牛流行熱的診治及防控

文│牛金鵬（山東省諸城市畜牧業發展中心）

牛流行熱（BEF）又稱為“三日熱”，發病后表現為高燒，并在2～3天內消退。該病由牛流行熱病毒（BEFV）感染牛引發，癥狀與牛流行性感冒類似，表現為食欲減退甚至廢絕、口鼻分泌物增多、呼吸急促、跛行以及產奶量明顯下降等多種癥狀。該病感染牛群后多數病牛預后良好。但是，由于該病一旦發生會造成牛群較高的感染率，往往造成較大的經濟損失。因此，必須重視該病的診治及防控。

一、病原學特征

BEFV屬于暫時熱病毒屬、彈狀病毒科，病毒的基因結構為單股RNA，其直徑較大，接近200納米，基因組長度為14800個堿基左右。病毒粒子主要有兩種形態，包括錐形和子彈形，與狂犬病病毒、水皰性口炎病毒類似，外部包裹囊膜。該病毒有數個結構蛋白，包括聚合酶交聯蛋白、核蛋白、聚合酶相關蛋白、糖蛋白和基質蛋白，其中糖蛋白是抗體的結合蛋白。因此，通常以G蛋白作為基因工程疫苗的免疫原，G蛋白外表面有數個抗原位點，其中G1為特異性抗原位點。

由于存在囊膜結構，該病毒對脂溶劑敏感，包括氯仿、乙醚以及脫氧膽酸鈉等。BEFV對熱的耐受力差，處于56℃環境條件下10分鐘或在37℃環境條件下18小時該病毒即可喪失活性。該病毒對酸堿環境較為敏感，在酸性低于pH＝2或堿性高于pH＝9環境條件下，幾十分鐘內即可喪失活性。低溫條件下，該病毒可長期存活，并保持感染性。采集病牛血液，經抗凝集處理后，在2℃～4℃環境條件下保存一周其致病能力不降低。在4℃條件下，在小鼠腦組織液懸液中保存一個月后其致病能力仍不降低，且毒力不受凍融影響。該病毒于-20℃條件下可長期存活，并保持致病能力。

二、流行病學特征

BEF可發生于各個品種的牛，包括奶牛、黃牛、水牛以及牦牛。經流行病學調查發現，各類蹄類野生動物血液內廣泛存在可以中和BEFV的抗體，據此推斷，野生動物可能普遍帶毒。部分地區，牛群存在BEFV抗體檢測陽性的情況，推測可能存在隱形感染。該病主要是通過非接觸性傳播，傳播媒介主要為節肢動物，包括庫蠓以及蚊類等，因此該病在陰雨季節比較容易流行。該病存在周期性流行特點，流行周期為數年至十幾年，同時該病還具有明顯的季節性流行特點，好發于夏秋季節。該病發生時疫區與非疫區呈現間隔交叉存在的情形，不連接成片，疫情發生時表現為跳躍式傳播，該病的傳播不受一般地理屏障的阻隔。

三、致病機理、癥狀及病理變化

1.致病機理。牛機體抵抗力較弱時，BEFV侵入牛體內并增殖，引起牛發病。通過檢測牛體內病毒滴度發現，在牛發熱的第一天，BEFV即可達到較高的載量，BEFV在白細胞內濃度較高，遠高于在紅細胞內的濃度。據推測，這一現象是由于白細胞吞噬BEFV導致的，BEFV可以激發淋巴細胞釋放淋巴因子，進而引發炎癥。該病毒主要在內皮細胞內增殖，損傷組織的各類血管內皮細胞，包括動脈、靜脈、毛細血管。BEFV主要在肺、淋巴結以及脾內繁殖，并造成損傷，其中以肺損傷為主。BEFV可以使血管通透性增加導致水腫，還可導致機體血鈣濃度降低、中性粒細胞濃度上升、白細胞濃度下降、血漿纖維蛋白濃度增加。

2.癥狀。BEFV感染牛機體后，潛伏數日后突然發病，體溫迅速升高至40℃～42℃，發熱2～3天后恢復正常。有些病牛產奶量明顯下降乃至停止，隨后出現口鼻分泌物增多、精神倦怠、食欲降低乃至廢絕、跛腿行走、關節腫脹、呼吸加快、心率增速等癥狀。肺部聽診音開始為干啰音，后發展為濕啰音，不同狀態的牛表現出的臨床癥狀輕重不同。高產奶牛、體型肥胖的牛、成年牛、公牛表現出更加嚴重的臨床癥狀。有些牛感染BEFV后迅速死亡不表現任何臨床癥狀。部分病牛出現頭部歪向一側、癱瘓、倒地不起、瘤胃鼓氣、反芻停止、便秘、最終死亡。多數病牛表現為單腿或多腿出現僵硬、跛行，母牛出現死胎、流產。

