3540 例女性泌尿生殖道標本支原體檢測及耐藥性分析

劉前，余玥

（西南醫科大學附屬中醫院檢驗科，四川 瀘州 646000）

0 引言

支原體是一群不具有細胞壁，能在無生命培養基中生長繁殖的最小的原核細胞型微生物[1]，并且具有高度多形性。與人類生殖道感染有關的是解脲脲原體（U.urealyticum）和人型支原體（M.hominis）。兩者均屬于機會致病微生物,并且廣泛定植于育齡期女性生殖道,可通過垂直傳播造成胎兒感染。解脲脲原體與人型支原體能引起男性急、慢性非淋病奈瑟菌尿道炎、前列腺炎、附睪炎，引起女性非淋病奈瑟菌尿道炎、陰道炎、盆腔炎及宮頸炎。還可引起不孕不育、早產、流產和新生兒感染[2-3]。近年來，解脲脲原體和人型支原體感染檢出率升高，對抗菌藥物耐藥率也不斷增加，已引起大家廣泛關注和重視。本研究對2021 年我院全年婦產科門診患者及住院患者生殖道標本，支原體雙相培養結果及抗菌藥物耐藥性進行回顧性分析，為臨床用藥提供實驗室依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標本來源

收集我院2021 年1 月至2021 年12 月婦產科門診患者及住院患者生殖道分泌物支原體雙相培養標本共3540 例。

1.1.2 試劑采用眾愛生河北生物有限公司生產的解脲支原體和人型支原體選擇分離固體培養試劑盒以及培養、鑒定、藥敏試劑盒。

1.2 方法

1.2.1 標本采集外陰消毒后，先用窺陰器暴露陰道，用無菌棉簽擦除宮頸外分泌物，再用無菌陰道拭子取宮頸口1-1.5cm 處分泌物，取樣后盡快送檢。

1.2.2 固體培養選擇分離固體培養基放在室溫下預溫5-10min，將標本接種在固體選擇培養基表面，并在每個組套內加一片CO2發生片，蓋上密封，置36℃±1℃培養箱中，24-48 小時觀察結果。

1.2.3 液體培養試劑盒復溫至室溫，從未接種樣本的培養基中取100μL培養基液加入藥敏板陰性孔。將采集的標本拭子插入培養基液體中，充分洗滌，在瓶壁上擠干拭子，各取100μL 已接種后的培養基液體加入到除陰性孔外各孔中。每孔加石蠟油1-2 滴，36℃±1℃培養24-48 小時觀察結果。

1.2.4 結果判讀固體培養：經培養后，在顯微鏡下可見棕褐色海膽樣菌落，為解脲脲原體。油煎蛋樣菌落，為人型支原體。液體培養：(+)孔為陽性，Uu 鑒定孔為陽性(培養24 小時，培養基由黃變紅，清亮無混濁)，表示Uu 計數(ccu ≥104)有臨床意義。(+)孔為陽性，Mh 鑒定孔為陽性(培養48 小時，培養基由黃變紅，清亮無混濁)，表示Mh 計數(ccu ≥104)有臨床意義。藥敏試驗：若高濃度孔陰性(-)，低濃度孔陰性(-)，表示對該藥物敏感(S)；若高濃度孔陰性(-)，低濃度孔陽性(+)，表示對該藥物中度敏感(I)；若高濃度孔陽性(+)，低濃度孔陽性(+)，表示對該藥耐藥。

1.2.5 數據分析

采用SPSS 20.0 軟件分析數據，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病原體分布及分離率

2021 年1 月2021 年12 月，我院婦產科門診及住院患者共送檢測3540 份支原體雙相培養，檢測出泌尿道支原體1495 例。陽性率為42.0%。其中檢測到解脲脲原體（Uu）1333 例，占89.5%（1333/1495），分離率為37.6%（1333/3540）。解脲脲原體和人型支原體混合感染115 例，占7.7%（115/1495），分離率為3.2%（115/3540）。人型支原體47 例，占3.1%（47/1495），分離率為1.3%（47/3540）。1495例支原體感染類型分布見表1。

表1 1495 例支原體感染類型分布(n,%)

