電針對慢性阻塞性肺疾病大鼠肺組織形態(tài)學及肺功能的影響

許金森 黃培煒 林靜瑜 鄭淑霞 朱小香 薩喆燕

[摘要]目的探究電針尺澤穴對慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠的肺組織形態(tài)學、肺功能的影響。方法將24只 SD 大鼠隨機分為正常對照組和模型組，正常對照組8只，模型組16只。適應性飼養(yǎng)1周后，開始對模型組進行造模，采用煙熏+脂多糖（LPS）氣道滴注，共11周。模型復制成功后，將模型組分為模型對照組和尺澤干預組各8只。電針干預尺澤穴30 min，強度1mA，1次/d，連續(xù)干預4周。模型對照組每日同等造模，同時固定抓取，不干預。觀察三組大鼠的肺組織形態(tài)學、肺功能的變化。結果與正常對照組比較，模型對照組大鼠肺每分通氣量下降，差異有統(tǒng)計學意義（ P <0.01），肺彈性阻力下降，差異有統(tǒng)計學意義（ P <0.01）;電針尺澤穴干預后，肺每分通氣量、肺彈性阻力明顯提高，差異有統(tǒng)計學意義（ P <0.01）;與正常對照組比較，模型對照組肺組織外觀、氣管呈肺氣腫改變及炎性細胞浸潤，尺澤干預組的肺、氣管組織外觀、病理形態(tài)明顯改善。結論電針刺激尺澤穴能夠改善 COPD 大鼠肺組織形態(tài)學和肺功能。

[關鍵詞]慢性阻塞性肺疾病;尺澤穴;電針;肺功能;肺組織形態(tài)學

[中圖分類號] R245.97? [文獻標識碼] A?? [文章編號]2095-0616（2022）09-0019-05

Effects of electroacupuncture on the morphology of lung tissues and lung function in rats with chronic obstructive pulmonary disease

XU? Jinsen ??HUANG? Peiwei（2）?? LIN 3Jingyu??? ZHENG? Shuxia（1）?? ZHU 1Xiaoxiang??? SA 1Zheyan

1. Fujian Academy of Chinese Medical Sciences， Fujian Key Laboratory of Propagated Sensation Along Meridian， Fujian， Fuzhou 350003， China;2. Fuzhou Dermatosis Prevention Hospital， Fujian， Fuzhou 350025， China;3. Institute of Materia Medica， Fujian Academy of Chinese Medical Sciences， Fujian， Fuzhou 350003， China

[Abstract] Objective To investigate the effects of electroacupuncture at Chize （LU5） on the morphology of lung tissues and lung function in a rat model of chronic obstructive pulmonary disease （COPD）. Methods A total of 24 Sprague-Dawley rats were randomly divided into the normal control group （n=8） and the model group （n=16）. With one-week adaptive feeding， rats in the model group were started to be modeled through the airway instillation of sootiness and lipopolysaccharide for a total of 11 weeks. After the successful model establishment， the rats in the model group were further divided into the model control group and the Chize intervention group， with 8 cases in each group. The electroacupuncture at Chize （LU5） was lasted for 30 minutes， with an intensity of 1 mA once a day for continuous 4 weeks. Rats in the model control group received the same modeling and grasping approach every day without intervention. Changes in the morphology of lung tissues and lung function of rats were observed in three groups. Results Compared with the normal control group， the ventilatory capacity of the lung per minute was decreased in the model control group， with statistically significant differences （P <0.01）. The elastic recoil resistance of lung decreased， with statistically significant differences （P <0.01）. After electroacupuncture intervention at Chize （LU5）， the ventilatory capacity of the lung per minute and elastic recoil resistance of the lung significantly increased， with statistically significant differences （P <0.01）. In comparison to the normal control group， lung tissues in the model control group showed emphysema changes and inflammatory cell infiltration， and the appearance of lung and tracheal tissues， and pathology in the Chize intervention group were significantly improved. Conclusion Electroacupuncture at Chize （LU5） can improve the morphology of lung tissues and lung function in COPD rats.

[Key words] Chronic obstructive pulmonary disease; Electroacupuncture; Chize; Morphology of lung tissues; Lung function

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease， COPD）是一種危害人類健康的常見病、多發(fā)病，嚴重影響患者的生活質量，病死率較高。2018年中國成人肺部健康研究（C P H S ）曾對10個省市50991名人群調查顯示，20歲及以上成人的 COPD 患病率為8.6%，40歲以上則高達13.7%，首次明確我國 COPD 患者人數(shù)近1億， COPD 將位居世界疾病經(jīng)濟負擔的第5位[1]。目前西醫(yī)對該病主要采用對癥治療的策略，而針灸穴位是中醫(yī)治療 C O P D 較為有效的手段之一[2]，并以其“簡、便、廉、驗、效”而受到廣大患者的青睞。因此，在中醫(yī)尤其是針灸方面探討對本病的治療措施和方案，則顯得尤為重要。本研究在前期基礎研究工作的基礎上，觀察電針尺澤穴對 C OP D 模型大鼠的肺組織形態(tài)學、肺功能的影響，以期為針灸治療該病提供實驗依據(jù)。

