介導的接觸排斥作用,從而排斥成骨細胞獲得骨基質來進行骨吸收[22]。

2.2.3HtrA1和Sclerostin 破骨細胞來源的HtrA1和Sclerostin都能通過拮抗BMP對成骨細胞發揮作用。HtrA屬于絲氨酸蛋白酶家族,是一種分泌蛋白。HtrA1由破骨細胞分泌,作為外源性因子負調控成骨細胞分化和礦化過程,但不影響破骨細胞。HtrA1通過結合BMP2并使其失活,減少BMP2介導的成骨細胞Smad、ERK和p38磷酸化以及ALP、Runx2、骨鈣素和骨橋蛋白的基因表達,從而抑制成骨細胞分化[23]。而HtrA1過表達延遲了細胞礦化進程,降低了Cbfa1和I型膠原的表達,并阻止BMP2誘導的成骨細胞礦化,siRNA沉默HtrA1的表達可以促進成骨細胞礦物沉積。Sclerostin是一種分泌型蛋白信號肽,且僅限于破骨細胞表達。Sclerostin因與BMP6和BMP7的結合具有較高的親和力,可作為BMP的拮抗劑。Sclerostin通過抑制BMP6和BMP7活性,負調控成骨細胞的分化、功能以及骨形成,而抑制Sclerostin可能導致骨密度增加的骨硬化癥。Sclerostin在破骨細胞骨吸收和成骨細胞骨附著功能中起到鏈接作用[24]。

2.2.4miR-214-3p和miR-23a-5p 破骨細胞源外泌體內含的miRNA是實現破骨細胞與成骨細胞之間通信的物質基礎。Li等[25]發現，破骨細胞來源外泌體miR-214-3p可以轉移到成骨細胞內抑制骨形成。miR-214-3p的過表達能加強對成骨細胞的活性降低作用,而阻斷miR-214-3p對成骨細胞的信號傳遞,可以促進骨形成。miR-214-3p可以靶向ATF4成骨轉錄因子抑制骨形成,從而調控下游成骨相關基因表達。Yang等[26]發現，miR-23a-5p在破骨細胞的外泌體中高表達,miR-23a-5p可以抑制成骨細胞活性,可以降低成骨細胞Runx2和ALP的表達。miR-23a-5p過表達能使早期成骨減少,而miR-23a-5p抑制劑使早期成骨增加。miR-23a-5p通過調控下游通路Runx2/MT1DP影響成骨細胞分化。阻礙破骨細胞源外泌體釋放，也可以減弱miR-23a-5p介導的破骨細胞對成骨細胞分化的抑制作用。

3 小結與展望

目前，這些活性物質大多屬于蛋白質類,隨著細胞外泌體研究領域的興起,越來越多的miRNA類核酸物質已被證實參與成骨細胞與破骨細胞之間的交流。脂類活性成分在兩種細胞之間的調控作用也引起人們的關注。趙銳等[27]總結了Runx2及其下游Osterix成骨特異性轉錄因子與主要成骨分化相關基因的表達密切相關,在成骨細胞分化中起關鍵調控作用。與成骨分化有關的重要信號通路,如BMP/Smad、Wnt/β-catenin和PI3K/AKT等,通過直接或間接方式作用于Runx2或Osterix 等關鍵轉錄因子。在破骨細胞分泌的活性物質中,TGF、BMP、wnt106、HtrA1或Sclerostin等可以通過上述信號通路間接影響Runx2的表達,而miR-23a-5p可以直接靶向Runx2發揮抑制成骨作用。SDF-1、S1P或Sema4D等可能傾向于影響成骨細胞的募集或撤離來調控骨形成的起始和終止過程。任莉榮等[28]總結了RANKL/RANK/OPG、M-CSF/C-FMS和ITAM等是破骨細胞形成和分化的經典通路,經典通路所形成的破骨細胞體積大、細胞核數量多和骨吸收凹陷深。成骨細胞來源的活性物質,如RANKL、RANK、OPG、M-CSF、Sema3A和miR-503等與上述經典通路密切相關,也存在直接作用和間接作用的區別。根據Knowles等[29]總結的破骨細胞分化的非經典通路,成骨細胞分泌的IL-6可作為RANKL的替代品,但作用弱于RANKL,而PGE2、IL-18、IL-33等炎癥因子也可能通過非經典通路來發揮作用。CX3CL1和MCP-1等趨化因子主要與破骨前體細胞的定向遷移活動有關。

生理或病理條件下,成骨細胞和破骨細胞受不同刺激,產生的活性物質種類及含量也相應變化。如組織缺氧條件下,成骨細胞分泌的OPG含量顯著升高,而甲狀旁腺素和異丙腎上腺素刺激下,成骨細胞的RANKL和MCP-1表達上調。當然,骨疾病相關防治藥物也對人體內環境產生影響,如pH、滲透壓、激素和細胞因子水平的改變等,從而間接調節成骨細胞或破骨細胞產生的活性物質。近年來,越來越多的單體藥物可以雙向調節成骨細胞和破骨細胞活性,如淫羊藿苷、仙茅酚苷和葛根素等,經典中藥及復方亦是如此,如補骨脂、女貞子、燈盞花和二仙湯、二至丸、強骨飲等。研究發現部分藥物能影響成骨細胞分泌OPG、RANKL和M-CSF等活性物質,甚至外泌體的產生及其內容物miRNAs的改變。因此,藥物通過調節成骨細胞和破骨細胞間偶聯因子方式,來達到維持骨形成和骨吸收動態平衡目的,這引起了人們極大的研究興趣。