食用檳榔廢棄籽的活性成分提取及抗氧化、α-葡萄糖苷酶抑制活性分析

張培月，唐敏敏，宋 菲，劉 璨，陳 華,3,

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北武漢 430070；2.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所，海南文昌 571339；3.海南省檳榔產(chǎn)業(yè)工程研究中心，海南文昌 571339）

檳榔是一種棕櫚科常綠喬木植物的果實(shí)，可藥用和食用[1]。全球檳榔生產(chǎn)與消費(fèi)有3000年歷史，目前，世界上有十分之一的人嚼食檳榔[2-3]。在我國(guó)，檳榔主要有兩種食用方式，一種是鮮食，即把檳榔鮮果切開后，包上涂有貝殼粉的蔞葉直接嚼食；另一種食用的是加工后的檳榔干果[4]。海南省是我國(guó)檳榔種植規(guī)模最大的省份，2019年末全省檳榔面積超過11.51萬 hm2，總產(chǎn)量超過28.70萬噸，檳榔已成為海南230萬農(nóng)民的主要經(jīng)濟(jì)來源[5]。湖南省是我國(guó)食用檳榔的主要加工省份，加工食用檳榔已成為中國(guó)食品加工的一大產(chǎn)業(yè)，其消費(fèi)已經(jīng)遍布全國(guó)各地，2019年全國(guó)檳榔產(chǎn)業(yè)年產(chǎn)值超過400億元，帶動(dòng)物流、包裝、食品添加劑等相關(guān)產(chǎn)業(yè)產(chǎn)值超500億元[6]。檳榔廢籽由檳榔鮮果經(jīng)過多個(gè)加工工藝加工后切開除籽而來，據(jù)統(tǒng)計(jì)，食用檳榔每年加工剔除的檳榔籽多達(dá)35000噸，被剔除的檳榔籽一般被當(dāng)做廢棄物處理，基本被焚燒，甚至丟棄，既污染環(huán)境，又造成了資源浪費(fèi)。

檳榔含有多種活性成分，對(duì)于檳榔中多酚[7-8]和生物堿[9-10]等活性成分的功效功能已有較多研究。檳榔堿是檳榔的主要藥用成分之一[11]。有研究表明，一定含量的生物堿可以增加小鼠腦中乙酰膽堿的濃度，激活下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸[12]，改善老年性癡呆癥[13]，明顯地增強(qiáng)小鼠腸道和離體腸蠕動(dòng)，興奮胃腸道平滑肌，影響離體豚鼠回腸自發(fā)收縮，檳榔堿還可在一定程度上對(duì)抗血栓形成[14]，抗炎[11]和抑制骨質(zhì)疏松[15]。也有研究指出，檳榔生物堿有致口腔粘膜下纖維性變、損害神經(jīng)系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)等的作用[16]。黃酮類化合物被證明有抗氧化的作用[17-18]，韓林等發(fā)現(xiàn)未經(jīng)加工的檳榔籽提取物具有抗氧化活性，且抗氧化活性的大小與總酚的含量及組成有關(guān)[19]，宋菲等認(rèn)為未經(jīng)加工的檳榔籽多酚提取物具有降血糖功能[20]，張璐等檢測(cè)到經(jīng)初加工的檳榔籽提取物具有抗氧化能力[21]，而對(duì)于檳榔廢籽的活性成分含量、抗氧化活性和降血糖功能的系統(tǒng)研究較少。

因此，本文以食用檳榔廢籽為研究對(duì)象，以75%乙醇為提取溶劑進(jìn)行超聲輔助提取，測(cè)定了其總多酚、總黃酮、原花青素含量及檳榔生物堿等活性成分，檢測(cè)了部分黃酮組分，并且利用體外抗氧化評(píng)價(jià)體系和降血糖評(píng)價(jià)體系對(duì)其進(jìn)行抗氧化能力和降血糖能力研究，以期為檳榔廢棄籽的開發(fā)利用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

