廣西香花油茶炭疽病病原菌鑒定及生物學特性

廖旺姣，韋 維，鄒東霞，鐘雅婷，羅 輯，葉 航

(廣西壯族自治區林業科學研究院/廣西特色經濟林培育與利用重點實驗室/廣西林業有害生物天敵繁育工程技術研究中心，南寧 530002)

【研究意義】香花油茶(CamelliaosmanthaYe CX，Ma JL et Ye H)是2012 年在廣西南寧市發現的山茶屬短柱茶組新物種，其獨特的表型性狀有別于其他山茶屬油茶(C.oleiferaAbel.)，表現早熟、果量多、出籽率高、抗逆性強，而且樹型美觀、花帶香氣，是有望在廣西大力推廣種植的油茶物種和觀賞樹種[1]。自2015年以來，本課題組在調查普通油茶及香花油茶病蟲害時，發現香花油茶試驗林常有炭疽病發生，其中疏于管理、生長較差的植株發生較嚴重。目前，鮮見因炭疽病導致油茶嚴重損失的報道，對成林香花油茶炭疽病病原菌的了解甚少。因此，密切關注香花油茶炭疽病的發生為害動態，準確鑒定其病原菌和掌握其生物學特性，對香花油茶的抗病育種及其炭疽病防治具有重要意義。【前人研究進展】香花油茶的研究主要集中在苗木快速繁育[2]、栽培[3]、生理[4-5]、茶油[6-7]、葉片和果殼的綜合利用[8-10]、園林應用[11]等方面，針對其病蟲害的研究報道較少。已有研究將香花油茶苗期炭疽病病原菌報道為Colletotrichumfructicola[12]。常明山等[13]研究表明，香花油茶對普通油茶炭疽病菌膠孢炭疽菌(C.gloeosporioides)的抗性表現為中抗，感病油茶的酶活性與感病指數存在明顯相關。韋維等[14]研究報道，香花油茶對南方根結線蟲(Meloidogyneincognita)的抗性表現為中抗。李德偉等[15]研究發現，香花油茶對茶黃硬薊馬(Scirtothripsdorsalis)具有較強抗性。李河等[16-17]研究指出，C.fructicola是湖南油茶炭疽病的優勢病原菌，也是江西、福建和湖北等省油茶的炭疽病病原菌。李楊等[18]研究認為，C.fructicola是海南油茶炭疽病病原菌之一，該菌在10～35 ℃均能生長，最適生長溫度為28 ℃；菌絲在pH 4～11 范圍內均可生長，在pH為6時生長最快，12 h光暗交替有利于其菌絲生長；可利用多種碳源，其中對葡萄糖和麥芽糖的利用效果較好；對牛肉膏和酵母浸粉2種氮源的利用效果較好，對氯化銨和硫酸銨的利用效果最差。劉倩麗等[19]研究表明，C.fructicola是海南檀香炭疽病病原菌，其菌絲及分生孢子均能在 10～35 ℃條件下生長，最適菌絲生長溫度及最適分生孢子萌發溫度均為 30 ℃；菌絲及分生孢子萌發的 pH為 4～11，最適菌絲生長及分生孢子萌發的pH 分別為 6和 5，光照最有利于菌絲生長，而黑暗條件有利于分生孢子萌發；該菌對蔗糖和可溶性淀粉等碳源利用效果較好，對蛋白胨、 尿素、 酵母膏浸粉和硫酸銨等氮源利用效果較佳；該菌菌絲生長的溫度范圍、pH范圍及最適pH與海南油茶炭疽病菌相同，對酵母浸粉的利用效果也與海南油茶炭疽病菌一致。宋麗麗等[20]研究結果顯示，C.fructicola是上海和安徽草莓(Fragariaananassa)炭疽病的病原菌，其最適生長溫度為 25～30 ℃，最佳 pH 為 6～7，可利用葡萄糖等多種碳源和銨鹽等多種氮源。上述來源于不同地域油茶、檀香和草莓3種寄主的同一病原菌均為C.fructicola，其生物學特性有相同之處也存在一定差異，說明不同寄主和不同地域對C.fructicola的生物學特性具有明顯影響。【本研究切入點】目前，廣西香花油茶栽培面積日益擴大，但對成林香花油茶炭疽病病原菌的分類地位尚不清楚，對其病原菌的生物學特性尚不明確。【擬解決的關鍵問題】以隨機采樣法采集廣西區內香花油茶試驗林典型炭疽病樣品，采用傳統形態特征觀察與現代分子生物學即病原菌多基因系統分析相結合的方法，明確香花油茶炭疽菌的分類地位，采用平板法測定溫度、酸堿度和光照等因子對病原菌的影響，為香花油茶品種的抗病選育及病害防治技術研究提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試香花油茶炭疽病樣品采集于廣西南寧市、來賓市和崇左市香花油茶林；健康香花油茶葉片采自廣西壯族自治區林業科學研究院油茶苗圃。

