不同品種油橄欖臘葉標本的采集與制作

馮麗 張榮

油橄欖（Olea europaea L.）是木樨科（Oleaceae）木樨欖屬（Olea）常綠喬木，亞熱帶著名果樹和重要經濟林木，其栽培品種因含豐富優質食用橄欖油而具有廣闊市場前景。主產區為地中海國家，我國引種始于1964 年，經過50 多年發展，全國栽培面積已達到10萬公頃，已成為中西部亞熱帶干熱區特色產業。我省隴南市作為主要適生區之一，近年來油橄欖栽培常規品種在當地得到廣泛應用，但仍然存在該區域種植品種單一、常規品種果實產量和出油率無法滿足當地大規模發展需求等問題，發掘和收集高產、優質、抗逆性強的新品種成為了油橄欖發展的必然趨勢。

植物臘葉標本是鑒別不同植物品種，直觀保存植物種質資源的一種重要方法。通過采集帶有花、果實的植物的一段葉枝，或帶花帶果的整株植物體，經在標本夾中壓平、干燥后，裝貼在臺紙上，供植物分類學研究使用。該方法在藥用植物、草本植物、膜質和草質葉片植物中得到廣泛應用。油橄欖由于葉片呈革質，細胞壁厚度較高，角質層發達，質地堅韌、厚實，制作臘葉標本難度較大，在該樹種中制作臘葉標本至今仍未見報道。因此，依托種質資源庫項目，開展油橄欖不同品種臘葉標本制作，對探索革質葉片標本制作新方法，鑒別不同品種油橄欖形態特征，直觀保存種質資源多樣性具有重要意義。

一、標本的采集

（一）制作工具：包括數碼相機、采集箱、標本夾、修枝剪、吹風機、吸水紙、草紙、報紙、瓦楞紙、臺紙、鑷子、毛刷、固體膠、針線、鉛筆、標簽、鑒定簽、標本盒等。

（二）采集方法：油橄欖屬于喬木，果實為漿果，整株帶根、帶果采集壓制不可能實現，因此盡量選擇采集葉片完整且帶花的枝條，使之具有典型代表性。5 月初采集不同品種油橄欖帶花芽的枝條進行標本制作，采集時間選擇晴天，避開晨露，一般以早晨10 點以后采集為佳。當天采集的標本材料當天整理壓制，不宜超過8 小時。枝條采集過程中，隨時掛好標簽，及時記錄采集樣地、樣號等，并暫時保存于采集箱。同時拍攝圖片，圖片要素包括油橄欖植株整株特性、局部特寫（枝條、葉片、花芽等具體特征）、周圍環境等重要信息。圖片可補充臘葉標本的不足，為植物鑒定提供有力的證明材料。

二、標本的壓制

壓制前用毛刷清理干凈枝葉灰塵，剪去多余的枝、葉，羽狀復葉剪短葉軸一側的小葉，保留小葉基部和復葉頂端小葉。枝條進行斜剪，下端削出45°光滑平整斜面，壓制時斜面向上，避免葉片重疊，每份標本要保留少數葉片背面朝上，葉片舒展平鋪，壓平后進行干燥定型。

三、標本的干燥定型

干燥定型是革質葉片臘葉標本制作的關鍵環節，一般而言較厚而老的革質葉材料需1 個月才能干燥，但較長的干燥時間容易造成標本顏色褪色，因此會采用不同的干燥方法快速干燥，常見的干燥方法有干燥劑法、微波法、烘箱法、熨燙法、電熱法、鋁制波紋板法、粘臺紙陰干法等。本實驗借鑒其他樹種干燥方法，設置自然風干法、熱風烘干法、冷熱交替烘干法、冷風烘干法對比進行干燥處理。

自然風干法：按瓦楞紙板-報紙-吸水紙或草紙-標本材料-吸水紙或草紙-報紙-瓦楞紙板-報紙-吸水紙或草紙-標本材料……方式疊置適量標本，吸水紙上下各放2～4 張，上下用標本夾捆緊，一個標本夾大概夾10 份樣本，白天放在通風透氣的室外進行風干，晚上收回室內，24 小時換一次吸水紙，5 天之后葉片不同程度出現黑色，但枝葉仍有較多水分，持續觀察15 天葉片完全風干后，葉片完全由綠色變為黑色。