檳榔廢棄籽 某食用檳榔加工企業(yè)提供；L-抗壞血酸（維生素C） 上海麥克林生化科技有限公司；沒食子酸、蘆丁和兒茶素等標(biāo)準(zhǔn)品、α-葡萄糖苷酶（來源于釀酒酵母，14.5 U/mL） 西格瑪奧德里奇（上海）貿(mào)易有限公司；1，1-二苯基-2-苦基肼（DPPH）、阿卡波糖 北京索萊寶科技有限公司；2，2'-聯(lián)氮雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽（ABTS+） 上海阿拉丁生化科技有限公司；對(duì)硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（P-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside，PNPG）上海源葉生物科技有限公司；其他試劑均為分析純國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

A11BS25 高速中藥粉碎機(jī) 德國(guó)IKA 公司；ALLPSE-40 超聲波清洗機(jī) 深圳市超藝達(dá)科技有限公司；AL204-IC 電子天平 梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；DK-98-11A 電熱恒溫水浴鍋 天津市泰斯特儀器有限公司；Varioskan Flash 全波長(zhǎng)多功能酶標(biāo)儀 美國(guó) Thermo 公司；MVA15G0014 紫外可見分光光度計(jì) 翱藝儀器（上海）有限公司；PHS-3C pH計(jì) 上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；DP-406DG 真空冷凍干燥機(jī) 無錫德普儀器制造有限公司；ExionLC AD超高效液相、QTrap 6500高靈敏度質(zhì)譜 美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 檳榔廢棄籽活性物質(zhì)提取 清除雜物后，將檳榔廢籽60 ℃低溫烘干，然后用高速中藥粉碎機(jī)粉碎，以75%的乙醇作為提取溶劑，超聲輔助提取。料液比1:10 （g/mL），超聲波頻率40 kHz，提取3次每次30 min，400 目紗布過濾，合并濾液，1500 r/min，離心30 min，收集上清液，低溫旋蒸除去乙醇后冷凍干燥。取適量提取物溶于甲醇，得到200 mg/mL的儲(chǔ)備液，過0.20 μm的微孔濾膜后存于-20 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 活性成分含量測(cè)定

1.2.2.1 總多酚含量的測(cè)定 總多酚含量的測(cè)定采用福林酚氧化法[22]。在波長(zhǎng)765 nm處測(cè)定吸光值，用甲醇溶液作為空白對(duì)照，以濃度C（Y，μg/mL）對(duì)吸光值（X）作圖，得到?jīng)]食子酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線。沒食子酸濃度C=86.966×A765-7.0379，R2=0.9987。樣品按照相同的方法測(cè)定其吸光值，總多酚含量以每克提取物中的沒食子酸含量計(jì)。

1.2.2.2 總黃酮含量的測(cè)定 總黃酮含量的測(cè)定采用亞硝酸鈉-硝酸鋁法[22]。在波長(zhǎng)510 nm處測(cè)吸光值，用甲醇溶液作為空白對(duì)照，以濃度C（Y，μg/mL）對(duì)吸光值（X）作圖，得到蘆丁的標(biāo)準(zhǔn)曲線。蘆丁濃度C=296.84×A510-15.207，R2=0.9987。樣品按照相同的方法測(cè)定其吸光值，總黃酮含量以每克提取物中的蘆丁含量計(jì)。

1.2.2.3 原花青素含量的測(cè)定 原花青素含量的測(cè)定采用香草醛-鹽酸法[23]，于暗處反應(yīng)30 min，然后在波長(zhǎng)510 nm處測(cè)吸光值，用甲醇溶液作為空白對(duì)照，以濃度C（Y，μg/mL）對(duì)吸光值（X）作圖，得到兒茶素的標(biāo)準(zhǔn)曲線。兒茶素濃度C=415.1×A510-15.304，R2=0.9994。樣品按照相同的方法測(cè)定其吸光值，原花青素含量以每克提取物中的兒茶素含量計(jì)。