1.2 試驗方法

1.2.1 病原菌分離及致病性測定 參考朱英芝等[21]的組織分離法獲得疑似病原菌株，分離菌株產孢后，挑取單孢，獲得純培養，保存至PDA斜面試管培養基，28 ℃恒溫培養6 d后，置于4 ℃冰箱保存備用。

采用傷口接種法進行離體葉片和活體葉片接種試驗，選取香花油茶炭疽病病原菌的代表菌株CXNN02、CXLB08和CXCZ09為測試菌株。離體葉片接種法：采集健康香花油茶葉片，自來水清洗干凈，75%酒精表面消毒，再用蘸有無菌水的棉球擦拭葉片3次，置于底部鋪有濾紙的白色透明塑料盒中，葉片基部用蘸有無菌水的棉球保濕。用滅菌接種針在近葉尖處創造1個2 mm的微傷口，移液器接種20 μL分生孢子液(6.00×106個孢子/mL)至傷口上，以接種無菌水為對照，接種測試菌株和對照各20張葉片，置于室溫中培養。活體葉片接種法：在苗圃中選擇健康香花油茶植株，選定從頂葉向下數的第3～6張成熟葉片，接種前葉片處理與離體葉片接種法相同。用手持小型噴霧器將分生孢子液噴灑至葉片滴水，以噴灑無菌水為對照，然后用密封袋將植株密封，48 h后解開密封袋。接種測試菌株和對照各20張。10 d后觀察發病情況，統計發病率和測量病斑大小。將發病葉片與對照葉片分離，比較接種發病葉片獲得分離菌株的形態與接種菌株是否一致，依據柯赫氏法確定致病菌。

1.2.2 病原菌鑒定 病原菌形態鑒定：選擇菌株CXNN02為測試菌株，接種到PDA培養基上，黑暗條件、25 ℃恒溫培養，逐日觀察。培養7 d后，記錄菌株培養性狀和菌落直徑，鏡檢、拍攝和測量100個病原分生孢子和20個分生孢子附著胞大小[22]。

病原菌基因序列測定及多基因系統分析：參考植物基因組試劑盒說明提取病原菌基因組DNA，參考朱英芝等[21]的油茶炭疽病菌多基因系統分析法，對核糖體轉錄間隔區(ITS)、肌動蛋白(ACT)、幾丁質合成酶(CHS1)和3-磷酸甘油醛脫氫酶(GPDH)進行擴增、序列測定和多基因系統發育進化樹構建分析。

1.2.3 生物學特性測定分析 溫度對菌絲生長和產孢的影響：將菌株CXNN02在PDA培養基上25 ℃恒溫培養7 d，以內徑為6 mm的滅菌打孔器在菌落邊緣打取菌餅，供生物學特性測定用。溫度試驗設10、15、20、25、28、30、35和40 ℃共8個溫度，將打取的菌餅接種至PDA平板培養基后，放置在上述溫度及黑暗條件下培養，每個溫度處理設6個重復，7 d后用“十”字交叉法測定不同溫度培養基中的炭疽病病原菌菌落直徑，10 d后用血球計數板法測定產孢量[23]，以確定菌絲生長和產孢的最適溫度。

pH對菌絲生長和產孢的影響：用1.0 mol/L的HCl和NaOH調制pH 4～12(間隔為1)的 PDA培養基，將測試菌株的菌餅接種至上述平板培養基上，25 ℃黑暗培養7 d后用“十”字交叉法測定不同pH培養基中的炭疽病病原菌菌落直徑，以確定菌絲生長和產孢的最適pH。