1材料與方法

1.1實驗動物

選用 SPF 級雄性 Sprague Dawley 大鼠，體重180～220 g，共24只;來自杭州醫(yī)學院[許可證號： SCXK（浙）2019-0002]。在實驗動物房適應7 d 后造模。按組分籠，在恒溫（20±2）℃和恒濕（50±5）%條件下飼養(yǎng)，自由飲食。實驗過程嚴格遵守科技部《關于善待實驗動物的指導性意見》中相關規(guī)定。

1.2主要儀器

多道生理信號采集處理系統(tǒng)（型號： RM 6240 B ，成都儀器廠）;自制的煙熏箱（80 cm×50 cm×100 cm）、氣管滴管以及大鼠柔軟固定器等。

1.3藥物及試劑

脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，中國生物檢驗檢定所）;白色七匹狼牌香煙（福建中煙工業(yè)有限責任公司，焦油量12 mg，煙堿0.9 mg，一氧化碳13 mg）;二甲苯（國藥集團化學試劑有限公司，批號：20150409）;甲醇（國藥集團化學試劑有限公司，批號：20200827）;生理鹽水（福州海王福藥制藥有限公司）。

1.4造模與干預

所有大鼠適應性飼養(yǎng)1周后，隨機分為正常對照組（8只）和模型組（16只），模型組采用煙熏聯(lián)合 LPS 氣管內(nèi)滴注的方式造模[3]。造模成功后，將模型組大鼠隨機分為模型對照組和尺澤干預組各8只。

1.5干預方式

尺澤干預組：取尺澤穴（大鼠前肢肘橫紋外側凹陷處，在肱二頭肌肌腱外側）[4]，穴位常規(guī)消毒，以0.25 mm×13 mm 華佗牌無菌毫針直刺該穴，連接 SDZ-Ⅱ電針儀，強度1 mA，以針體輕微抖動為度，疏密波，頻率2/10 Hz，30 min/次，1次/d，共干預4周（28 d）;正常對照組和模型對照組同等抓取固定在自制鼠套里。

1.6觀察指標

肺功能：主要觀察兩項內(nèi)容，即肺彈性阻力（cmH2O/ml），肺每分通氣量（ml）。肺組織形態(tài)學：主要觀察肺組織的色澤、質地，肺間質是否有炎癥細胞浸潤以及支氣管管壁是否增厚。

1.7統(tǒng)計學處理

本研究數(shù)據(jù)用 SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析處理，進行正態(tài)檢驗，符合正態(tài)分布計量資料以均數(shù)±標準差（ x ±s）形式表示，進行方差分析、 LSD 檢驗， P <0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1各組大鼠一般狀況比較

造模前各組大鼠毛色亮白、有光澤，體型、進食飲水正常，排泄物正常，各項指標及體重等比較，差異無統(tǒng)計學意義（ P >0.05），具有可比性。

2.2電針尺澤穴對COPD大鼠肺通氣功能的影響

與正常對照組比較，模型對照組大鼠肺彈性阻力下降，每分通氣量明顯下降，差異均有統(tǒng)計學意義（ P <0.01），提示模型大鼠肺通氣功能受損。與模型對照組比較，尺澤干預組肺彈性阻力上升，差異有統(tǒng)計學意義（ P <0.01），每分通氣量明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義（ P <0.01）;與正常對照組比較，尺澤干預組肺彈性阻力、每分通氣量無明顯變化，差異無統(tǒng)計學意義（ P >0.05）。見表1。

2.3電針尺澤穴對COPD大鼠肺臟外觀及肺組織形態(tài)學的影響

正常對照組大鼠肺色澤粉嫩，質地柔軟，模型對照組大鼠肺色澤略有蒼白，肺臟邊緣質地較僵硬有塑料感，呈現(xiàn)輕微纖維化傾向。見圖1。

正常對照組大鼠的肺組織肺泡大小均一，肺泡壁結構完整。與正常對照組比較，模型對照組大鼠肺組織內(nèi)出現(xiàn)輕度肺氣腫改變，肺間質炎癥細胞浸潤。見圖2。

從外觀上看，正常對照組大鼠肺色澤粉嫩，質地柔軟，模型對照組大鼠肺色澤蒼白，組織質地較僵硬有塑料感，呈現(xiàn)纖維化傾向;尺澤干預組大鼠肺色澤鮮紅，質地較模型組柔軟，少部分見纖維化傾向。見圖3。

正常對照組大鼠的肺組織肺泡大小均一，肺泡壁結構完整。與正常對照組比較，模型對照組大鼠肺泡結構紊亂肺泡高度擴張，肺泡間隔變窄甚至斷裂合成肺大皰（肺氣腫改變），肺間質炎癥細胞浸潤。模型對照組支氣管管壁增厚，杯狀細胞數(shù)目增多，腺體增生肥大。