1.2.2.4 黃酮類化合物組分測(cè)定 黃酮類化合物組分測(cè)定測(cè)定參照文獻(xiàn)[24]。

黃酮類化合物提取：取10 mg PSE加入5 mL離心管，加入2000 μL提取液A（75%甲醇含1%乙酸）渦旋30 s后冰水浴超聲60 min后，12000 r/min離心15 min；取1500 μL上清液氮?dú)獯蹈桑尤?500 μL提取液B（50%甲醇含0.1%甲酸）復(fù)溶；渦旋30 s后冰水浴超聲15 min，12000 r/min離心15 min；取上清于2 mL進(jìn)樣瓶上機(jī)檢測(cè)。

色譜條件：色譜柱：ACQUITY ULC BEH C18色譜柱（1.7 μm×21 mm×150 mm）；柱溫箱溫度設(shè)為40 ℃，自動(dòng)進(jìn)樣器溫度設(shè)為8 ℃，進(jìn)樣體積為2 μL。液相色譜流動(dòng)相，A：0.1%甲酸水溶液；B：100%乙腈；總流速為300 μL/min；流動(dòng)相B梯度洗脫程序?yàn)椋?～0.50 min，0%～10%；0.51～15.00 min，10%～60%；15.01～18.00 min，60%～98%；18.01～20.00 min，98%～10%。

質(zhì)譜參數(shù)：數(shù)據(jù)采集時(shí)，以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式進(jìn)行質(zhì)譜分析。離子源參數(shù)如下：離子噴霧電壓，+5000/-4500 V；氣簾氣壓力，35 Psi；溫度，500 ℃；離子源氣體壓力1，55 Psi；離子源氣體壓力2，60 Psi。

1.2.3 抗氧化能力的測(cè)定

1.2.3.1 DPPH清除率測(cè)定 參照文獻(xiàn)[25]，在暗處反應(yīng)20 min后用酶標(biāo)儀在波長(zhǎng)492 nm處測(cè)吸光值。以甲醇作為空白對(duì)照，以VC溶液作為陽性對(duì)照，按照以下公式計(jì)算清除率：

式中：A樣品為樣品與DPPH 反應(yīng)后的吸光值，A對(duì)照為樣品本身的吸光值，A空白為DPPH本身的吸光值。

1.2.3.2 ABTS+自由基清除率測(cè)定 參照文獻(xiàn)[25]，取10 μL不同濃度的樣品與200 μL 0.1 mmol/L的ABTS自由基工作液添加到96微孔板中，用酶標(biāo)儀測(cè)在734 nm處測(cè)吸光值。以甲醇作為空白對(duì)照，VC溶液作為陽性對(duì)照，按照以下公式計(jì)算清除率：

式中：A樣品為樣品與ABTS反應(yīng)后的吸光值，A對(duì)照為樣品本身的吸光值，A空白為ABTS本身的吸光值。

1.2.3.3 還原力測(cè)定 參照文獻(xiàn)[26]，取1 mL樣品，先后向其中加入2.5 mL pH6.6的磷酸鹽緩沖液，2.5 mL 1%鐵氰化鉀溶液，混勻，于50 ℃水浴20 min，加入2.5 mL 10%三氯乙酸以及0.5 mL 0.1%三氯化鐵，混勻，靜置10 min，于700 nm測(cè)吸光值，以超純水為空白調(diào)零，VC溶液為陽性對(duì)照，吸光值越高，表明抗氧化效果越好。

