不同栽培方式對石斛及其花茶品質(zhì)的影響

劉凱月，王湘閩，陳肖英，賴志勇

深圳市深業(yè)航天食品與環(huán)境檢測科技有限公司（深圳 518000）

石斛屬（DendrobiumSW.）為蘭科第二大屬，種質(zhì)資源豐富。道家經(jīng)典著作《道藏》將其列為“中華九大仙草之首”。我國的石斛屬植物有74種2變種[1]，其中藥用石斛就有39種，含有多種藥效成分，是一種“藥食同源”的植物[2]。

傳統(tǒng)石斛質(zhì)量的評價多以感官和形態(tài)為主，即以“莖粗、質(zhì)重、嚼之粘牙、味苦、無渣”作為評價石斛品質(zhì)的主要標準，但這一方法并不能完全體現(xiàn)其內(nèi)在品質(zhì)的優(yōu)劣。2015版《中國藥典》規(guī)定了鐵皮石斛多糖和醇溶性浸出物含量標準，以此作為評價鐵皮石斛品質(zhì)的重要標準之一。隨著現(xiàn)代研究技術(shù)的快速發(fā)展，石斛的化學(xué)成分[3-5]和藥理活性[6-9]的研究越來越廣泛。但是在以往的研究中，對不同石斛品種間比較的研究較多，對不同栽培方式的石斛品質(zhì)影響比較少，也沒有形成系統(tǒng)的石斛栽培方式對質(zhì)量影響的評價體系。因此，此次試驗針對常規(guī)種植的鐵皮石斛楓斗、巖壁野化鐵皮石斛楓斗、貼樹仿野生鐵皮石斛楓斗及其花茶不同栽培方式，測定其主要活性成分含量并分析多糖，進行差異性比較。以便為不同栽培方式石斛及其花茶的質(zhì)量評價以及開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用到的鐵皮石斛及花茶樣品均來自同一公司。

1.2 試劑和儀器

葡萄糖對照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；甘露糖對照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；蘆丁對照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；乙醇（AR，國藥集團試劑有限公司）；苯酚（AR，廣州化學(xué)試劑廠）；硫酸（AR，國藥集團試劑有限公司）；乙腈（HPLC，CNW）；乙酸銨（HPLC，CNW）。

SX2-4-10TP馬弗爐（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；HWS24電熱恒溫水浴鍋（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；FA1104天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；UV-1800PC紫外分光光度計（上海翱藝科學(xué)儀器有限公司）；Ultimate 3000液相色譜儀（Thermo fisher）。

1.3 活性成分測定

1.3.1 浸出物含量測定

浸出物的測定參考2015年版《中國藥典》[10]中的熱浸法。

1.3.2 多糖含量測定

多糖含量測定參考2015年版《中國藥典》[10]中的方法。

1.3.3 總黃酮含量的測定

總黃酮含量的測定參考SN/T 4592—2016《出口食品中總黃酮的測定》[11]。

1.4 多糖結(jié)構(gòu)的測定

1.4.1 甘露糖與葡萄糖峰面積比測定

取不同石斛樣品多糖水解液，采用液相色譜儀進行甘露糖與葡萄糖的峰面積比測定。

液相色譜儀條件：色譜柱：C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL/min；流動相：乙腈∶0.02 mol/L的乙酸銨溶液（20∶80，V/V）；檢測器：二極管陣列檢測器；檢測波長：250 nm。記錄甘露糖色譜峰與葡萄糖色譜峰，并計算甘露糖的峰面積與葡萄糖峰面積的比值。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同栽培方式石斛楓斗及花茶的浸出物含量分析

浸出物含量在一定程度上可以反映藥材質(zhì)量，2015年《中華人民共和國藥典》將其作為評價石斛品質(zhì)的標準之一。從表1可以看出，三種不同方式栽培的鐵皮石斛楓斗，醇溶浸出物存在差異，其中巖壁野化鐵皮楓斗醇溶浸出物含量最高，該常規(guī)養(yǎng)殖的鐵皮石斛試樣醇溶浸出物含量最低，2015版《中國藥典》規(guī)定，鐵皮石斛中醇溶性浸出物含量不得低于6.5%。故該供試品鐵皮石斛楓斗不符合《中國藥典》規(guī)定。不同栽培方式石斛楓斗的醇溶性浸出物含量從大到小排序為巖壁野化鐵皮石斛楓斗＞貼樹仿野生鐵皮石斛楓斗＞鐵皮石斛楓斗。