碳源對菌絲生長和產孢的影響：供試D-麥芽糖、D-葡萄糖和馬鈴薯淀粉等10種碳源，分別以等質量碳含量加入不含蔗糖的查彼培養基中配置成培養基，將測試菌株的菌餅接種至上述含不同碳源培養基上，培養7 d后用“十”字交叉法測定不同碳源培養基中的炭疽病病原菌菌落直徑，以確定菌絲生長和產孢的最適碳源。

氮源對菌絲生長和產孢的影響：供試硫酸銨、L-谷氨酸和牛肉膏等10種氮源，分別以等質量氮含量加入不含硝酸鈉的查彼培養基中配置成培養基，供試菌株菌餅接種至上述含不同氮源培養基上，培養7 d后用“十”字交叉法測定不同氮源培養基中的炭疽病病原菌菌落直徑，以確定菌絲生長和產孢的最適氮源。

光照對菌絲生長和產孢的影響：將供試菌株的菌餅接種至PDA平板培養基上，分別置于完全黑暗、12 h光暗交替和連續光照(8W，燈皿距離20 cm，下同)條件下25 ℃恒溫培養，培養7 d后用“十”字交叉法測定不同光照條件培養基中的炭疽病病原菌菌落直徑，以確定菌絲生長和產孢的最適光照條件。

1.3 統計分析

試驗數據采用Excel 2010進行整理，以DPS 13.01的Duncan’s新復極差法進行差異顯著性檢驗。

2 結果與分析

2.1 香花油茶炭疽病的發病癥狀

香花油茶炭疽病可危害葉片、嫩葉和嫩梢，其發病癥狀與普通油茶炭疽病相似。其中，葉片感病多從葉緣開始，病斑呈半圓形或不規則形擴展，后期病斑中央呈灰白色 (圖1-A)；嫩葉感病多從葉尖開始，病斑呈V字形擴展，隨著葉片枯死面積的增大，感病部位向葉背卷曲，嚴重時整張嫩葉枯死；嫩梢感病呈褐色或黑色，由上至下逐漸枯死。

A：炭疽病癥狀；B：接種發病狀；C：菌落正面；D：菌落背面；E：分生孢子；F：分生孢子附著孢A：Symptoms of leaf anthracnose；B：Symptom of inoculation；C：Colony on PDA；D：Reverse of colony；E：Conidia；F：Conidial appressoria圖1 香花油茶炭疽病的發病癥狀及病原菌Fig.1 Symptoms and pathogens of C. osmantha anthracnose

2.2 香花油茶炭疽病病原菌的分離及致病性測定

從廣西南寧市、來賓市和崇左市香花油茶林分別采集到30、20和26株菌株，共計76株，其菌落形態基本一致，為同一類型的炭疽菌。代表菌株 CXNN02、CXLB08和CXCZ09均可致病，接種3 d后，接種點開始變褐色，病斑隨后逐漸擴展，10 d 后2種接種方法接種的葉片均發病，病斑大小各異，其中，離體接種法接種的病斑平均直徑分別為6.48、6.39和5.20 mm(圖1-B)，活體葉片接種法接種的病斑比離體接種法略小，病斑平均直徑分別為5.53、5.33和 4.97 mm，對照的接種點變褐色，但未擴展。從發病葉片中再次分離獲得的菌株形態與接種菌株一致，而從對照葉片中未分離到任何菌株。因此，確定接種菌株為香花油茶炭疽病的致病菌株。

2.3 香花油茶炭疽病病原菌的鑒定

2.3.1 病原菌的形態特征 菌株CXNN02在PDA培養基上菌落呈圓形，邊緣整齊，菌絲灰色至深灰色，氣生菌絲茂盛，絨毛狀，菌落中心產生孢子堆(橘紅色)，背面產生黑色色素(圖1-C和圖1-D)。菌絲生長較快，培養7 d時菌落平均直徑為82.25 mm，平均生長速率為11.75 mm/d。分生孢子光滑，無色，單胞，圓柱狀，基部平截，頂端鈍圓或略尖，具有1～2個油球，大小為(13.30～20.67)μm×(3.39～7.48)μm，平均為(15.89±1.29)μm×(5.66±0.72)μm(圖1-E)。分生孢子附著胞淺褐色至褐色，單個或多個，圓形或近圓形，邊緣完整，少數呈不規則形，大小為(6.50～10.69)μm×(5.17～9.50)μm，平均為(8.17±0.75)μm×(7.16±5.66)μm(圖1-F)，形態特征與核果炭疽菌(C.fructicola)一致[22]。

