降鈣素原和前清蛋白及T 淋巴細(xì)胞亞群在肺結(jié)核患者中的表達(dá)及臨床意義

管鶴，葛瑋，張紅陶，蔣沂晨

江蘇省溧陽市人民醫(yī)院感染科 （江蘇溧陽 213300）

肺結(jié)核是指因感染結(jié)核分枝桿菌引起的慢性呼吸系統(tǒng)傳染疾病，肺結(jié)核患者早期無特異性癥狀，難以察覺，隨著病情進(jìn)展可能出現(xiàn)低熱、咳嗽、乏力、咯血等癥狀，甚至累及全身多個(gè)器官?；顒?dòng)性肺結(jié)核可通過患者帶菌痰液傳播且傳染性較強(qiáng)，已成為危害人類健康的主要傳染病[1-2]。因此，早診斷、早治療對(duì)于改善肺結(jié)核患者預(yù)后，提高患者生存率具有重要意義。有研究報(bào)道，隨著病情進(jìn)展，肺結(jié)核患者的免疫功能會(huì)逐漸降低，而T淋巴細(xì)胞亞群水平可反映患者免疫功能[3]。降鈣素原（procalcitonin，PCT）、前清蛋白（prealbumin，PA）常作為臨床判斷細(xì)菌感染的重要指標(biāo)，但有關(guān)其水平高低與肺結(jié)核患者病情嚴(yán)重程度和轉(zhuǎn)歸關(guān)系的研究較少[4-5]?；诖?，本研究以我院收治的患者作為研究對(duì)象，分析不同情況肺結(jié)核患者的PCT、PA 及T 淋巴細(xì)胞亞群[CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+]水平及臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月至2021年1月于我院就診的70例肺結(jié)核患者作為試驗(yàn)組，另選取同期于醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的70名志愿者作為對(duì)照組。試驗(yàn)組男42例，女28例；年齡25～72歲，平均（48.82±6.39）歲；輕癥39例，重癥31例；經(jīng)影像學(xué)檢查肺部病灶無空洞37例，有空洞33例；經(jīng)治療后存活68例，死亡2例（截至本研究結(jié)束）。對(duì)照組男40名，女30名；年齡25～72歲，平均（49.01±6.42）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：試驗(yàn)組均符合《肺結(jié)核診斷和治療指南》中有關(guān)肺結(jié)核的診斷標(biāo)準(zhǔn)；試驗(yàn)組均經(jīng)結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)確診為肺結(jié)核；試驗(yàn)組均有發(fā)熱、咳嗽、盜汗、乏力等臨床表現(xiàn)；試驗(yàn)組及其家屬均知情并自愿參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他真菌或細(xì)菌感染；合并自身免疫疾??；合并精神系統(tǒng)疾病難以配合本研究；長期使用免疫抑制劑。

1.2 方法

1.2.1 治療方法

試驗(yàn)組采用HRZE聯(lián)合莫西沙星治療：口服0.3 g異煙肼片（H）（福元藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H34020387，規(guī)格：0.1 g），1次/d；0.45 g利福平片（R）（吉林省長恒藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H22025072，規(guī)格：0.15 g），1次/d；1.5 g吡嗪酰胺片（Z）（廣東香雪藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H44022369，規(guī)格：0.25 g），3次/d；0.75 g鹽酸乙胺丁醇膠囊（E）（沈陽紅旗制藥有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H21021909，規(guī)格：0.25 g），1次/d；0.4 g鹽酸莫西沙星片（M）（廣東東陽光藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H20183246，規(guī)格：0.4 g），1次/d；連續(xù)治療3個(gè)月。

1.2.2 檢查方法

醫(yī)護(hù)人員分別于治療前及治療1、3個(gè)月后，采集兩組清晨空腹靜脈血4 ml，以3 000 r/min 離心15 min 后取上清液，保存在-80 ℃環(huán)境中待檢，采用全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（上海名元實(shí)業(yè)有限公司，型號(hào)：BKI2200）應(yīng)用免疫熒光法按照試劑盒（上海研生實(shí)業(yè)有限公司）說明書定量檢測PCT 水平，若PCT 水平＞0.05 μg/L 表明結(jié)果呈陽性，采用全自動(dòng)生化儀（上海寰熙醫(yī)療器械有限公司，型號(hào)：AU680）及配套的試劑，應(yīng)用免疫比濁法[試劑盒購置于羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司]定量檢測PA 水平，若PA 水平＜160 mg/L表明結(jié)果為陽性，在肝素抗凝試管中采集兩組清晨空腹靜脈血2 ml，采用流式細(xì)胞儀（北京北嘉美儀生物科技有限公司，型號(hào)：CytoFLEX S）檢測兩組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）于治療3個(gè)月后比較兩組PCT、PA 及T淋巴細(xì)胞亞群[CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+]水平。（2）于治療前、后比較輕、重癥肺結(jié)核患者PCT、PA 水平。（3）于治療3個(gè)月后比較不同轉(zhuǎn)歸肺結(jié)核患者PCT、PA 水平。（4）于治療前、后比較病灶有、無空洞肺結(jié)核患者T 淋巴細(xì)胞亞群[CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+]水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組PCT、PA 及T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較