1.2.4α-葡萄糖苷酶活力抑制試驗(yàn) 參照文獻(xiàn)[27]，取0.4 mL濃度為0.04 U/mL的α-葡萄糖苷酶溶液（由0.1 mol/L的pH6.8磷酸鹽緩沖溶液稀釋配制而成）和不同濃度的樣品于試管中，37 ℃水浴5 min，然后加入0.2 mL物質(zhì)的量濃度為0.5 mmol/L的pNPG溶液，混勻，37 ℃水浴反應(yīng)30 min后加入0.5 mL物質(zhì)的量濃度為0.2 mol/L的Na2CO3溶液終止反應(yīng)。室溫靜置5 min后，于波長(zhǎng)405 nm處測(cè)吸光值。如表1所示，以適當(dāng)濃度的阿卡波糖溶液作為陽性對(duì)照，以磷酸鹽緩沖溶液作為空白調(diào)零。每組作3次平行重復(fù)，取平均值，按照以下公式計(jì)算清除率：

表1 α-葡萄糖苷酶活力抑制試驗(yàn)反應(yīng)體系Table 1 Experimental reaction system of α-glucoside enzyme vitality inhibition experimental reaction system

式中：A0、A1、A2、A3分別表示空白對(duì)照管、樣品管、樣品對(duì)照管、對(duì)照管的吸光值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均為3次平行試驗(yàn)，測(cè)試結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差來表示。用Excel 2019 軟件和SPSS 26.0軟件處理數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 生物活性物質(zhì)含量分析

2.1.1 生物活性物質(zhì)總含量 由表2可知，PSE的總多酚含量為（127.29±5.16） mg/g，總黃酮含量較高，為（421.84±13.82） mg/g，而且含有一定的原花青素，其含量為（87.83±6.60） mg/g。

表2 檳榔廢棄籽中總多酚、總黃酮和原花青素的含量Table 2 Total polyphenols, total flavonoids and progesterone content in processed betel nut seeds

由于提取方法的不同，所得樣品中的檳榔生物活性成分的含量也有所不同。張丹等[28]以海南9月份的新鮮檳榔果為試驗(yàn)材料，用70%的乙醇提取后又分別萃取了其乙酸乙酯部位和正丁醇部位，檳榔提取物乙酸乙酯部位總多酚含量（7.47±0.047） mg/g和總黃酮含量（121.25±1.25） mg/g均大于正丁醇部位的總多酚含量（4.91±0.034） mg/g和總黃酮含量（34.07±0.88） mg/g，均小于本試驗(yàn)PSE的總多酚含量（127.29±5.16） mg/g和總黃酮含量（421.84±13.82）mg/g。而唐敏敏等[29]通過對(duì)成熟檳榔果的檳榔籽研究得出，總多酚和原花青素的含量從大到小依次為：正丁醇部位＞乙酸乙酯部位＞乙醇提取物＞水相＞石油醚部位，總黃酮含量從大到小依次為：乙酸乙酯部位＞水相＞正丁醇部位＞乙醇提取物＞石油醚部位。

另外，不同的加工方法對(duì)活性物質(zhì)的影響也有所不同。袁源等[25]對(duì)經(jīng)過不同炙法加工方式的檳榔果皮進(jìn)行了研究，結(jié)果表明：經(jīng)過不同炙法加工后總黃酮的含量、總酚和鞣質(zhì)的含量均高于空白組（獲得新鮮果皮后不進(jìn)行任何加工，只低溫烘干而來），其中空白組總黃酮含量為（3.76±0.62） mg/g，總酚含量為（3.91±0.78） mg/g。總黃酮含量以姜炙法得到的樣品最高，其含量為（6.96±0.36） mg/g，酒炙法次之，其含量為（5.50±0.47） mg/g，干炙法和甘草炙法稍好，其含量分別為（4.29±0.81）和（4.12±0.93） mg/g。總酚含量也以姜炙法得到的樣品最高，其含量為（8.54±0.69） mg/g，其他加工方法所得提取物的總酚含量從高到低依次是酒炙法，其含量為（7.53±0.41） mg/g，干炙法，其含量為（5.18±0.32） mg/g，甘草炙法，其含量為（4.77±0.62） mg/g。鞣質(zhì)含量的趨勢(shì)與總黃酮和總酚一致。

