不同品種牛超數(shù)排卵效果比較

文│王敏 孫義樂 韓歡勝（黑龍江八一農墾大學動物科技學院）

胚胎移植技術是繼人工授精技術后的又一項重要繁殖技術，該技術對加快良種利用和提高畜群生產性能方面具有重要意義。牛胚胎移植技術包括供體牛與受體牛選擇、同期發(fā)情、人工輸精、超數(shù)排卵、胚胎移植等技術環(huán)節(jié)，超數(shù)排卵是其最關鍵的一個環(huán)節(jié)，超數(shù)排卵效果的好壞將直接影響胚胎移植技術的成功和推廣。關于超數(shù)排卵技術，國內外從超數(shù)排卵方案、藥物篩選及藥物最佳作用時間等多角度開展了相關研究，隨著胚胎移植技術的推廣應用，超數(shù)排卵技術逐步走向成熟。目前，中國牛業(yè)主要養(yǎng)殖品種是荷斯坦奶牛、西門塔爾牛，日本和牛在一些地區(qū)呈現(xiàn)良好發(fā)展勢頭，超數(shù)排卵技術在牛的繁殖生產上被廣泛應用，超數(shù)排卵效果直接決定胚胎移植技術的應用效益，關于荷斯坦奶牛、西門塔爾牛和日本和牛超數(shù)排卵效果單品種研究報道較多，3個品種間的比較研究未見報道，為更好地推廣應用胚胎移植技術，本試驗對3個品種牛超數(shù)排卵效果進行比較。

一、材料與方法

1.試驗動物。超數(shù)排卵供體牛由黑龍江省齊齊哈爾市龍江縣哈拉海鄉(xiāng)元盛牧場提供，荷斯坦奶牛9頭、日本和牛54頭、西門塔爾牛21頭。所選牛只為在相同飼養(yǎng)管理條件下經產的、產后60天以上的、無繁殖障礙疾病的青壯年母牛。

2.超數(shù)排卵及胚胎質量鑒定方法。

（1）同期發(fā)情。采用CIDR-PG法進行同期發(fā)情處理。在牛陰道內埋植孕酮栓CIDR，埋栓時同時肌內注射維生素ADE 10毫升/頭，埋栓當天記為0天，埋栓9 天后撤栓，撤栓同時肌內注射PG 0.4～0.6毫克/頭，撤栓后用涂抹蠟筆的公牛試情，觀察發(fā)情狀況。

（2）人工輸精。母牛接受爬跨后12小時輸精1次，間隔12小時再進行第2次輸精。

（3）采胚。在人工輸精后第7天采用非手術法進行采胚。

（4）胚胎質量鑒定。回收的胚胎依據(jù)牛胚胎（GB/T 25881-2010）標準進行質量分級統(tǒng)計，本試驗根據(jù)生產冷凍胚胎要求將A級胚、B級胚統(tǒng)計為可用胚，C級胚、D級胚統(tǒng)計為淘汰胚，A級胚統(tǒng)計為優(yōu)質胚，B級胚統(tǒng)計為一般胚。

3.超數(shù)排卵比較試驗。按品種將荷斯坦奶牛、日本和牛和西門塔爾牛分為3組，統(tǒng)一采用CIDR-PG同期發(fā)情超數(shù)排卵后，對各品種牛的超胚數(shù)量和胚胎質量指標進行組間比較，最后從效益角度進行綜合比較，確定不同品種牛超數(shù)排卵效果。

評定的數(shù)量指標主要有平均回收胚胎數(shù)、平均可用胚胎數(shù)、可用胚率；評定的質量指標主要有胚胎優(yōu)質率和胚胎淘汰率。

4.數(shù)據(jù)處理。采用SPSS 16.0軟件和Excel軟件對數(shù)據(jù)進行分析，組間采用t檢驗法和單因素方差分析，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

二、結果

1.不同品種牛超數(shù)排卵胚胎數(shù)量情況。由表1可知，荷斯坦奶牛、日本和牛和西門塔爾牛平均回收胚胎數(shù)分別為（15.00±12.11）枚、（9.82±7.55）枚和（12.86±8.92）枚；平均可用胚胎數(shù)分別為（10.44±10.80）枚、（6.31±5.72）枚和（6.62±5.60）枚；可用胚率分別為69.63%、64.33%和51.48%。從胚胎數(shù)量看，3個品種在平均回收胚胎數(shù)和平均可用胚數(shù)上無顯著差異（P＞0.05），但在可用胚率上存在極顯著差異（P＜0.01）。

表1 不同品種牛超數(shù)排卵胚胎數(shù)量情況

◎圖1 不同品種牛超數(shù)排卵獲胚情況比較

◎圖2 不同品種牛超數(shù)排卵可用胚率、優(yōu)質胚率和淘汰胚率情況比較

2.不同品種牛超數(shù)排卵胚胎質量情況。由表2可知，荷斯坦奶牛、日本和牛和西門塔爾牛優(yōu)質胚率分別為50.37%、42.08%和35.19%；淘汰胚率分別為30.37%、35.66%和48.51%。從獲得的胚胎質量看，3個品種間在優(yōu)質胚率和淘汰胚率存在極顯著差異（P＜0.01）。

