CYFRA21-1、OPN與子宮頸癌患者放療敏感性、腫瘤分期的關系

曾峰華

子宮頸癌是女性各種惡性腫瘤中最多見的癌瘤，在女性生殖器官癌瘤中占據首位，近年來發生率逐漸提高，僅次于乳腺癌成為婦科腫瘤第2位[1]。按照病理類型可以分為不典型增生、早期浸潤癌、原位癌、腺鱗癌、腺癌等。典型癥狀是引道接觸性出血、出現異常排液，子宮頸癌早期沒有明顯癥狀，隨著疾病發展，晚期時還會導致其他臟器組織出現浸潤轉移，伴有消瘦、乏力、貧血等癥狀。子宮頸癌的發生因素有很多，包括人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染、吸煙、妊娠、性生活等，治療方法包括手術治療、放療、化療、靶向治療等，抑制癌細胞的生長，臨床治療失敗的原因主要包括患者病灶部位癌細胞發生轉移或者局部癥狀加重[2]。研究表明血清腫瘤標志物的檢測對于腫瘤的診斷和治療都有著重要的參考意義，臨床缺乏能夠特異性檢測子宮頸癌的血清學指標，細胞角蛋白19片段抗原（serum cytokeratin 19 fragment antigen，CYFRA21-1）是細胞中角蛋白的成分，主要存在于正常上皮細胞和上皮癌細胞中，當正常上皮細胞處于凋亡狀態時，角蛋白碎片就會出現降解，逐漸溶于血液中，使得血液中角蛋白含量升高，在多種腫瘤中表達量較高，CYFRA21-1顯著升高時提示腫瘤的晚期或者預后較差。骨橋蛋白（osteopontin，OPN）是一種糖基化蛋白，廣泛存在于細胞外基質中，是一種重要的骨基質蛋白，與骨的形成和發展密切相關，在腫瘤的發生和發展中有著重要作用[3-4]。本研究通過檢測血清CYFRA21-1和 OPN的表達情況，探討兩者與化療敏感性、腫瘤分期及預后的相關性，現將相關情況報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院自2018年2月—2021年2月收治的70例子宮頸癌患者，年齡34～67歲，平均年齡（51.4±3.8）歲；選擇同時期內接受乳腺癌的70例患者作為對照組，年齡35～68歲，平均年齡（52.3±3.7）歲，兩組患者基本資料差異無統計學意義（P＞0.05），醫院倫理委員會審核通過。納入標準：（1）研究組患者術前未經過化療，術后病理組織檢查后確診為子宮頸癌，符合臨床診斷標準[5]。（2）對照組患者符合乳腺癌診斷標準；（3）檢查發現兩組患者沒有遠處臟器轉移和組織病灶轉移。（4）認知功能正常，患者及家屬對本研究知情同意。排除標準：（1）對于治療過程中使用的藥物存在過敏史。（2）處于妊娠期或者哺乳期。（3）肝、腎、心功能不全等[6]。

1.2 治療方法

所有患者在入組24 h后清晨空腹采集新鮮靜脈血液5 mL，將其放置于離心管中，使用EDTA抗凝后在高速離心機中離心15 min，速度為2 500 r/min，取上清液儲存于-80℃冰箱內備用檢查，采用酶聯免疫吸附實驗法測定血清CYFRA21-1和OPN表達水平，試劑盒采用北京博奧派克生物科技有限公司生產的配套試劑盒。

采用定期門診檢查、電話或者微信的方式對患者進行隨訪，了解患者的恢復情況，告知患者治療結束后每隔2個月至少到醫院復查1次，隨訪時間大約為8～26個月，及時對患者出現的各種問題進行健康指導，改善預后[7]。