與模型對照組比較，尺澤干預組肺泡擴張融合程度明顯改善，局部僅有輕度間質性炎癥、間質增生以及少量炎癥細胞浸潤;支氣管壁輕微增厚，少量杯狀細胞增生。見圖4。

3討論

COPD 是一種具有氣流受限特征的肺部疾病，這種氣流受限不完全可逆，且呈進行性發(fā)展，它的發(fā)生與肺部對有害氣體或有害顆粒的異常炎癥反應有關。隨著病情反復發(fā)作、急性加重，導致肺功能逐漸下降，出現(xiàn)日常活動甚至休息時也感到氣短[5-9]。由于 COPD 病因未完全闡明，臨床上主要以預防、綜合治療和治療措施個體化等對癥治療原則，目前仍缺乏有效的病因治療方法。

西醫(yī)多采用 COPD 全球策略（GOLD）分級治療方法[10]，但不能逆轉肺功能進行性降低，且?guī)磔^大的副作用。近年來，隨著人們對 COPD 認識的逐步加深，針灸在治療 COPD 方面取得了顯著的療效。手太陰肺經(jīng)，上膈屬肺，盡管肺經(jīng)上的每一個穴位都可以用以治療肺和肺系的病變，但不同的穴位還具有相對特異性[11]。尺澤為手太陰肺經(jīng)五俞穴之“合穴”，《素問至真要大論》言：“尺澤絕，死不治”，強調了尺澤穴的重要性;在《經(jīng)穴解》中指出：“穴名尺澤者，在肘而知尺……水之所聚為澤，故曰尺澤”，強調了尺澤為肺經(jīng)之“合穴”，有“合主逆氣而泄”的作用;而在《針灸甲乙經(jīng)》中則提出了尺澤可治胸肺部“氣逆”諸癥。可見，尺澤穴歷來都被醫(yī)家用之于主治與 COPD 臨床表現(xiàn)相關的“脹滿”“喘”“咳”這三種的典型癥狀。

肺功能是判斷 COPD 病情進展的一個非常重要的指標，目前國內(nèi)外學者認為 COPD 肺功能下降是一個漸進的過程，這也為針灸治療該病提供了一個很好的途徑。本研究的 COPD 模型大鼠肺功能下降表現(xiàn)為每分通氣量降低，肺彈性阻力下降，這與人類 COPD 的臨床表現(xiàn)的特點基本一致，也進一步證實了本研究的 COPD 模型是成功的。對模型大鼠進行4周的電針尺澤穴干預后，COPD 大鼠肺彈性阻力上升，每分通氣量也明顯上升;肺彈性阻力，每分通氣量的恢復程度與正常老鼠無差異。中醫(yī)經(jīng)絡學說認為，經(jīng)脈內(nèi)屬于腑臟，外絡于肢節(jié)，行氣血而通陰陽。既往的研究發(fā)現(xiàn)，電針刺激穴位不僅能夠引起經(jīng)脈線上相關的能量代謝發(fā)生改變，而且還可以調節(jié)其相應的臟腑功能[12-20]，經(jīng)絡在調控臟腑疾病過程中起到極其重要的作用。尺澤穴屬于手太陰肺經(jīng)，經(jīng)脈所過，主治所及，電針刺激尺澤穴能夠改善 COPD 大鼠肺功能也進一步說明了這一點。

從肺臟外觀圖片看，正常對照組大鼠肺色澤粉嫩，質地柔軟;模型對照組大鼠肺色澤蒼白，外表皺縮，組織質地較僵硬有塑料感，呈現(xiàn)纖維化，有些分布有黑色斑點。根據(jù)模型對照組肺部組織形態(tài)學的變化，進一步證實了本實驗采用煙熏+LPS 氣道滴注的造模方式是成功的。眾所周知，經(jīng)絡是以十二經(jīng)脈為主體，網(wǎng)絡遍布全身的一個復雜體系，是人體機能的聯(lián)絡、調節(jié)和反應系統(tǒng)，針灸刺激穴位通過經(jīng)絡的傳導途徑到達其相應的臟腑，從而達到治療疾病的作用[21-22]。本實驗電針尺澤穴可使 COPD 模型大鼠肺保持色澤鮮紅，質地較模型對照組柔軟，少部分見纖維化傾向，無黑點分布。盡管尚未完全達到正常對照組水平，但與模型對照組比較，尺澤干預組肺泡融合程度有所改善，局部間質僅少量炎癥細胞浸潤和少量杯狀細胞增生，支氣管壁略微增厚。實驗結果表明，電針尺澤穴能夠減低 COPD 大鼠的肺部組織炎癥細胞的浸潤，從而改善 COPD 大鼠肺組織形態(tài)學。

綜上所述，針灸對 COPD 仍然是一種綠色、有效的治療方法，它不僅能夠改善 COPD 大鼠的肺功能，而且還能進一步改善 COPD 大鼠肺組織形態(tài)學，從而達到有效治療 COPD 的作用，值得進一步推廣與運用。

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（收稿日期：2021-11-01）