文│胡曉惠(山東省陽谷縣畜牧獸醫事業發展中心)
在同期發情處理中,綿羊與山羊在行為上差異較大。相對于山羊在發情時哞叫,躁動不安,綿羊的發情狀態少有明顯的外部表現,在生產實踐中需要采用試情法進行發情鑒定,在集約化養殖模式下限制了生產效率,且所形成的人工成本增高,羊的養殖效益受到影響。有研究顯示,綿羊體溫升降往往與不同生殖生理階段相關聯,通過綿羊陰道溫度的連續性測量可能確定發情。
在探索新型測定綿羊陰道溫度的器械時,從技術角度往往需要確定發情生理與陰道溫度之間的關聯度。因此,研究的起始階段不可避免頻繁將溫度計放置在綿羊陰道,進而需要評價陰道的頻繁刺激可否帶來非生理狀態下的溫度測定值。其中陰道損傷和炎癥都需要客觀評估。資料顯示,炎癥的發生同樣會造成綿羊外周血液中的部分成分上升,如白細胞數目(WBC)、紅細胞數目(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)等。炎癥部位血液成分的變化可能會造成綿羊陰道溫度上升,影響陰道溫度測量的準確性,進而影響對綿羊發情狀態的判斷。筆者通過對陰道測溫綿羊的外周部分血液成分的分析,判斷炎癥狀態下綿羊血液成分變化和對體溫測量的影響。
1.試驗動物。阜陽市臨泉縣宋集鎮欣群牧業有限公司為本試驗提供試驗湖羊,并在此公司提供的試驗基地進行試驗。舍飼,保持良好通風,自由采食、飲水。每天6:00和16:00各飼喂1次,日常管理與免疫程序按常規飼養程序進行飼養。
2.試驗儀器和藥品。低速離心機,1000微升移液器,氯前列烯醇(簡稱PG,寧波三生,批號S200912)促黃體生成素釋放激素A3(簡稱促排A3,寧波三生,批號S200905),5毫升帶針頭抗凝管,醫用水銀溫度計(魚躍)0.5毫升離心管。獸用全自動血液細胞分析儀(ANIMAL,GRT—6008)
3.試驗設計與分組。選擇2~3胎次、體況中等、健康空懷母羊40只,隨機分為Ⅰ組和Ⅱ組,共2組,每組20只羊。Ⅰ組母羊每天間隔4小時進行人用溫度計導入母羊陰道,置入30分鐘,Ⅱ組不作處理,20天后,對兩組母羊進行頸靜脈采血2毫升,移入預先標記好的干凈離心管中,肝素鈉抗凝,在8℃環境下送檢,血樣采用獸用血細胞測定儀測定血液指標。
4.指標測定。白細胞數目(WBC)、紅細胞數目(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、紅細胞比容(HCT)、血小板數目(PLT)。
5.數據分析。試驗結果采用SPSS 20數據分析軟件進行方差分析,當P<0.01表示差異極顯著,P<0.05表示差異顯著,P>0.05表示無顯著差異。
由表1可知,試驗組湖羊和對照組湖羊外周部分血液生理指標基本相近,通過對湖羊白細胞數目(WBC)、紅細胞數目(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、紅細胞比容(HCT)、血小板數目(PLT)進行方差分析得出白細胞數目(WBC)、紅細胞數目(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、紅細胞比容(HCT)均表現出差異不顯著(P>0.05),在血小板數目(PLT)上,對照組和試驗Ⅲ組與試驗Ⅰ組之間具有顯著差異(P<0.05)。因此,頻繁對綿羊陰道進行操作會對綿羊外周血液中的血小板數目產生較大影響。