1.3 觀察指標

（1）采用酶聯免疫吸附實驗法測定兩組患者血清CYFRA21-1、OPN表達水平。

（2）分析患者血清CYFRA21-1、OPN水平與分化程度、臨床分期以及淋巴結轉移的關系。

（3）使用Spearman軟件分析血清CYFRA21-1、OPN水平與腫瘤分化程度、臨床分期、淋巴結轉移等臨床病理因素的相關性[8]。

1.4 統計學分析

所有數據均采用SPSS 20.0軟件分析。計數資料以例（%）表示，行χ2檢驗，計量資料以（±s）表示，行t檢驗，P＜0.05則差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者血清CYFRA21-1、OPN水平對比

研究組患者血清CYFRA21-1、OPN水平均顯著高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者血清CYFRA21-1、OPN水平對比（±s）

表1 兩組患者血清CYFRA21-1、OPN水平對比（±s）

2.2 血清CYFRA21-1、OPN水平與子宮頸癌臨床病理的關系

在子宮頸癌組織中，血清CYFRA21-1、OPN水平與臨床分期、腫瘤分化程度及淋巴結轉移有密切關系（P＜0.05），見表2。

表2 血清CYFRA21-1、OPN水平與宮頸癌臨床病理的關系（±s）

表2 血清CYFRA21-1、OPN水平與宮頸癌臨床病理的關系（±s）

2.3 血清CYFRA21-1、OPN水平與臨床病理因素的相關性分析

血清CYFRA21-1、OPN水平與臨床分期、腫瘤分化程度、淋巴結轉移等均呈正相關（P＜0.05），見表3。

表3 血清CYFRA21-1、OPN水平與臨床病理因素的相關性分析

3 討論

近年來隨著人類乳頭瘤狀病毒（HPV）的傳播，吸煙、多孕多產以及其他不良生活習慣等因素導致機體抵抗HPV感染的能力下降，子宮頸癌的發生率越來越高，而且呈現逐漸年輕化的趨勢，在女性生殖系統惡性腫瘤中居首位，因此早期發現子宮頸癌對于預后有著重要的診斷意義[9]。子宮頸癌的診斷措施包括宮頸活檢、細胞學診斷、三合診、影像學檢查、陰道鏡檢查、碘實驗、氮激光腫瘤固有熒光診斷法等，而子宮頸癌確診的“金標準”為鏡下子宮頸癌組織學診斷。血清腫瘤標記物檢查也成為早期診斷和預測腫瘤的重要參考指標。子宮頸癌腫瘤常見的標志物為細胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、甲胎蛋白（AFP）、血清鱗癌抗原（SCC）、骨橋蛋白（OPN）等[10]。

CYFRA21-1是細胞角蛋白CK19的一種可溶性片段，也是一種上皮細胞中的腫瘤標志物，廣泛分布于子宮內膜，細胞角蛋白是形成中間絲的亞單位，也是構建細胞骨架的重要蛋白質。根據這種物質分子量大小以及在電泳過程中不同等電點，可以將其分為20種類型，一般被分為兩個亞群，Ⅰ類(酸性蛋白)，Ⅱ類(堿性蛋白)，細胞角蛋白是由酸性蛋白和堿性蛋白結合而成，屬于異聚合體，而CYFRA21-1分子量大小約為40 000 Da，屬于Ⅰ類蛋白，并且在角蛋白家族中也是分子量最小的蛋白[11]。細胞角蛋白19廣泛分布在很多正常組織表面，例如鱗狀上皮、層狀上皮，在腫瘤惡性上皮細胞中，蛋白酶被激活后就會使得細胞降解速度大幅度增加，大量角蛋白碎片破裂之后就會釋放進入血液，可溶性片段之間相互結合后就形成了CYFRA21-1，該物質在在多種腫瘤細胞中都有表達，尤其在肺鱗癌中呈高表達狀態，腫瘤細胞轉移或者裂解后它的酸性亞單位就可以釋放到血清中，血清中CYFRA21-1的表達可以作為腫瘤標志物，濃度的高低也可以反映病情的嚴重情況[12]。研究結果顯示子宮頸癌患者血清CYFRA21-1表達水平明顯高于對照組，與分化程度、淋巴結轉移、臨床分期等有著密切的關系，而且與分化程度、淋巴結轉移、臨床分期等呈正相關關系（P＜0.05），子宮頸癌是以鱗狀細胞癌為主，蛋白酶可以加速CYFRA21-1的釋放，血清中含量明顯升高，檢測該指標可以作為子宮頸癌診斷及治療的標志物[13]。CYFRA21-1的血清濃度水平也可以作為患者手術和放化療后跟蹤是否出現早期復發的有效指標。

