福建省秀珍菇病害調查與防控策略

劉 芳 袁宗勝 柯麗娜 袁 濱 陳國平 謝寶貴*

（1福建農林大學生命科學學院，福建福州 350002；2閩江學院地理與海洋學院，福建福州 350108；3漳州市農業科學研究所，福建漳州 363005；4漳州市農業農村局經濟作物站，福建漳州 363099）

秀珍菇Pleurotus geesteranus屬真菌門Eumycota，擔子菌綱Basidiomycete，傘菌目Agarical，側耳科Pleurotaceae，側耳屬Pleurotus[1]，因其營養豐富，味道鮮美，深受廣大消費者的喜愛。近年來除了傳統季節性栽培秀珍菇外，工廠化栽培規模也逐步擴大[2]，但隨著栽培面積的擴大，生產區域的病害不斷加重，嚴重制約秀珍菇產業的發展。秀珍菇病害不僅會影響外觀口感，嚴重時還會導致子實體徹底死亡[3]。為進一步了解秀珍菇病害的發生情況，筆者于2021 年10—12 月對福建省秀珍菇主要栽培區（漳州市、福州市等）病害的發生情況進行了調查，采集病害樣本，并對部分病原菌進行分離、純化及分子生物學鑒定，以期為當地秀珍菇病蟲害防治提供數據支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

真菌培養采用PDA 培養基：新鮮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL。病原真菌DNA提取試劑、ITS 片段擴增所用的引物、Marker、dNTPs、Buffer、溶菌酶，購自生工生物工程（上海）股份有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 秀珍菇真菌性病害調查

調查福建省漳州市、福州市等秀珍菇主要栽培區秀珍菇病害發生情況。在病害調查過程中，咨詢當地食用菌栽培技術主管部門，至經常有病害發生的菇棚或車間查看秀珍菇生長情況，發現病害后，對發病菌袋進行編號，并詳細記錄采集地點、采集時間、病樣癥狀特點等。

1.2.2 秀珍菇主要病害的分離和病原物鑒定

1.2.2.1 病原物采集

采集點：福建省漳州市、福州市等秀珍菇設施化栽培主要產區。采集時期：秀珍菇發菌期、后熟期和出菇期。采集方法：排查菇棚或栽培車間秀珍菇生長情況，發現病害后，整袋采集發病菌袋，并低溫保存運輸，保持病原物的原始性。

1.2.2.2 真菌性病原物的分離與ITS序列分析

用接種針直接刮取發病部位的霉層，并放入PDA 培養基，28 ℃恒溫培養3~7 d 后，用接種針挑取病原菌邊緣菌落至PDA 平板純化培養。觀察病原菌形態特征及培養基顏色變化，然后將純化的病原菌轉接至PDA 斜面培養基備用。采用CTAB法提取病原菌DNA，提取出的DNA 進行下一步PCR 擴增，PCR擴增選用的引物是真菌通用引物ITS1（5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’）和 ITS4（5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’）[4]，將 PCR 擴增得到的產物經過1%（W/V）瓊脂糖凝膠電泳檢測后送至生工生物工程（上海）股份有限公司進行專業測序。將測序結果在 GenBank（NCBI，http：//www.ncbi.nlm.gov）中進行BLAST 同源性分析。用MEGA 5.0 軟件采用最大似然法（maximum likelihood）構建系統發育樹[5]，Bootstrap檢驗的重復次數為1 000次。

2 結果與分析

2.1 福建省秀珍菇病害調查結果

在福建省漳州市、福州市等秀珍菇主要栽培區調查并采集病害樣本26 份。就病害發生因素來看：因害蟲傳播等因素引起的病害1 份，主要是菇蠅幼蟲侵染取食；因生產過程控制不當，如溫濕度、CO2控制不當，光照控制不當等引起的病害或畸形1 份；因原料帶菌、滅菌不徹底、菇房環境消毒不徹底、菌袋破損、接種操作不當等原因引起的病害有24 份，占總采集樣本的92.31%。

表1 福建省秀珍菇主要病害調查結果

2.2 秀珍菇主要真菌性病害鑒定

2.2.1 木霉病及發生情況

主要為木霉屬的病原菌，感染的主要部位是菌袋，如未滅菌徹底的菌袋，上架發菌時有輕微破損的菌袋。木霉菌絲開始為淺灰青色，菌絲生長速度快，侵染定殖后能在2~3 d 出現明顯的菌斑，并快速擴散，能在7 d 內侵染整個菌袋，破壞秀珍菇菌絲（圖1）。病原物經鑒定為哈茨木霉Trichoderma harzianum。

