LP-PLA2在初診斷2型糖尿病微血管病變患者中的水平變化及相關性研究

葛 飛，楊淑芳，劉恩琳，楊明月，李湘怡，范葦葦

（1.南通大學第五附屬醫院（泰州市人民醫院）；2.大連醫科大學研究生培養基地（泰州市人民醫院），江蘇 泰州 225300）

糖尿病并發癥嚴重降低糖尿病患者的生活質量，并受到廣泛關注。臨床上常見的糖尿病微血管病變見于糖尿病性腎臟病，糖尿病性視網膜病變。隨著糖尿病發病率的升高，醫學檢測技術的提高等原因，糖尿病性微血管病變的發病率也呈上升趨勢，早期的糖尿病微血管病變通過積極的干預治療可以逆轉患者的病情至愈合，但晚期的糖尿病微血管病變常常面臨著治療效果差，病情進行性發展至終末期腎病，失明等結局，故臨床上針對糖尿病微血管病變的診治原則是早發現，早治療，所以積極地探索早期糖尿病微血管病變中特異性血清標志物具有重要臨床意義。脂蛋白相關磷脂酶A2（Lipoprotein-associated phospholipase A2，LP-PLA2）是磷脂酶超家族中的亞型之一，又稱血小板活化因子乙酰水解酶，由血管內膜中的巨噬細胞、T細胞和肥大細胞分泌。動脈粥樣硬化斑塊中LP-PLA2表達上調，可水解氧化脂酶，生成脂類促炎性物質，進一步激活多種炎細胞和還原-氧化敏感的炎性反應，進而導致粥樣硬化斑塊形成。本研究通過檢測LP-PLA2在初診斷2型糖尿病性微血管病變患者中的水平變化，進一步探討其差異表達及相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取泰州市人民醫院內分泌科2020年1月至2021年1月住院或門診初次診斷的糖尿病患者156例（糖尿病組），按照有無糖尿病性微血管病變分為非糖尿病性微血管病變組（A組），糖尿病性微血管病變組（B組），選取14例健康體檢者做對照為正常組（C組）；三組間一般資料比較，年齡、性別、BMI、血壓等差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標準：根據1999年世界衛生組織糖尿病標準診斷2型糖尿病；初次診斷糖尿病腎病及糖尿病視網膜病變患者；糖尿病腎臟病變（DKD）診斷標準：DKD的臨床診斷依據至少具備以下1條：（1）可肯定高血糖與CKD的因果關系或高血糖為糖尿病腎臟病變的起因或排除了非糖尿病腎臟。（2）存在病理學診斷支持：對有腎穿刺病理檢查者，例如有糖尿病特征的腎臟損害的病理學依據，糖尿病腎病診斷可確立。（3）不同時間測定2～3次尿微量白蛋白/肌酐（ACR）異常及GFR下降（臨床分期參照2012年KDIGO指南）；糖尿病性視網膜病變診斷標準：免散瞳眼底鏡檢查提示存在微血管瘤、出血、軟性滲出、硬性滲出及視網膜新生血管等。排除標準：嚴重的心臟、肺及肝臟疾病的，其他原發性腎臟疾病；一個月前有感染史；患有腫瘤，妊娠期患者；伴有原發性非糖尿病性腎臟疾病及視網膜病變患者；伴冠心病或嚴重的大血管狹窄病變患者。

1.2 方法LP-PLA2檢測方法：應用雙抗體夾心免疫層析法。上轉發光免疫分析儀：（1）將檢測卡、稀釋液及待檢測樣本平衡至10℃～30℃。（2）拆開檢測卡的鋁箔袋包裝，將檢測卡放置在平臺上。（3）在檢測卡上待檢測樣本編號。（4）取樣本100μl，加入到150μl樣本稀釋液中，充分混勻，取混合物100μl，加入加樣孔。（5）10℃～30℃放置15分鐘。（6）在儀器中輸入該批檢測卡參數，對儀器內置的曲線進行設置，測量完成后儀器會將濃度值自動將顯示在屏幕。

1.3 統計學處理使用SPSS 20.0統計學軟件進行比較和分析，計量資料用（xˉ±s）表示，三組比較用方差分析，計數資料用率（%）表示，比較用x2卡方檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組患者一般資料如年齡、性別、BMI、腰圍等無統計學意義（P＞0.05），三組患者實驗室檢查：糖尿病組和正常組相比脂蛋白相關磷脂酶A2（LP-PLA2）有統計學意義（P＜0.05）；三組間胱抑素C、脂蛋白相關磷脂酶A2（LP-PLA2）、尿ACR、HDL相比有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 Logistic回歸分析結果以是否患有糖尿病微血管病變為自變量，進行Logistic回歸分析，結果發現胱抑素C、脂蛋白相關磷脂酶A2（LP-PLA2）、病程、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）與是否患有糖尿病性微血管病變相關。其中胱抑素C、脂蛋白相關磷脂酶A2（LP-PLA2）、病程為糖尿病微血管病變發生的危險因素，高密度脂蛋白膽固醇為保護因素。見表2。