治療3個(gè)月后，對(duì)照組PCT、CD8+水平均低于試驗(yàn)組，PA、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均高于試驗(yàn)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組PCT、PA 及T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

表1 兩組PCT、PA 及T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

注：PCT 為降鈣素原，PA 為前清蛋白，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+為T 淋巴細(xì)胞亞群

組別例數(shù) PCT（μg/L） PA（mg/L）CD3+（%）對(duì)照組700.04±0.10 214.46±20.75 0.82±0.10試驗(yàn)組700.32±0.19 147.78±14.92 0.49±0.11 t 10.09921.82918.572 P 0.000 0.000 0.000組別例數(shù) CD4+（%）CD8+（%）CD4+/CD8+對(duì)照組700.47±0.090.31±0.070.22±0.10試驗(yàn)組700.31±0.080.38±0.090.14±0.08 t 11.1175.1375.227 P 0.0000.0000.000

2.2 輕、重癥肺結(jié)核患者PCT、PA 水平比較

治療前，輕癥肺結(jié)核患者的PCT 水平低于重癥肺結(jié)核患者，PA 水平高于重癥肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療1、3個(gè)月后，輕、重癥肺結(jié)核患者的PCT 均低于治療前，且輕癥肺結(jié)核患者低于重癥肺結(jié)核患者，輕、重癥肺結(jié)核患者的PA 水平均高于治療前，且輕癥肺結(jié)核患者高于重癥肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 輕、重癥肺結(jié)核患者PCT、PA 水平比較（±s）

表2 輕、重癥肺結(jié)核患者PCT、PA 水平比較（±s）

注：PCT 為降鈣素原，PA 為前清蛋白

組別例數(shù)PCT（μg/L）治療前 治療1 個(gè)月后治療3 個(gè)月后輕癥肺結(jié)核患者 39 0.26±0.12 0.16±0.090.11±0.06重癥肺結(jié)核患者 31 0.42±0.20 0.27±0.140.18±0.09 t 3.9283.7963.722 P 0.0000.0000.001組別例數(shù)PA（mg/L）治療前 治療1 個(gè)月后治療3 個(gè)月后輕癥肺結(jié)核患者 39 156.27±15.29 173.35±16.33 189.29±18.36重癥肺結(jié)核患者 31 142.69±10.73 157.84±12.50 170.94±17.11 t 4.3584.5004.315 P 0.0000.0000.000

2.3 不同轉(zhuǎn)歸肺結(jié)核患者PCT、PA 水平比較

治療3個(gè)月后，存活肺結(jié)核患者的PCT 水平低于死亡肺結(jié)核患者，PA 水平高于死亡肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 不同轉(zhuǎn)歸肺結(jié)核患者PCT、PA 水平比較（±s）

表3 不同轉(zhuǎn)歸肺結(jié)核患者PCT、PA 水平比較（±s）

注：PCT 為降鈣素原，PA 為前清蛋白

組別例數(shù)PCT（μg/L）PA（mg/L）存活肺結(jié)核患者 680.16±0.13185.92±23.37死亡肺結(jié)核患者 20.35±0.20129.30±22.80 t 3.7659.022 P 0.0010.000

2.4 病灶有、無空洞肺結(jié)核患者T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較

治療前，病灶無空洞肺結(jié)核患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于病灶有空洞肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療3個(gè)月后，病灶有、無空洞肺結(jié)核患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于治療前，且病灶無空洞肺結(jié)核患者高于病灶有空洞肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療前、治療3個(gè)月后，病灶有、無空洞肺結(jié)核患者的CD8+水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表4。

表4 病灶有、無空洞肺結(jié)核患者T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

表4 病灶有、無空洞肺結(jié)核患者T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

注：CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+為T 淋巴細(xì)胞亞群

組別例數(shù)CD3+（%）CD4+（%）治療前 治療3 個(gè)月后治療前 治療3個(gè)月后有空洞肺結(jié)核患者 33 0.38±0.12 0.56±0.12 0.27±0.09 0.36±0.15無空洞肺結(jié)核患者 37 0.52±0.10 0.67±0.23 0.33±0.10 0.45±0.20 t 5.3212.4652.6262.110 P 0.0000.0180.0110.039組別例數(shù)CD8+（%）CD4+/CD8+治療前 治療3 個(gè)月后治療前 治療3個(gè)月后有空洞肺結(jié)核患者 33 0.40±0.12 0.35±0.09 0.12±0.05 0.14±0.07無空洞肺結(jié)核患者 37 0.37±0.09 0.33±0.08 0.17±0.06 0.20±0.08 t 1.1910.9843.7623.321 P 0.2380.3290.0000.002