OPN是一種糖基化蛋白，主要是在機體發育過程中由由間葉組織細胞分泌產生，這種物質廣泛存在于細胞外基質中，糖基化修飾以O-聚糖為主，在機體內具有很多生物學調節作用，能夠參與組織修復、自身代謝等功能。這種糖基化蛋白在癌細胞的生長、增殖、浸潤等發展過程中也發揮著十分重要的作用。該物質相對分子質量約為44 kDa，約含有300個氨基酸殘基，其中占據較高比例的氨基酸為絲氨酸、谷氨酸和天冬氨酸，正常情況下表達較低的細胞，例如T淋巴細胞、成纖維細胞、巨噬細胞等在經過一些誘導因素的刺激時就能夠大量表達OPN。OPN表達于不同的組織和細胞類型中，由于激素生長因子的產生以及癌基因各種產物的調控使得OPN的表達量存在差異[14]。OPN一般包括兩種形式，磷酸化和去磷酸化，其中對于OPN活性能夠產生較大影響的主要為磷酸化修飾，蛋白磷酸化之后就能夠特異性結合整合素表面受體，而去磷酸化蛋白主要結合CD44受體，從而發揮不同的作用。OPN經過凝血酶剪切之后，C-末端片段可與細胞表面整合素受體結合，N-末端片段與巨噬細胞表面受體結合，在免疫調控過程中，OPN還能夠結合T淋巴細胞表面整合素受體，并且促進Th1分化為Th2分化，從而提高細胞免疫能力，對于外界炎癥因子的侵襲加強防御，避免出現炎癥。OPN具有多種生物學作用，包括細胞黏附、細胞募集、作為一種基質功能性非膠原蛋白，能夠與其他物質結合后啟動信號轉導級聯反應，促進基因表達的改變。此外在血管平滑肌由收縮轉化為合成時，OPN還能夠作為一種標志性因子，并且還是血管細胞中的重要黏附因子[15]。在淋巴細胞中，尤其是NK細胞和T細胞中，OPN被非特異性結合不久后開始表達，另外這種物質對于自身免疫以及抗感染的非特異性免疫也能發揮一定的作用。腫瘤發生和轉移過程中將OPN看作血清標志，不同表達水平與機體炎癥和創傷反應有密切關系，在腫瘤轉移的過程中也能夠發揮重要的作用。有研究表明OPN能夠激活癌基因的表達，抑制細胞凋亡，促進癌細胞增殖，導致腫瘤發生。本研究通過檢測患者血清中OPN的水平發現研究組OPN表達量顯著高于對照組，且與臨床分期、淋巴結轉移、分化程度也呈正相關關系（P＜0.05），這說明OPN的表達與子宮頸癌的發生有著密不可分的關系，也可以作為子宮頸癌預測的重要指標[16]。分析原因是由于OPN作為一種非膠原性骨基質糖蛋白，帶有負電荷，能夠刺激細胞信號傳導，在腫瘤發生過程中能夠促進細胞增殖，加速腫瘤惡化，促進轉移性腫瘤細胞的生存，但是本研究樣本量不足，針對這兩個指標在子宮頸癌中的具體作用機制仍需要進一步深入探究[17]。

綜上所述，CYFRA21-1和OPN在子宮頸癌組織中表達水平都較高，而且和臨床病理因素之間存在著密切關系，能夠促進腫瘤發展，本次研究也為子宮頸癌早期診斷以及靶向藥物治療提供了參考依據和新的思路。