2.3 脂蛋白相關磷脂酶A2（LP-PLA2）對早期糖尿病微血管病變的評估價值分析。ROC曲線分析結果顯示脂蛋白相關磷脂酶A2（LP-PLA2）對早期糖尿病微血管病變的評估價值良好。見圖1。

圖1 ROC曲線圖

3 討論

眾多國內外眾多研究表明，在冠狀動脈硬化，心腦血管相關疾病，糖尿病及糖尿病大血管病變的患者中均可發現LP-PLA2水平的變化，高水平LP-PLA可作為冠狀動脈硬化性心臟病發生的預測因子，LP-PLA2也可作為糖尿病大血管病變的獨立炎癥指標[1-3]，LP-PLA2在大血管及糖尿病大血管病變中的檢測作用已逐漸得到肯定，但目前對于LP-PLA2與2型糖尿病性微血管病相關的研究較少。

本研究中發現糖尿病組和正常組相比LPPLA2水平變化有統計學意義（P＜0.05），正常對照組、非糖尿病微血管病變組、糖尿病微血管病變組LP-PLA2水平依次升高，提示LP-PLA2在2型糖尿病性微血管病的發生、進展中發揮作用，隨著微血管病變的加重，其血清表達顯著升高。國外也有研究報道可見糖尿病視網膜病變與LPPLA2的相關研究[4]，提示糖尿病視網膜病變患者中LP-PLA2不同程度升高，使用抗LP-PLA2活性的藥物可緩解視網膜黃斑病變。本課題組前期的相關研究已提示LP-PLA2水平升高與高血糖及糖尿病腎病的發生相關，LP-PLA2的檢測對2型糖尿病及糖尿病腎病（DN）的病情評估有一定程度輔助價值[5]，國內張佳思等[6]研究發現血LP-PLA2水平與DN患者腎臟損害程度密切相關；比傳統腎臟功能指標可以更早反映DN的出現。提示LPPLA2在2型糖尿病性微血管病中伴有重要角色，但具體機制目前仍有待研究。有研究提示動脈粥樣硬化是一種全身性變化，全身不同級別的動脈、各部位的器官、組織的血管都在危險因素的影響下形成動脈粥樣硬化斑塊，包括視網膜動脈、腎動脈等[7,8]。徐玉善等[8]研究顯示糖尿病性微血管的并發癥和大血管的動脈斑塊形成很有可能作用機制是相同的。LP糖尿病患者有高水平的氧化自由基，自由基激活了氧化應激系統，增加了脂蛋白的氧化，使ox-LDL增加，而LP-PLA2作為血管特異性炎性酶能對ox-LDL產生水解作用，即增加了LP-PLA2的底物，釋放出多種炎性介質如溶卵磷脂、游離氧化脂肪酸等，促進動脈粥樣硬化作用，進一步活化粒細胞，增加了LP-PLA2的數量和活性，加劇炎性反應，進而損傷內皮細胞[9,10]。溶血卵磷脂和氧化型非酯化脂肪酸是更強的炎癥因子，誘導的黏附因子、細胞因子、白細胞介素1及腫瘤壞死因子等炎癥細胞因子，調控細胞的功能，破壞內皮細胞，使其通透性增加[11,12]。

本研究中Logistic回歸分析發現高密度脂蛋白對糖尿病微血管病變有保護作用。LP-PLA2與血脂密切相關。循環血中有80%的LP-PLA2和低密度脂蛋白（LDL-C）相結合，約20%則與高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和極低密度脂蛋白膽固醇（VLDL）相結合。Fentoglu O[13]等研究也有類似結果，循環中LP-PLA2活性與膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平呈明顯正相關，其中與低密度脂蛋白含量關聯性最強，和高密度脂蛋白膽固醇水平側呈負關聯性。課題組前期的研究[14]發現LDL-C是影響血NGAL水平的獨立危險因素，而血NGAL水平與糖尿病腎臟疾病的發生相關，提示脂質代謝紊亂在糖尿病微血管病變高度關聯，因此，關注糖尿病微血管病變患者的血脂水平是必要的。

綜上所述，血漿LP-PLA2水平與糖尿病微血管病變相關，提示LP-PLA2對糖尿病性微血管病有一定診斷價值。但LP-PLA2在2型糖尿病微血管病變中的作用機制有必要更深入的研究，明確具體關聯，將可能為糖尿病性微血管病變提供預測指標及治療新靶點。