2.1.2 黃酮類化合物組分相對(duì)含量測(cè)定 黃酮類化合物（flavonoids）又名類黃酮，泛指2個(gè)芳香環(huán)（A環(huán)和B環(huán)）通過中央3個(gè)碳原子聯(lián)接而成的一系列化合物，基本骨架為C6-C3-C6。黃酮類化合物分為二氫黃酮（2H-flavanones）、黃酮（flavones）、異黃酮（isoflavones）、黃酮醇（flavonols）、黃烷醇（flavanols）和花色素六大類（anthoyanidins）[30-31]。對(duì)多種細(xì)菌、真菌、病原體等致病微生物有抑制作用[32]，同時(shí)具有擴(kuò)張血管、降糖降脂、美白等功效，有較高的實(shí)用開發(fā)價(jià)值[33]。由表2可知，總黃酮的含量最高，為明確PSE中各黃酮類化合物組分的相對(duì)含量，本實(shí)驗(yàn)篩選了86種黃酮類化合物作為標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)PSE中的黃酮類化合物組分進(jìn)行靶向定性鑒定。結(jié)果表明，從PSE中共鑒定出44種黃酮類化合物，表3列出了20種相對(duì)含量大于0.10%的黃酮類化合物，其中兒茶素的含量最高，為77.27%，其次為表兒茶素（8.53%）、原花青素 B1（4.66%）、原花青素 B2（3.45%）等。原花青素又稱縮合單寧，其基本組成單元被稱為單倍體，一般指兒茶素和表兒茶素[34]，已有研究表明這些物質(zhì)具有多種藥理活性，是天然的自由基清除劑和抗氧化劑，具有抗衰老、抗輻射、抗腫瘤、抗癌變，預(yù)防心腦血管疾病，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化等功能[35-36]。

表3 PSE中的類黃酮組分相對(duì)含量Table 3 Relative contents of flavonoids in PSE

2.2 抗氧化能力

2.2.1 對(duì)DPPH自由基的清除作用 由圖1可以看出，在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，PSE對(duì)DPPH自由基的清除能力與濃度呈正相關(guān)，即隨著濃度的增加而增強(qiáng)。從總體上看，在任何一個(gè)相同濃度下，陽性對(duì)照VC的清除能力均強(qiáng)于PSE。當(dāng)濃度范圍是0～1000 μg/mL時(shí)，PSE的DPPH自由基清除率隨濃度急劇增大，隨后再增加濃度，清除自由基的能力基本不變。當(dāng)濃度范圍是10～200 μg/mL時(shí)，PSE和VC清除DPPH自由基的能力相差越來越大，然后隨著濃度的增加，兩者清除效率的差距逐漸變小，最終趨于不變。PSE的DPPH自由基清除能力（IC50值為（310.10±0.62）μg/mL）弱于陽性對(duì)照組VC（IC50值為（177.53±0.89）μg/mL），約是VC的二分之一，且具有顯著性差異（P＜0.05）。

圖 1 PSE和VC對(duì)DPPH自由基的清除能力Fig.1 Ability to scavenge DPPH radicals of PSE and VC

Lin等[37]評(píng)價(jià)了產(chǎn)于海南檳榔果的種子清除DPPH自由基能力，結(jié)果顯示，當(dāng)提取物濃度為200 μg/mL時(shí)，對(duì)DPPH自由基的清除率為60.37%。而本試驗(yàn)的PSE濃度為200 μg/mL時(shí)，對(duì)DPPH自由基的清除率為28.34%。由此可以看出，檳榔廢棄籽雖然清除DPPH自由基能力相對(duì)較弱，但是仍然擁有一定的清除能力。張丹等[28]研究結(jié)果表明，新鮮檳榔籽乙酸乙酯部位和正丁醇部位均有一定的DPPH自由基清除能力，IC50值分別為14.60和44.32 μg/mL，均強(qiáng)于本試驗(yàn)PSE的DPPH自由基清除能力（IC50值為310.10 μg/mL）。