表2 不同品種牛超數(shù)排卵胚胎質量情況

3.不同品種牛超數(shù)排卵效果綜合比較。由表3、圖1和圖2可知，從獲得平均回收胚和平均可用胚上看，優(yōu)劣順序是荷斯坦奶牛＞西門塔爾牛＞日本和牛，但三者間統(tǒng)計上無顯著差異（P＞0.05）；從可用胚率、優(yōu)質胚率和淘汰胚率上看，優(yōu)劣順序是荷斯坦奶牛＞日本和牛＞西門塔爾牛。綜合效果比較，奶牛品種超數(shù)排卵效果優(yōu)于肉牛品種，肉牛超數(shù)排卵效果中日本和牛又優(yōu)于西門塔爾牛。

表3 不同品種牛超數(shù)排卵效果綜合比較結果

三、討論與分析

本試驗3種不同品種牛超數(shù)排卵效果，數(shù)量指標：優(yōu)劣順序是荷斯坦奶牛＞西門塔爾牛＞日本和牛；質量指標：優(yōu)劣順序是荷斯坦奶牛＞日本和牛＞西門塔爾牛；綜合比較，奶牛超數(shù)排卵效果優(yōu)于肉牛，肉牛中日本和牛超數(shù)排卵效果又優(yōu)于西門塔爾牛；3個不同品種牛超排效果存在一定差異性。研究報道，荷斯坦奶牛、西門塔爾牛和日本和牛的平均回收胚數(shù)為10.51枚（9～13枚）、13.59枚（3～14枚）和7.7枚；平均可用胚分別為5.12枚（5～8枚）、5.94枚（1～9枚）和5.2枚。本試驗結果平均回收胚胎數(shù)分別為15、9.82和12.86枚；平均可用胚胎數(shù)分別為10.44、6.31和6.62枚，這與國內研究報道基本相一致。

3個品種牛超數(shù)排卵數(shù)量指標有一定差異，但統(tǒng)計上無顯著性差異。分析其原因，超數(shù)排卵主要受牛自身生理狀況（體況、卵巢機能、生產性能等）和外部條件（溫度環(huán)境、營養(yǎng)條件、激素種類、超排方法等）兩大因素影響，本試驗是在相同的飼養(yǎng)管理條件和統(tǒng)一超排方案下進行的，3個品種間平均回收胚在統(tǒng)計上無顯著性差異，說明3個品種牛超數(shù)排卵效果盡管與不同品種的牛生理狀況有一定關系，但主要與超排方案有關，換言之，3個品種牛只要飼養(yǎng)管理和牛體況差別不大，用同種超排方案下，3個品種牛獲得胚胎數(shù)的差異不明顯。

3個品種牛超數(shù)排卵質量指標差異顯著。研究報道，體況評分為個體肥胖的牛在超數(shù)排卵過程中雌激素水平相對降低，引起促黃體生成素峰值的變化。本試驗荷斯坦奶牛超排時泌乳高峰期已過，體況正由營養(yǎng)負平衡向營養(yǎng)正平衡轉變，盡管3個品種牛飼養(yǎng)條件相同，但相對于日本和牛、西門塔爾牛兩個品種肉牛，荷斯坦奶牛肥胖概率遠小于肉牛。在本試驗中，質量方面，奶牛優(yōu)于肉牛，日本和牛優(yōu)于西門塔爾牛，不同品種牛胚胎質量出現(xiàn)較大差異，應主要與牛體況肥胖程度有直接關系。

另外，在試驗中發(fā)現(xiàn)，與野性較大的西門塔爾牛相比，在同期發(fā)情處理時，性情溫順的荷斯坦奶牛、日本和牛丟栓率低，肥胖的牛直腸部脂肪沉積多，會影響輸精、采胚準確度，這可能也是影響不同品種牛超排效果的一個因素。

在生產上，超數(shù)排卵的效果主要用可獲得的效益來衡量，可用胚數(shù)和胚胎質量是其主要衡量的指標，從生產效益看，奶牛品種超數(shù)排卵效果優(yōu)于肉牛品種，肉牛中日本和牛超數(shù)排卵效果優(yōu)于西門塔爾牛。這一結果對不同品種牛的胚胎生產和胚胎移植技術推廣與應用具有重要的參考價值。

四、結論

本試驗結果表明，在飼養(yǎng)管理相同和超排方案一致的情況下，比較荷斯坦奶牛、日本和牛與西門塔爾牛3個不同品種牛的超排效果發(fā)現(xiàn)，荷斯坦奶牛優(yōu)于肉牛，肉牛中日本和牛優(yōu)于西門塔爾牛。