2.3.2 病原菌分子生物學分析 經病原菌基因序列測定，獲得代表菌株CXNN02、CXLB08和CXCZ09的ITS、ACT、CHS1和GPDH基因序列，其在 GenBank 的登錄號分別為OM212453-OM212455、OM304374-OM304376、OM273502-OM273504和OM250039-OM250041，經BLAST比對，其同源性均為100.0%。下載相關參考序列，用MEGA 5.0的鄰接法構建上述4個多基因系統發育進化樹，結果(圖2)發現，CXNN02、CXLB08和CXCZ09菌株與核果炭疽菌菌株聚集在一起形成一個進化分支，與除C.siamense外的其他7個進化分支距離較遠，各分支支持率均較高，達99.0%或100.0%。結合傳統的形態學特征分析，確定CXNN02、CXLB08和CXCZ09菌株所在的進化分支代表一個獨立的種，均屬于核果炭疽菌，說明香花油茶炭疽病病原菌為核果炭疽菌。

圖2 基于ITS、ACT、CHS1和GPDH基因序列構建的炭疽菌系統發育進化樹Fig.2 Phylogenetic tree inferred from combined partial ITS，ACT，CHS1 and GPDH sequences data of Colletotrichum

2.4 香花油茶炭疽病病原菌(核果炭疽菌)的生物學特性

2.4.1 溫度對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長及產孢的影響 由表1可知，香花油茶炭疽病病原菌生長的溫度范圍較廣，在10～35 ℃均能生長，其中，在28和30 ℃下培養生長較好，培養7 d時菌落直徑分別為83.19 和81.86 mm，二者差異不顯著(P>0.05，下同)，但均極顯著高于其他溫度培養的病原菌菌落直徑(P<0.01，下同)；在25 ℃下培養的病原菌菌落直徑也較大，為75.09 mm，極顯著高于除28和30 ℃下培養外的其他溫度培養的病原菌菌落直徑；在10～28 ℃溫度范圍，隨著溫度的升高，菌絲生長逐漸加速，在28 ℃時菌落直徑達最大，超過28 ℃后，菌絲生長速度逐漸下降，在30～35 ℃生長速度急劇下降，菌落直徑從81.86 mm下降至14.22 mm，降幅達82.63%。說明高溫不利于香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長，而香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長的最佳溫度為28～30 ℃。

表1 溫度對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長和產孢的影響Table 1 Effects of temperature on mycelium growth and sporulation of C.fructicola

適宜香花油茶炭疽病病原菌產孢的溫度范圍較菌絲生長的溫度范圍略窄。其中，在15～28 ℃范圍內，隨著溫度的升高，產孢量大幅度增加，尤其在15～20 ℃下產孢量增幅最大，從2.33×106個/mL增加至24.83×106個/mL，增加9.67倍；在28 ℃下產孢量最大，為53.33×106個/mL，而后開始下降，在30～35 ℃下產孢量下降尤其明顯，從35.83×106個/mL下降至6.67×106個/mL，下降81.38%。差異顯著性分析結果顯示，28 ℃下培養的病原菌產孢量極顯著高于其他溫度培養的產孢量，25和30 ℃下培養的病原菌產孢量差異不顯著，但二者均顯著大于除28 ℃下培養外的其他溫度培養的病原菌產孢量(P<0.05，下同)。說明20～30 ℃適合香花油茶炭疽病病原菌產孢，尤以28 ℃為最佳。

2.4.2 pH對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長及產孢的影響 由表2可知，香花油茶炭疽病病原菌在pH為 4～11的培養基中均能生長，隨著pH的升高，菌絲生長速度逐漸降低。其中，pH為4～5時，菌絲生長最好，菌落直徑分別為76.95和79.09 mm，二者間差異不顯著，但均極顯著大于在其他pH條件下培養病原菌的菌落直徑；在pH為12時，菌絲停止生長。說明香花油茶炭疽病病原菌適合在弱酸性條件下生長，強堿性不利于該菌生長。

表2 pH對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長和產孢的影響Table 2 Effects of pH on mycelium growth and sporulation of C. fructicola