由以上結(jié)果可以看出，不同的提取方法和不同的萃取部位均會(huì)對(duì)檳榔的清除DPPH自由基的能力產(chǎn)生不同程度的影響。新鮮檳榔在被加工成食用檳榔的過程中需要經(jīng)過多個(gè)加工環(huán)節(jié)，而殺青、發(fā)籽等工藝的高溫和浸泡的工藝條件對(duì)檳榔籽中的抗氧化成分造成了流失或分解，從而使PSE的抗氧化作用相對(duì)減弱。

2.2.2 對(duì)ABTS+自由基的清除作用 由圖2可以看出，在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，PSE對(duì)ABTS+自由基的清除能力與濃度呈正相關(guān)，即隨著濃度的增加而增強(qiáng)。從總體上看，在任何一個(gè)相同濃度下，陽性對(duì)照VC的清除能力均強(qiáng)于PSE。當(dāng)濃度范圍是0～200 μg/mL時(shí)，PSE對(duì)ABTS+自由基清除率均隨濃度的增大而急劇增大，隨后再增加濃度，清除率幾乎不變，當(dāng)濃度是600 μg/mL時(shí)，PSE對(duì)ABTS+自由基的清除能力幾乎達(dá)到100%。PSE的ABTS+自由基清除能力（IC50值為（150.10±11.57） μg/mL）弱于陽性對(duì)照組VC（IC50值為（64.12±2.55） μg/mL），約是VC的二分之一，且具有顯著性差異（P＜0.05）。

圖 2 PSE和VC對(duì)ABTS+自由基的清除能力Fig.2 Ability to scavenge ABTS+ radicals of PSE and VC

Lin等[37]對(duì)產(chǎn)于海南檳榔果的種子清除ABTS+自由基能力進(jìn)行了研究，當(dāng)濃度為100 μg/mL時(shí)，PSE對(duì)ABTS+自由基的清除率為42.20%。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)提取物濃度為100 μg/mL時(shí)，對(duì)ABTS+自由基的清除率為45.27%，與本實(shí)驗(yàn)PSE對(duì)ABTS+自由基的清除能力差異不大。由此可見，加工后的檳榔籽與鮮果的檳榔籽相比，對(duì)ABTS+自由基的清除能力幾乎沒有減弱。而且，加工后的檳榔籽對(duì)ABTS+自由基的清除能力（IC50值為（150.10±11.57） μg/mL）相比于對(duì)DPPH自由基的清除能力（IC50值為310.10 μg/mL）較強(qiáng)。

2.2.3 還原Fe3+的能力 還原能力與抗氧化活性有一定的相關(guān)性，因此還原能力的測(cè)定常用于評(píng)價(jià)抗氧劑活性，而且這種方法的測(cè)定結(jié)果反映的不是針對(duì)某一種自由基的清除效果，而是被測(cè)物的總抗氧化能力，已經(jīng)被應(yīng)用于測(cè)定多種抗氧化物質(zhì)[38]。抗氧化劑將鐵氰化鉀中的三價(jià)鐵還原為二價(jià)鐵離子，二價(jià)鐵離子進(jìn)一步生成普魯士蘭，其在700 nm處有最大吸收波長(zhǎng)。因此在700 nm下的吸光值越高，表明該抗氧化劑的還原力越高，抗氧化性越強(qiáng)。由圖3可以看出，在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，PSE的還原能力總體低于VC，但是兩者相差不大，尤其是200～2200 μg/mL的濃度范圍內(nèi)。由圖3可以看出，在10～200 μg/mL濃度范圍內(nèi)，隨濃度的增加，兩者的還原能力相差較大，VC的還原能力明顯強(qiáng)于PSE，但是當(dāng)濃度超過200 μg/mL時(shí)，在濃度相同的條件下，兩者的還原能力差距變小，且隨后差距基本維持不變。這個(gè)結(jié)果與DPPH以及ABTS自由基的清除能力測(cè)定結(jié)果相同，進(jìn)一步說明了測(cè)定結(jié)果的可靠性。