熱風烘干法：標本疊置方式與自然風干法一致。上下用標本夾捆緊，豎直標本夾使瓦楞紙氣孔豎直向上置于烘架上，架下置暖風機。架下高10 厘米左右，以能夠安放暖風機為度。設定暖風機距離標本夾50 厘米左右進行烘干，6～8 小時后發現，葉片已經出現不同程度黑色。經過熱風連續烘至枝葉全部風干，葉片完全由綠色變為黑色。

冷熱交替烘干法：標本疊置方式與自然風干法一致。上下用標本夾捆緊，豎直標本夾使瓦楞紙氣孔豎直向上置于烘架上，架下置冷熱風機，架下高10 厘米左右，以能夠安放暖風機為度。設定暖風機距離標本夾10 厘米左右進行烘干，先用冷風吹12 小時，接著設定暖風機距離標本夾50 厘米，換成熱風吹12 小時，冷熱風交替烘干3 天后，標本葉片出現不同程度黑色，經過連續8 天冷熱交替烘干后，枝葉完全干燥，樣本50%變黑，標本成功率達到50%。

冷風烘干法：標本疊置方式與自然風干法一致。上下用標本夾捆緊，豎直標本夾使瓦楞紙氣孔豎直向上置于烘架上，架下置冷風機。架下高10 厘米左右，設定冷風機距離標本夾10 厘米左右進行烘干，室內每天24 小時持續烘，每24 小時換一次吸水紙，連續烘6天，用手折疊葉片發現，葉片大量脫水，持續觀察6 天后，葉片完全干燥，并且仍然保持綠色，標本制作成功率達到100%。

由此可見，對于油橄欖的革質葉片采用自然烘干法和熱風烘干法制作臘葉標本，耗時長，成功率低，而采用冷熱交替烘干法和冷風烘干法，大量縮短了標本干燥時間，且成功率較高，尤其冷風烘干法，標本完全干燥后，所有樣本的枝葉均能保持綠色不變，因此，冷風烘干法最適合油橄欖臘葉標本的制作。

四、標本的消毒

油橄欖標本收集過程中葉片往往附帶蟲卵、細菌以及真菌孢子等，存放時間長了可能導致標本被蟲蛀或細菌侵蝕，因此在標本封存前需進行消毒工作。常見的消毒方法有消毒液噴霧和藥物熏蒸等。消毒液消毒是將標本放入1%升汞酒精溶液中浸泡10～30 秒，或將消毒液直接噴灑在標本上。藥物熏蒸消毒是在消毒箱內放置二硫化碳或其它藥劑，利用氣熏法殺蟲，24小時后開箱取出標本。本實驗采用消毒液噴霧和藥物熏蒸相結合的方式進行消毒，將消毒液直接噴灑在油橄欖臘葉標本上，然后放置在裝有二氧化碳的消毒箱內，24 小時后取出。最后將消毒好的標本重新壓制脫水，固定裝訂。

五、標本的固定

標本固定是指將壓制、干燥、消毒好的標本固定在臺紙上的過程。油橄欖枝條標本比較大，一般選擇規格為40 厘米×30 厘米的白色臺紙為宜，標本固定時，所選位置既要考慮標本形態美觀，又要盡可能展現油橄欖枝葉的真實形態及特點，因此固定位置選擇應左偏上，留出粘貼標簽的位置。標本放置好后用線先固定幾個點，再將葉片、花芽等附件用固體膠定在臺紙上。標本固定好后，在右下角貼上標簽，標注完整的標簽內容，包括拉丁名稱、科屬、采集地、采集時間、采集人、周圍環境及伴生植物等信息，注意核對標簽上的信息與標本的信息必須一致。

六、標本的保存

標本保存需要專門的標本盒和標本柜，標本盒規格同臺紙相同大小，最好選擇白色透明盒子，便于觀察標本特征。標本柜要求結構嚴密、防潮效果好，并在存放前提前打掃、晾曬、消毒，放置樟腦丸、干燥劑。由于隴南市武都區屬亞熱帶大陸性季風氣候，夏季多雨空氣潮濕，制成的油橄欖臘葉標本很容易出現發霉變質現象，因此標本在消毒干燥后應及時裝入標本盒，并將標本盒一一登記、編號，整理標本數量，便于今后查閱、管理。將整理好的標本盒置于標本柜內，并將標本柜放在通風干燥的室內。此外，要定期檢查標本室，及時熏蒸消毒，避免標本損壞，取出觀察時輕拿輕放，保證標本長期保存。