1.白細胞數目(WBC)分析。白細胞(WBC)是一種橢圓形、無色、有核的血細胞。根據動物體內白細胞的形態、功能和來源可以把白細胞分為3類,即粒細胞(中性粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞)、單核細胞和淋巴細胞3種。動物體內白細胞的正常總數為(4~10)×109/升,白細胞的正常生理范圍區間大,白細胞數目的變化可因每日不同時間段和動物機體的不同狀態在正常范圍內上下浮動,可能在檢測動物體內白細胞數目時發生顯著差異,造成檢測誤差。如果動物體內的白細胞數量高于正常值,可能是因為動物體內某些部位發生了炎癥。但白細胞數目的升高并不完全是動物機體發生炎癥的表現,白細胞數目的升高分為生理性和病理性之分,生理性白細胞數目的提高常見于動物劇烈運動、高生產勞作、氣溫過高、氣溫過低、應激、分娩、妊娠、饑餓等都是導致動物機體血液中白細胞增多的重要原因。由于試驗選取的母羊均不會產生生理性白細胞數目升高,所以導致白細胞數目升高的原因只能是病理性的白細胞數目升高,當試驗動物體內的白細胞升高只能是由于陰道頻繁操作導致的陰道黏膜發生損傷,導致陰道炎癥的發生,由表1可知,5組試驗湖羊和對照組白細胞數目無顯著差異。因此,并不會導致綿羊陰道炎癥的發生。
2.紅細胞數目(RBC)分析。紅細胞(RBC)是動物體內血液中最多的一種細胞,它在動物體內的主要生理功能是通過細胞中的血紅蛋白進行物質交換。動物體內紅細胞的平均壽命約為120天,紅細胞在動物體內都會發生新老更替,使機體內的紅細胞保持著相對的動態平衡。紅細胞的突然減少會打破這一平衡,紅細胞的減少可能是由于多種貧血所致,大量出血、白血病、母羊產后等對診斷貧血有重大意義。試驗中所有湖羊的外周血液中紅細胞數目均無明顯變化,試驗對外周血液中的紅細胞數目影響較小。
3.血紅蛋白濃度(HGB)分析。血紅蛋白濃度是指單位體積(升)內動物血液中所含血紅蛋白的量,血紅蛋白是一種含有色素的結合蛋白質,是構成紅細胞的主要成分,它能與外界的氧氣結合,在動物體內發生氣體交換。此外,血紅蛋白還能與氧氣結合生成氧合血紅蛋白,還能與動物體內的某種特殊物質形成多種血紅蛋白衍生物,在臨床診斷上可用于診斷某些血液系統疾病,此外,在診斷貧血上有重要意義。試驗5組和對照組在血紅蛋白濃度上差異不顯著,說明陰道頻繁操作對外周血液中血紅蛋白濃度影響很小。
4.紅細胞比容(HCT)分析。紅細胞比容(HCT)是指紅細胞在動物外周血液容積的比例。它能顯示出紅細胞與血漿在血液成分中的比例,影響血液黏稠度。紅細胞比容失衡的原因有很多,如缺水、燒傷、出血、休克、營養不良等均可能導致數量失衡。在試驗檢驗分析中并沒有出現顯著差異,試驗對紅細胞比容并無較大影響。血小板的正常數值在血小(100~300)×109/升。
5.血小板數目(PLT)分析。血小板占動物血液成分比例較小,在動物體內參與重要的止血功能,血小板在動物體內止血一共分為兩個階段,第一階段在傷處形成松軟的血栓子;第二階段形成堅硬的血栓子。雖然在血小板數目(PLT)上,對照組和試驗Ⅲ組與試驗Ⅰ組有顯著差異(P<0.05),但試驗Ⅲ組血小板數目濃度正常,血小板的數目并未減少,動物機體并沒有大量出血,血小板并沒有參與動物機體組織的凝血,血小板數目處在一個正常范圍內。因此,血小板的顯著性差異并不能判斷出綿羊陰道出血,發生炎癥。
通過上述數據分析能確定5項血液指標試驗組和對照組的差異不顯著,測量綿羊的陰道溫度來判斷綿羊發情雖然具有一定真實性,但僅通過人工測量綿羊體溫來判斷綿羊的發情情況遠遠不夠。人為測量綿羊體溫往往在生產實踐中存在諸多局限性,綿羊如果頻繁走動、自身患有疾病、相互打斗等行為都會導致體溫升高;綿羊不會同人一樣具有較高的自主調控性,其對外界環境要求較高,且這類恒溫動物的陰道溫度變化幅度不會超過0.5℃。當綿羊體溫發生較大變化時,極有可能是由于自身疾病、外界突發因素引發的體溫變化。試驗的進一步延伸應多采用光電等設備測量綿羊陰道溫度,提升試驗設備,用更加現代化的設備來測量綿羊體溫,這樣可以大大減少外界環境和自身因素對試驗數據的影響。光電設備可以大大減輕人工的勞動強度,解放人工,在一定程度上保證養殖綿羊的經濟效益。
本試驗結果表明,通過綿羊體溫來鑒定綿羊是否發情是可行的,可以為綿羊提高繁殖率、配懷成功率提供重要的數據支撐,為鑒定綿羊發情提供重要的科學依據。但通過先進的設備準確測量綿羊體溫還需進一步研究,對環境因素的把控需更進一步提升。