圖1 秀珍菇菌袋感染木霉及顯微圖

2.2.2 青霉病及發生情況

青霉病屬于污染性病害，通常發生在未滅菌徹底的菌袋上，菌絲生長速度不快，在菌袋上多呈現小塊狀發病，有時能與秀珍菇菌絲共存。但在時間較長的未接種的菌袋和棄用的菌袋上能見到大量繁殖的青霉（圖2）。病原菌經鑒定為指狀青霉菌Penicillium digitatum和圓弧青霉菌Penicillium cyclopium。

圖2 秀珍菇指狀青霉發病狀態及顯微圖

2.2.3 鏈孢霉病及發生情況

鏈孢霉在消殺不徹底的菇房內時有發生，通常是通過棉花塞或破口侵入菌袋。鏈孢霉生長速度極快，通常從入侵至長滿袋時間不超過2 d。被侵染的菌袋內出現淡黃色絮團狀菌絲，菌絲較密；鏈孢霉長滿菌袋后只要接觸到空氣，立即在棉花塞上或破口處產生塊狀的孢子團（圖3）。孢子團能迅速擴散孢子，對菇房內其他菌袋帶來污染隱患，須及時處理。病原菌經鑒定為粗糙脈孢菌Neurospora crassa。

圖3 鏈孢霉侵染的秀珍菇菌袋

2.2.4 其他病害及發生情況

調查中還發現生理性病害1種（圖4A）。發病原因為菌袋開袋后該菇房溫度過高，濕度未能及時調高。有的栽培戶使用加熱油汀對打冷后的菇房快速升溫，容易導致局部溫度過高，菌袋表面失水過快，部分原基失水干死，存活原基集中在部分區域，但因過密，使得原基發育不良，過早形成菌蓋長出畸形菇。

圖4 秀珍菇其他病害

其他病害如菌袋滅菌不徹底導致子囊菌污染（圖4B）；菌袋外壁殘余料在裝袋后未清理干凈，栽培后期感染雜菌（圖4C）。

2.3 秀珍菇病害防控策略

目前栽培秀珍菇均采用液體菌種接種，有的小型企業直接購買大型企業生產的長滿菌絲的菌袋進行出菇。因此，栽培環境成為秀珍菇是否發生病害的決定性因素，且直接影響病害的病原菌、發病過程和發病程度。不論是設施化大棚秀珍菇，或是工廠化栽培秀珍菇均應充分重視秀珍菇病害的源頭與過程控制。結合秀珍菇病害發生情況和調查過程中所見菇房（棚）管理，衛生控制、人員素養等方面，筆者提出秀珍菇栽培者尤其是秀珍菇生產企業應導入危害分析與關鍵控制點（Hazard Analysis Critical Control Point，HACCP）管理體系[6]，從而達到預防或降低病害的發生，以保證食品安全。具體防控措施：（1）對秀珍菇栽培所用原輔料及整個生產過程進行物理、化學、生物等方面的危害分析，找出關鍵控制點并進行防控；（2）對關鍵控制點監控人員進行相關業務培訓，熟知超出關鍵限值時所采取的糾正措施；（3）加強接種操作的規范化管理；（4）加強菇房（棚）溫濕度及其他各項控制指標的管控；（5）嚴格菇房（棚）、器具的衛生及消毒；（6）加強現場及操作人員的個人衛生管理；（7）加強菇房（棚）蟲鼠害的防控；（8）加強生產用水的管理[7]。

3 小結與討論

通過調查，初步掌握了福建省秀珍菇病害的發生情況，為秀珍菇病害的有效防控奠定了基礎。導致秀珍菇發生病害的因素有多種，除生產管理因素、病原物、環境條件外，菌種退化、菌種老化也是重要因素[8]。低劣的菌種會導致菌絲活力衰弱，接種后易被病原菌侵染而發生病害。因此，嚴格遵循菌種生產相關標準，采用優質菌種，通常能有效預防病害發生。

針對秀珍菇病害的防控，筆者認為要充分重視源頭控制與過程控制，貫徹“預防為主、綜合防治”的理念，切實做好防控措施[9]。提出導入危害分析與關鍵控制點（HACCP）管理理念，從而達到預防或降低病害的發生，以保證食用菌產品衛生安全[10-11]。