適宜香花油茶炭疽病病原菌產孢培養基的pH為4～10，較適宜菌絲生長的培養基pH范圍略小。

其中，pH為6時產孢量最大，為35.00×106個/mL，其次分別是pH 5和pH 4，產孢量分別為31.67×106和10.67×106個/mL；在pH為 6～8范圍內，隨著pH的升高產孢量下降，尤以pH為6～7時下降更明顯，從pH為6時的35.00×106個/mL下降至pH為7時的10.50×106個/mL，產孢量下降70.00%。差異顯著性分析結果顯示，pH 為6時的病原菌產孢量顯著大于pH為5時的病原菌產孢量，極顯著大于其他pH時的病原菌產孢量。說明弱酸性條件有利于香花油茶炭疽病病原菌產孢。

2.4.3 不同碳源對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長和產孢的影響 由表3可知，供試10種碳源均可促進香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長和產孢，其中，香花油茶炭疽病病原菌對D-麥芽糖、D-葡萄糖、D-果糖和D-木糖4種碳源的利用效果較好，培養7 d時菌落直徑分別為85.18、83.43、83.05和82.35 mm，四者間差異不顯著，但均極顯著大于其他碳源培養基培養的菌落直徑；香花油茶炭疽病病原菌對半乳糖利用效果最差，其菌絲生長的菌落直徑僅29.51 mm。說明半乳糖可抑制香花油茶炭疽病病原菌生長。

表3 碳源對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長和產孢的影響Table 3 Effects of carbon sources on mycelium growth and sporulation of C. fructicola

香花油茶炭疽病病原菌在10種碳源培養基中的產孢量存在差異。其中，在乳糖培養基中產孢量最大，為36.50×106個/mL，其次是在D-果糖培養基中，產孢量為15.00×106個/mL，產孢量最小的是D-山梨醇培養基，為6.17×106個/mL。說明D-山梨醇可抑制該菌生長。

2.4.4 不同氮源對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長和產孢的影響 由表4可知,香花油茶炭疽病病原菌在供試的10種氮源培養基上均能生長和產孢。其中，菌絲在牛肉膏、蛋白胨和酵母粉3種有機氮源培養基中生長較好，菌落直徑分別為86.98、86.97和84.53 mm，三者間差異不顯著，但除在酵母粉氮源培養基中培養的菌落直徑與在L-谷氨酸培養基中培養的菌落直徑差異不顯著外，三者均極顯著大于其他氮源培養的菌落直徑；香花油茶炭疽病病原菌在硫酸銨培養基中生長最差，菌落直徑僅37.38 mm。說明硫酸銨可抑制香花油茶炭疽病病原菌生長。

表4 氮源對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長及產孢的影響Table 4 Effects of nitrogen sources on mycelium growth and sporulation of C. fructicola

香花油茶炭疽病病原菌在10種氮源培養基中的產孢量存在差異，以在酵母粉培養基上的產孢量最大，達105.33×106個/mL，其次是在蛋白胨和牛肉膏培養基中，產孢量分別為63.50×106和35.33×106個/mL，三者間差異極顯著，且三者均極顯著大于其余7種氮源培養基培養的產孢量。說明酵母粉、蛋白胨和牛肉膏3種有機氮源可促進香花油茶炭疽病病原菌產孢。

2.4.5 不同光照對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長及產孢的影響 表5顯示，香花油茶炭疽病病原菌在完全黑暗、12 h光暗交替和連續光照條件下生長，其菌落直徑分別為84.56、84.46和81.99 mm，以完全黑暗和12 h光暗交替條件下生長較佳，二者間的菌落直徑差異不顯著，但均極顯著大于連續光照條件下培養的菌落直徑。說明黑暗條件有利于香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長。

表5 光照對香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長及產孢的影響Table 5 Effects of light on mycelium growth and sporulation of C. fructicola

3種光照條件對香花油茶炭疽病病原菌產孢量影響顯著，其中以完全黑暗條件下產孢量最大，為24.00×106個/mL，其次是12 h光暗交替，產孢量為12.50×106個/mL，產孢量最小的是連續光照，為7.33×106個/mL。說明黑暗條件最有利于香花油茶炭疽病病原菌產孢。