2.2 支原體感染耐藥性分析

從支原體藥敏結果分析可以看出，單一解脲脲原體（Uu）感染, 對美滿霉素、強力霉素、克拉霉素敏感性高，分別為98.1%、97.2%、95.1%。對環丙沙星、壯觀霉素、諾氟沙星耐藥率高，分別為92.6%、90.5%、90.1%。單一人型支原體（Mh）感染，對強力霉素、美滿霉素、交沙霉素敏感性高，分別為97.9%、97.9%、87.2%。對諾氟沙星不敏感，耐藥率為100%，對環丙沙星、氧氟沙星耐藥率為95.7%，對羅紅霉素亦有很高耐藥率，為91.5%。兩種支原體（Uu+Mh）混合感染，對美滿霉素、強力霉素敏感率高，分別為98.3%、96.5%。同樣對諾氟沙星不敏感，耐藥率為100%，對其他喹諾酮類環丙沙星、氧氟沙星耐藥率分別為98.3%、97.4%。對壯觀霉素、羅紅霉素、克拉霉素耐藥率為92.2%、91.3%、90.4%。1495 例支原體感染對常見12 種抗生素敏感性試驗結果見表2。

表2 1495 例支原體感染藥物敏感性試驗[n(%)]

3 討論

解脲脲原體和人型支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，是引起人泌尿生殖系統感染重要病原菌之一。主要通過性接觸傳播和母嬰傳播，通常引起非淋病菌性尿道炎、男性前列腺炎或附睪炎以及女性陰道炎、盆腔炎、卵管炎、宮頸炎和腎盂腎炎等，亦可引起不孕不育、胎兒流產等[4]。解脲脲原體和人型支原體也是一類機會病原體，當免疫力正常時，可正常寄居于人體腔道的黏膜上和女性生殖道，而不引起任何癥狀[5]，人感染后可成無癥狀攜帶者或臨床癥狀不明顯。當機體免疫力低下或粘膜受損時可發展為致病菌[6]。所以支原體感染容易被忽略，造成病原菌的隱匿傳播。因此，對有癥狀者或癥狀不明顯患者應考慮生殖道支原體檢測，以防漏診。當部分患者支原體培養陽性，但并無明顯感染癥狀，可能為正常人群攜帶者[7]。因此，臨床醫生應根據患者臨床表現進行判斷，并合理運用抗生素干預，避免過度治療。近年來，支原體感染率逐年升高，加上抗生素不合理運用，治療不規范等因素,支原體耐藥情況日益嚴重,在臨床上受到越來越多的關注。

本研究通過回顧性分析我院2020 年1 月到2020年12 月全年婦產科門診及住院患者解脲脲原體和人型支原體檢測。3540 例標本，支原體檢出率為42.1%。其中解脲脲原體(Uu)在支原體中檢出率為89.5%，解脲脲原體和人型支原體混合感染在支原體中檢出率為7.4%，人型支原體在支原體中檢出率為3.1%。與宋秀軍[8]等人報道一致。解脲脲原體檢出率高于解脲脲原體和人型支原體混合感染，高于人型支原體。解脲脲原體檢出率較高,可能原因，是解脲脲原體能夠分解尿素而產氨，其降解產物可以提高陰道內環境的PH 值，促使自身和其他病原菌的生長[9]。同時，大部分患者感染后，癥狀不明顯或無癥狀。因此，解脲脲原體感染易反復，給治療帶來一定困難。

從數據分析可看出，單一解脲脲原體，對美滿霉素、強力霉素、克拉霉素敏感性高（＞97%）。人型支原體，對強力霉素、美滿霉素、交沙霉素敏感性高（＞97%）。解脲脲原體和人型支原體混合感染對美滿霉素、強力霉素敏感率高（＞96%）。由此可見，各類型支原體感染均對美滿霉素，強力霉素敏感率高。且各型之間差異均無統計學意義（P＞0.05）。所以強力霉素和美滿霉素可作為臨床支原體感染藥物經驗性治療首選藥物[10]。各類型支原體感染對喹諾酮類耐藥率均高（＞90%），并且人型支原體和混合感染者對諾氟沙星均不敏感，耐藥率為100%，臨床應避免使用喹諾酮類藥物[11]。支原體對喹諾酮類藥物耐藥的主要機制是ParC 氨基酸序列改變[12]。此外，大環內酯類藥物克拉霉素對解脲脲原體敏感性高，亦可選該藥物治療解脲脲原體引起的感染。

綜上所述，2021 年全年我院婦產科門診和住院患者生殖道支原體檢測，以單一解脲脲原體（Uu）感染為主，混合感染（Uu+Mh）次之，單一人型支原體（Mh）感染較少。從藥敏試驗結果分析可看出，各類型支原體均對四環類藥物美滿霉素、強力霉素敏感率高，可作為臨床經驗性用藥首選。喹諾酮類藥物敏感率低，臨床應避免使用該類藥物。為了避免耐藥菌的產生，臨床應根據支原體培養結果及藥敏試驗，并結合患者臨床癥狀，正確選擇抗生素，合理規范用藥，避免過度治療。