3 討論

肺結(jié)核是臨床常見的呼吸道傳染疾病，具有進(jìn)展快、發(fā)病率高、死亡率高等特點(diǎn)，發(fā)病率和死亡率在傳染性疾病中均居第二位，嚴(yán)重威脅人類生命健康[6-7]。目前，臨床診斷肺結(jié)核多依據(jù)患者臨床癥狀、體征和胸部X 線片等方式進(jìn)行綜合診斷，但肺結(jié)核患者臨床表現(xiàn)和影像學(xué)檢查結(jié)果與其他肺部疾病表現(xiàn)相似，不具備特異性，易造成漏診、誤診，影響臨床治療效果[8-9]。結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)是臨床診斷肺結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn)，但肺臟排菌具有一定的不確定性，常需要多次進(jìn)行痰培養(yǎng)才可以明確診斷結(jié)果，需耗費(fèi)較長時(shí)間且陽性率較低，加上肺結(jié)核患者病情進(jìn)展迅速，痰培養(yǎng)難以及時(shí)排查，可能延誤治療時(shí)機(jī)[10-11]。因此，尋找準(zhǔn)確有效、可反映肺結(jié)核患者病情的指標(biāo)對(duì)于早期診斷和治療具有重要意義。

PCT 是由甲狀腺濾泡旁細(xì)胞合成的多肽分子，作為降鈣素的前體，其水平在正常情況下較低，當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌感染時(shí)，機(jī)體在多種炎癥細(xì)胞刺激下可合成大量PCT[12]。因此，臨床常將PCT 作為感染性疾病的早期診斷指標(biāo)。PA 是由肝臟合成的載體蛋白，可反映肝臟代謝蛋白質(zhì)情況和肝臟合成功能，是判斷肝損傷的有效指標(biāo)[13]。由于肺結(jié)核是由于細(xì)菌入侵機(jī)體引起的疾病，因此其發(fā)生、發(fā)展與患者免疫功能具有重要聯(lián)系，T 淋巴細(xì)胞亞群可作為反映患者免疫功能的指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，對(duì)照組PCT、CD8+水平均低于試驗(yàn)組，PA、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均高于試驗(yàn)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；表明肺結(jié)核患者的PCT 水平呈異常高表達(dá)，PA 水平呈異常低表達(dá)，且免疫功能下降，與既往研究結(jié)果[14]基本一致。本研究結(jié)果還顯示，治療前，輕癥肺結(jié)核患者的PCT 水平低于重癥肺結(jié)核患者，PA 水平高于重癥肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療1、3個(gè)月后，輕、重癥肺結(jié)核患者的PCT 均低于治療前，且輕癥肺結(jié)核患者低于重癥肺結(jié)核患者，輕、重癥肺結(jié)核患者的PA 水平均高于治療前，且輕癥肺結(jié)核患者高于重癥肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；表明PCT 和PA 水平可反映肺結(jié)核患者病情嚴(yán)重程度，且在治療后其水平會(huì)明顯變化?？赡苁且?yàn)橹匕Y肺結(jié)核患者受到嚴(yán)重感染，在多種促炎因子作用下機(jī)體可能產(chǎn)生過度炎性反應(yīng)，導(dǎo)致PCT 水平升高；PA 作為人體非特異性防御物質(zhì)，機(jī)體在感染細(xì)菌后會(huì)快速合成PA 以消除毒代謝物質(zhì)，在外周血中其濃度會(huì)明顯下降，因此在重癥肺結(jié)核患者中PA 處于較低水平。進(jìn)一步研究結(jié)果顯示，存活肺結(jié)核患者的PCT 水平低于死亡肺結(jié)核患者，PA 水平高于死亡肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；表明PCT 和PA 水平可作為評(píng)價(jià)患者預(yù)后的重要指標(biāo)。T 淋巴細(xì)胞可通過亞群細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，本研究結(jié)果顯示，治療前，病灶無空洞肺結(jié)核患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于病灶有空洞肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療3個(gè)月后，病灶有、無空洞肺結(jié)核患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于治療前，且病灶無空洞肺結(jié)核患者高于病灶有空洞肺結(jié)核患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療前、治療3個(gè)月后，病灶有、無空洞肺結(jié)核患者的CD8+水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；表明肺結(jié)核患者免疫功能與其病情進(jìn)展關(guān)系密切。但機(jī)體感染對(duì)T 淋巴細(xì)胞亞群的作用還需作進(jìn)一步研究。

綜上所述，肺結(jié)核患者的PCT、PA 及T 淋巴細(xì)胞亞群呈異常表達(dá)，其水平高低可反映患者病情嚴(yán)重程度和免疫功能，可作為臨床病情評(píng)估、療效判斷和預(yù)后的重要指標(biāo)。