3 討 論

本研究通過病原菌形態特征觀察和病原菌核糖體ITS、ACT、CHS1和GPDH多基因分子系統學分析，將從廣西南寧市、來賓市和崇左市香花油茶林地采集分離的炭疽病病原菌確定為核果炭疽菌，該菌與廣西普通油茶炭疽病病原菌膠孢炭疽菌[21]、山茶炭疽菌(C.camelliae)不同[24]，但與曾報道的香花油茶苗期炭疽病菌相同[12]。核果炭疽菌在江西、湖南和海南等地的油茶上已有報道[16-18]，其寄主范圍較廣，除油茶外，國外在小粒咖啡(Coffeaarabica)、草莓、深波葉補血草(Limoniumsinense)、葡萄(Vitisvinifera) 和沙梨(Pyruspyrifolia)等作物上也發現由該菌引起的炭疽病[25]，國內在檀香[19]、草莓[20]、棉花(Gossypiumhirsutum)[22]、茶樹(C.sinensis)[26]、蘋果(Maluspumila)[27]、蓮霧(Syzygiumsamarangense)[28]、橡膠樹(Heveabrasiliensis)[29]、桑樹(Morusalba)[30]、芒果(Mangiferaindica)[31]和玉米(Zeamays)[32]等作物上均有該菌引起炭疽病發生的報道。本研究分離、鑒定獲得的香花油茶炭疽病菌株，經培養其菌落性狀(呈圓形，邊緣整齊，菌絲灰色至深灰色，氣生菌絲茂盛，絨毛狀，菌落中心產生橘紅色孢子堆，背面產生黑色色素)與彭友良和王源超[12]報道的香花油茶苗期炭疽病病原菌的培養性狀一致，但菌落顏色較后者略淺；與李河等[16]報道的湖南油茶炭疽病病原菌菌落性狀相似，但分生孢子堆顏色(淺黃色)存在差異，可能與菌株來源不同有關。

生物學特性測定分析結果顯示，適宜香花油茶炭疽病病原菌生長的溫度為10～35 ℃、最適生長溫度為28 ℃，與李楊等[18]報道的海南油茶炭疽病病原菌適宜生長溫度和最適生長溫度一致，但最適生長溫度與劉倩麗等[19]、宋麗麗等[20]報道的炭疽病病原菌最佳生長溫度為30 ℃相比偏低；香花油茶炭疽病病原菌在pH為4～11范圍內均能生長，與李楊等[18]、劉倩麗等[19]的研究結果一致，而最適菌絲生長的pH為4～5，比海南油茶炭疽病病原菌[18]、檀香炭疽病病原菌[19]菌絲最適生長pH為6和草莓炭疽病病原菌[20]菌絲最佳生長pH為6～7偏低，說明香花油茶炭疽病病原菌適合在弱酸性條件下生長；完全黑暗有利于香花油茶炭疽病病原菌生長和產孢，與劉倩麗等[19]報道光照有利于檀香炭疽病病原菌菌絲生長的結果不一致，而黑暗有利于產孢，二者的研究結果一致；香花油茶炭疽病病原菌在D-麥芽糖、D-葡萄糖、D-果糖和D-木糖等碳源培養基中生長較好，與劉倩麗等[19]的研究結果相似；香花油茶炭疽病病原菌在蛋白胨氮源培養基中生長最好、尿素能較好地促進香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長，與劉倩麗等[19]的研究結果一致；香花油茶炭疽病菌對硫酸銨的利用效果最差，而劉倩麗等[19]報道的硫酸銨能較好地促進檀香炭疽病病原菌生長，二者的研究結果存在差異，可能與菌株的寄主不同及地域來源不同有關。本研究觀察測定的香花油茶炭疽病病原菌生物學特性與其他寄主植物上的炭疽病病原菌存在一定差異，與劉文魁[33]報道不同寄主上的C.fructicola在生物學特性方面存在較大差異的研究結果相符。

4 結 論

采用傳統形態學與現代分子生物學相結合方法，確定廣西香花油茶炭疽病病原菌為核果炭疽菌，香花油茶是核果炭疽菌的新寄主。 香花油茶炭疽病病原菌菌絲生長和產孢受溫度、pH、碳氮源和光照條件影響明顯，進行香花油茶抗病品種選育、制定炭疽病防治措施時需充分了解該菌的生物學特性。