從表1可以看出，三種不同方式栽培的鐵皮石斛花茶，水溶浸出物差異不大，不同栽培方式石斛花茶的水溶性浸出物含量從大到小排序為巖壁野化鐵皮石斛花茶＞鐵皮石斛花茶＞貼樹仿野生鐵皮石斛花茶。

表1 不同栽培方式石斛浸出物含量表

2.2 不同栽培方式石斛楓斗及花茶的多糖含量分析

石斛中所含有的大量多糖物質(zhì)是石斛的主要功能成分之一，在調(diào)節(jié)免疫力、降血糖、抗氧化、抗衰老等方面發(fā)揮著重要的作用。從表2可以看出，三種不同方式栽培的鐵皮石斛，多糖存在差異，其中樹栽仿野生鐵皮楓斗多糖含量最高，巖壁野化鐵皮楓斗試樣多糖含量最低。不同栽培方式石斛楓斗的多糖含量從大到小排序為貼樹仿野生鐵皮石斛楓斗＞鐵皮石斛楓斗＞巖壁野化鐵皮石斛楓斗。

表2 不同栽培方式石斛楓斗及花茶的多糖含量表

從表2可以看出，三種不同方式栽培的鐵皮石斛花茶，多糖含量存在差異，不同栽培方式石斛花茶的多糖含量從大到小排序為：貼樹仿野生鐵皮石斛花茶＞鐵皮石斛花茶＞巖壁野化鐵皮石斛花茶。

2.3 不同栽培方式石斛的甘露糖與葡萄糖峰面積比分析

如表3所示，不同品種石斛多糖的甘露糖和葡萄糖含量差異不大。《中國藥典》規(guī)定，鐵皮石斛多糖的甘露糖與葡萄糖峰面積比應(yīng)在2.4～8.0之間。表3顯示，3種石斛樣品甘露糖與葡萄糖峰面積比值均不高，但符合藥典規(guī)定。

表3 不同栽培方式石斛的甘露糖與葡萄糖峰面積比

2.4 不同栽培方式石斛花茶的黃酮含量分析

研究表明，石斛中含有的黃酮類物質(zhì)具有良好的抗氧化[12]作用和抗腫瘤[13]作用。從表4可以看出，3種石斛花茶樣品的黃酮含量在0.61%～1.08%之間，其中巖壁野化鐵皮石斛花茶的黃酮含量（1.08%）最高，貼樹仿野生鐵皮石斛花茶黃酮含量（0.61%）最低，均高于不同品種鐵皮石斛中黃酮含量[14]。

表4 不同栽培方式石斛花茶的黃酮含量

3 結(jié)論

對不同栽培方式石斛及花茶活性成分含量和多糖進行比較分析，可知不同栽培方式間品質(zhì)差異明顯。因石斛中活性成分復(fù)雜多樣，故不能以單個成分含量的高低來判斷其品質(zhì)的好壞。水溶性浸出物中含有的活性物質(zhì)主要是水溶性多糖，醇溶性浸出物中的活性物質(zhì)有黃酮和石斛堿等。生巖壁野化鐵皮楓斗醇溶浸出物較高但其多糖含量并不高，所以可以推斷浸出物中除了含有以往研究中的一些活性成分外，還有其他成分的存在。浸出物含量的高低并不能絕對代表石斛品質(zhì)的優(yōu)劣。研究表明，多糖和黃酮含量常被用作評價石斛品質(zhì)的重要標準，樹栽仿野生、巖壁野化栽培斗均優(yōu)于常規(guī)栽培鐵皮石斛，其花茶與其保持一致，且花茶的黃酮含量遠遠高于石斛的黃酮含量，抗氧化效果更好。