3.病理變化。BEF病牛因癥狀不同、發病階段不同而表現出不同的病理變化。該病的病理變化主要體現在呼吸系統，呼吸道黏膜腫脹、充血、有出血點，呼吸道內有大量充滿的氣泡的滲出物。肺部明顯腫大，甚至占據整個胸腔，表現為充血腫脹、充水腫脹或者間質部位充氣腫脹，黏膜下大量淋巴細胞積聚。肺部病變主要發生于肺葉處，有時可見到暗紅色實質性病變。胃、腸及心臟部位的病變以出血為主，肉眼可見出血點，黏膜充血。心臟有時可見血凝塊，胃腸有時發生廣泛性出血、卡他性炎癥甚至黏膜脫落。肝、脾及腎等器官也可見腫大等病變。關節腫大，有炎性滲出。

四、診斷

根據特殊的臨床癥狀和病理變化可以實現對該病的初步診斷。如需確診需對疑似患BEF的病牛進行進一步的實驗室診斷。目前，常用的實驗室診斷方法包括病原學診斷、血清學診斷以及分子生物學診斷。

1.病原學診斷。采集患BEF病牛的血液分離白細胞，并接種小鼠腦部，對BEFV進行多次傳代，使BEFV的潛伏期不斷縮短，毒力不斷增強，待傳代至BEFV能夠使全部小鼠3天內迅速發病死亡時分離小鼠體內病毒，進行血清中和試驗。分別在分離得到的病毒懸液中加入陽性血清和陰性血清，并注射到小鼠腦部。若注射陽性血清與分離物懸液混合液的小鼠全部存活或者僅個別死亡，而注射陰性血清與分離物懸液混合液的小鼠全部死亡，則說明病牛患BEF。該方法耗費時間長，有一定操作難度，因此，目前往往采用更加簡便快捷的血清學診斷方法以及分子生物學診斷方法。

2.血清學診斷。常用的血清學診斷方法包括∶血清中和試驗（S N）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、補體結合試驗（CFT）以及間接免疫熒光技術（IFA）。這些血清學診斷方法均具有良好的特異性及靈敏度。SN包括常量SN和微量SN，適合于大規模進行的流行病學調查，其中微量SN是目前采用的標準診斷方式。特異性抗體阻斷ELISA特異性較好，并且操作簡便，常被用于BEF的臨床診斷。

3.分子生物學診斷。采用分子生物學方法對BEF進行診斷，具有快速、簡便、靈敏等多種優點。目前已經建立了多種行之有效的分子生物學診斷方式，包括反轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）、反轉錄等溫擴增技術（RT-LAMP）、實時熒光定量聚合酶鏈式反應（Real-time PCR）等技術。RT-PCR是目前最常用的實驗室診斷方式，該方法操作較簡單，靈敏度較好。Real-time PCR更加省時、特異性更好、靈敏度更高。RT-LAMP相較于PCR技術環節更少，并且可以在病牛發病早期進行檢測，但是該方法易造成病毒擴散，因此難以廣泛應用。

五、治療

根據患BEF病牛的臨床癥狀，采用不同的治療方案。根據癥狀不同可以分為呼吸型、消化型和癱瘓型。治療過程中根據臨床表現可以通過補充等滲溶液改善脫水癥狀，使用抗生素抑制繼發感染，使用抗炎藥物抑制炎癥的發展。針對呼吸型，可以使用解熱鎮痛類藥物退燒，使用糖皮質激素進行抗炎治療，使用廣譜類抗生素抑制細菌的繼發感染，使用林格氏液或生理鹽水進行補水治療；針對消化型病牛，給予降溫退熱、抗炎以及預防繼發感染治療；針對癱瘓型病牛，要經常幫助其每日翻身數次，避免因血液循環受阻引發壞死。除進行降溫退熱、抗炎并防止繼發感染外，還可以使用葡萄糖酸鈣治療鈣血癥。

六、防控措施

1.免疫接種。疫苗接種是預防BEFV的主要手段，目前常用的疫苗包括弱毒疫苗、滅活疫苗、基因工程亞單位疫苗以及重組型疫苗，重組疫苗主要針對BEFV的G蛋白。牛接種該疫苗后保護期較短，因此疫苗接種后每間隔6～12個月需要加強免疫。發生過BEF的牛，痊愈后獲得堅強的免疫，能夠抵抗BEFV的再次感染，不需要接種該疫苗。

2.飼養管理和環境衛生。由于該病為非接觸性傳播，蚊類等節肢動物是BEF傳播的主要媒介。因此，阻斷蚊蟲傳播，對抑制該病的流行具有重要意義。在蚊蟲滋生的陰雨季節應停止放牧，改用舍飼，養殖場區內應及時清理積水，飲水器具應定期清潔并進行消毒，養殖圈舍門窗安裝紗網，阻止蚊蟲進入。

采取合理的飼養管理措施，注重溫度、濕度控制，避免環境過冷過熱、過于干燥或者過于潮濕引發應激導致抵抗力下降。飼喂營養均衡的草料，清潔飲水，避免飼喂存在霉變的情況的草料或不潔飲水引發疾病，同樣導致抵抗力下降。