一種高效分離畜禽血清的方法

文│李紅艷（貴州省綏陽縣動物疫病預防控制中心）

蔣宗仁（貴州省綏陽縣畜牧漁業站）

在長期實踐中發現，畜禽血液采集后，如果畜禽血清分離期間所處的環境溫度過低，畜禽血清分離數量將會很少，溫度過低甚至會使紅細胞破裂并濕氣內容物釋放入血漿，使血清發生溶血現象，也會使血液中比紅細胞比重小的纖維蛋白原不能聚集，發生凝固不全，形成膠凍狀樣品。這些狀態和現象都會影響獸醫實驗室診斷、檢驗、檢測等分析結果的準確性，也會延誤畜禽疫病的即時防控、處置。而相關資料顯示，適宜的環境溫度（25～37℃）能增加畜禽血清的自然析出。但在畜牧獸醫工作中，畜禽血清分離時所處溫度環境多在自然環境中，或者在裝有試管架的疫苗冷藏箱內，或者在養殖場戶室內，這些溫度環境很可能達不到所需溫度要求。而且優質畜禽血清分離的質量和數量除了溫度適宜外，也需要數小時的分離時間（Δt≥1.5小時），在上述溫度環境中，等待畜禽血清分離，然后再去采集其他養殖場戶的畜禽血液樣品或運輸到接樣地點極不現實，這會給畜牧獸醫工作者的采樣、送樣、檢測、監測工作帶來諸多不便。

一、操作方法

1.當環境溫度t≤10℃時，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前選用2～4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，讓箱內溫度逐步升高，然后再將采集血液放入箱內。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時后，應重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內1.5～2小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時后，應重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內的溫度已降到25℃左右。再重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內2～2.5小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（3）如果將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時后，重新換4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（4）如果急需分離畜禽血清，如上級部門在短時間內需帶走血清，或者畜牧獸醫工作者在短時間內急需檢測血清樣品，則在畜禽血液采集前直接將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，因為適度高溫能加快畜禽血清的分離，此時疫苗冷藏箱內溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥1.5小時后用移液器提取血清即可。

2.當10℃≤環境溫度≤20℃時，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前將2～4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，讓箱內溫度逐步升高，然后再采集血液放入箱內。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時后，應重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。在重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內2～2.5小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時后，應重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已經降到25℃左右。再重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內2～2.5小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（3）如果將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2.5～3小時后，應重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（4）如果急需分離畜禽血清，在畜禽血液采集前直接用4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥1.5小時后用移液器提取血清即可。

3.當20℃≤環境溫度≤25℃時，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前將2～3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，讓箱內溫度逐步升高，然后再采集血液放入箱內。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內1.5～2小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2.5～3小時后，應重新更換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（3）如果急需分離畜禽血清，在畜禽血液采集前，直接將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，讓疫苗冷藏箱內溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥1.5小時后用移液器提取血清即可。

4.當25℃≤環境溫度≤33℃時，如果不急需分離畜禽血清，直接將血液放在只有泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。如果畜禽血液在疫苗冷藏箱內靜置過夜，第二天再用移液器提取，血清質量和數量更佳。如果急需分離畜禽血清，直接用2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，讓疫苗冷藏箱內溫度維持在37℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥1.5小時后用移液器提取血清即可。

二、注意事項

（1）裝有畜禽血液的疫苗冷藏箱在運輸途中應輕拿輕放，盡量避免劇烈晃動，否則會使紅細胞內的化學物質釋放入血漿，并引發溶血現象，降低血清質量，影響畜禽血清學試驗分析結果的準確性。

（2）為避免燙壞血液、血清，裝有100℃開水的礦泉水瓶應和采集的血液樣品保持5厘米以上的距離。

（3）為了使析出的畜禽血清質量和數量更佳，如果不急需帶走血清或用于緊急血清學檢測，畜禽血液盡量放在疫苗冷藏箱內靜置過夜，第二天再用移液器提取血清。

三、小結

該畜禽血清分離方法簡單易行、使用靈活、能隨機應變所處環境溫度，為畜禽血液采樣人員隨時可以在不同采樣地點間移動，采集更多畜禽血液樣品提供方便，提高了工作效率。該方法幾乎無經濟成本卻能產生更高質量和數量的澄清、無溶血、無異物、稍黏稠的優質畜禽血清，提高了畜禽血清析出效率，為畜禽血清學實驗室診斷、檢測、檢驗提供了更可靠的原料保證，加快了畜禽動物疫病檢測、監測進程，使檢測、監測結果更精準、更及時、更快速地應對和處置畜禽疫情。