圖 3 PSE和VC的還原能力Fig.3 Reducing power of PSE and VC

2.3 對(duì)α-葡萄糖苷酶活力的抑制作用

由圖4可知，PSE和陽性對(duì)照阿卡波糖對(duì)α-葡萄糖苷酶的活性均有抑制作用，PSE的抑制能力（IC50值為（90.10±1.89） μg/mL），強(qiáng)于陽性對(duì)照阿卡波糖（IC50值為（453.60±4.02） μg/mL）兩者的降血糖能力具有顯著差異（P＜0.05）。另外，在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，PSE和陽性對(duì)照阿卡波糖對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用隨著濃度的增大而增大。

圖 4 PSE和阿卡波糖對(duì)α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用Fig.4 Inhibition of PSE and acarbose on α-glucosidase activity

宋菲等[39]對(duì)新鮮檳榔的種子進(jìn)行了酶活力抑制試驗(yàn)，結(jié)果表明，檳榔籽提取物和陽性對(duì)照阿卡波糖的IC50值分別為（1.50±0.31）和（710±0.09） μg/mL。由此可見，雖然相對(duì)于未加工的新鮮檳榔籽來說，加工后的檳榔籽對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用有所減弱，但是仍然具有一定的抑制作用，有開發(fā)成為降血糖藥物的潛能。

3 討論

檳榔原果的主要成分為31.1%的酚類，18.7%的多糖，14.0%的脂肪，10.8%的粗纖維，9.9%的水分，3.0%的灰分和0.5%的生物堿[40]，檳榔中的多酚類物質(zhì)主要是黃酮醇，包括10%的兒茶素，2.5%的表兒茶素和12%的無色花青素，其余的是不同聚合度的黃酮類化合物。檳榔經(jīng)過加工其組分會(huì)發(fā)生不同程度的變化[41]。本次試驗(yàn)研究結(jié)果表明，食用檳榔加工廢棄籽富含總多酚、總黃酮、原花青素等多種活性物質(zhì)，其含量受提取材料、提取方法以及加工方式的影響，含有大量的黃酮類化合物，其中兒茶素的相對(duì)含量高達(dá)77.27%。經(jīng)過初步檢測(cè)，PSE中各生物堿的含量為檳榔堿：（13.75±0.04） mg/g；檳榔次堿：（3.82±0.82） mg/g；去甲基檳榔堿：（4.82±0.07） mg/g；去甲基檳榔次堿：（3.98±0.10） mg/g。而檳榔生物堿是否對(duì)廢籽提取物的生物活性產(chǎn)生影響，是正面的還是負(fù)面的，需要體內(nèi)試驗(yàn)進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)測(cè)定出檳榔廢棄籽具有一定的抗氧化能力，能夠?qū)PPH自由基和ABTS+自由基在一定程度上進(jìn)行清除，對(duì)Fe3+具有一定的還原能力，而且還表明檳榔廢棄籽具有較強(qiáng)的α-葡萄糖苷酶抑制能力，其對(duì)α-葡萄糖苷酶活力抑制的IC50值為（90.10±1.89） μg/mL，顯著（P＜0.05）強(qiáng)于陽性對(duì)照阿卡波糖，檳榔廢棄籽具有被開發(fā)為治療糖尿病藥物的潛力。綜上所述，對(duì)食用檳榔廢棄籽進(jìn)行回收，進(jìn)而再加工利用是十分必要的，且對(duì)環(huán)境保護(hù)有重要意義。然而對(duì)于檳榔廢棄籽的抗氧化和降血糖的具體機(jī)制還需要進(jìn)一步探索。